LCoR、NRIP1蛋白在宫颈癌组织中的表达及与临床病理、预后的关系分析

目的探讨配体依赖辅助抑制因子(LCoR)、核受体相互作用蛋白1(NRIP1)在宫颈癌组织中的表达及与患者临床病理、预后的关系。方法选取2015年1月至2016年6月于江门市新会区妇幼保健院接受手术治疗的124例宫颈癌患者作为研究对象。术中取癌组织及癌旁组织(距肿瘤组织边缘≥5cm),采用免疫组化法检测组织中LCoR、NRIP1表达情况,采用Pearson相关性分析法分析二者表达的相关性,分析二者表达情况与患者临床病理特征及预后的关系。结果宫颈癌组织中LCoR、NRIP1阳性表达率分别为76.61%、81.45%,均高于癌旁组织的27.42%、33.87%(P<0.05);Pearson相关性分析显示,宫颈癌组织中LCoR表达与NRIP1表达成正相关(r=0.746,P<0.05);宫颈癌患者癌组织中LCoR、NRIP1的表达与国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤浸润深度、肿瘤最大直径、淋巴结转移有关(P<0.05);LCoR、NRIP1阳性表达患者5年生存率分别为54.74%、55.45%,均低于阴性表达患者的79.31%、82.61%(P<0.05)。结论宫颈癌组织中LCoR、NRIP1表达水平较高,二者的表达与肿瘤进展和预后有关,LCoR、NRIP1有望成为评估宫颈癌患者预后的参考指标。

微小RNAs对肺癌细胞系侵袭、迁移及凋亡的影响

目的探讨微小RNAs(miRNAs)对肺癌细胞系侵袭、迁移及凋亡的影响。方法通过hsa-mir-933、hsa-mir-4700-3p、hsa-mir-3144-3p、hsa-mir-3972和hsa-mir-548a-5p感染目的细胞,流式细胞术检测5种miRNAs对肺癌细胞系的细胞凋亡的影响;Transwell分析5种miRNAs对肺癌细胞系的细胞侵袭效果;划线分析5种miRNAs对肺癌细胞系的细胞迁移的影响;Real-time PCR检测miRNA表达情况。结果与感染空载体组和无感染的对照组相比,感染了hsa-mir-933、hsa-mir-4700-3p、hsa-mir-3144-3p、hsa-mir-3972和hsa-mir-548a-5p的细胞凋亡明显增加,其中NCI-H460和A549均以转染hsa-mir-4700-3p凋亡率最高;5种miRNAs对肺癌细胞的侵袭数目明显减小;5种miRNAs对肺癌细胞的细胞的迁移效果减弱;Real-time PCR检测hsa-mir-933、hsa-mir-4700-3p、hsa-mir-3144-3p、hsamir-3972和hsa-mir-548a-5p处理后相应miRNA的水平表达均相应增加。结论5种miRNAs能够促进肺癌细胞系的凋亡,降低肺癌细胞系的高侵袭性,抑制肺癌细胞系的迁移,增加对应miRNA的表达。

miR-200a对肺癌A549细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的探讨miR-200a在肺癌细胞中的表达及其对A549细胞增殖、迁移及凋亡等生物学功能的影响。方法采用RTPCR检测肺癌细胞株A549、H23、H460和永生化人支气管上皮细胞株16HBE的表达水平。采用脂质体转染法将miR-200a mimics和阴性对照序列(miR-negtive control,miR-NC)分别转染A549细胞,运用CCK-8实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的改变情况;Transwell实验检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况。利用生物信息学方法预测miR-200a的靶基因。结果 miR-200a在肺癌细胞株A549、H23和H460相对表达水平均低于16HBE组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-200a mimics和miR-NC组分别转染A549细胞,CCK-8实验显示miR-200a mimics组在第4、5天时的OD值明显低于miRNC组,差异有统计学意义(P<0.05);平板克隆形成实验显示miR-200a mimics组细胞克隆形成率为(33.13±0.74)%,明显少于miR-NC组(45.57±1.27)%,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验显示,miR-200a mimics穿膜细胞数为(71.60±17.90)个,少于miR-NC组[(140.20±17.88)个],差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测显示,miR-200a mimics凋亡率为(17.80±1.90)%,明显高于miR-NC组[(11.33±1.96)%],差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学方法预测Tiam1等可能是miR-200a的靶基因。结论 miR-200a能够抑制肺癌细胞A549的增殖、迁移并促进其凋亡,为肺癌的治疗提供潜在靶点。miR-200a可能通过靶基因Tiam1发挥其对肿瘤的调控作用。

Foxp3和SMARCE1在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨Foxp3和SMARCE1在宫颈癌中表达水平及其相关临床意义。方法:选取60例宫颈癌组织作为研究对象,通过免疫组织化学检测癌组织中Foxp3和SMARCE1的表达水平,分析宫颈癌组织中Foxp3和SMARCE1的表达与患者临床病理资料的相关性;免疫组化检测SMARCE1在宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达;质粒构建及转染、Western blot、细胞免疫荧光、双荧光素酶、染色质免疫共沉淀等分子生物学实验检测Foxp3和SMARCE1表达的相关性。结果:Foxp3蛋白表达与宫颈癌更高的临床分期有关(P<0.05);SMARCE1蛋白与宫颈癌的淋巴结转移有关(P<0.05);Foxp3和SMARCE1蛋白的表达呈正相关(P<0.05);SMARCE1蛋白在宫颈高级别上皮内瘤变组织中的表达强于其在低级别上皮内瘤变(P<0.05);Foxp3可增强SMARCE1蛋白的表达,并可转录激活SMARCE1促进其表达。结论:宫颈癌中Foxp3和SMARCE1蛋白的表达成正相关,Foxp3可转录激活SMARCE1表达,参与宫颈癌的发生发展。

FOXC2在非小细胞肺癌细胞株及组织中的表达及意义

目的:研究叉头框C2(Forkhead box c2,FOXC2)在人非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)细胞株和组织中的表达水平,并探讨FOXC2与临床病理因素的相关性。方法:应用RT-PCR方法检测FOXC2在人肺癌细胞株A549和H460中mRNA水平的表达情况,并与永生化人支气管上皮细胞株16HBE进行比较;应用免疫组化(IHC)方法检测FOXC2蛋白在66例NSCLC组织和8例癌旁肺组织中的表达情况,并分析FOXC2表达与NSCLC患者临床病理因素的关系。结果:肺癌细胞株A549和H460中FOXC2的mRNA表达水平高于永生化人肺上皮细胞株,差异有统计学意义(P<0.05);FOXC2蛋白在NSCLC组织中表达高于癌旁组织,与肺癌组织淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、吸烟、组织学类型、分化程度和TNM分期无明显相关(P>0.05)。结论:FOXC2可能在促进NSCLC的发生和发展过程中发挥了重要的作用,有望作为评估临床肺癌患者预后的指标。

Foxp3/SMARCE1信号轴促进宫颈癌细胞侵袭和迁移

目的:探讨叉头样转录因子3(Foxp3)是否通过SMARCE1促进宫颈癌Hela细胞的侵袭和迁移。方法:基因芯片筛选下调Foxp3后下游差异表达基因。宫颈癌Hela细胞转染Foxp3 shRNA干扰后,Western blot和细胞免疫荧光实验检测SMARCE1的表达。Transwell迁移及侵袭实验观察Hela细胞共转染Foxp3 shRNA和SMARCE1质粒后迁移和侵袭情况。结果:基因芯片结果显示SMARCE1是Foxp3的下游基因;Western blot和细胞免疫荧光实验结果表明,Foxp3增强Hela细胞中SMARCE1蛋白的表达;Transwell迁移及侵袭实验证实Foxp3增强SMARCE1促进Hela细胞的迁移和侵袭。结论:Foxp3通过调控SMARCE1促进宫颈癌Hela细胞的侵袭和迁移,Foxp3/SMARCE1信号轴在宫颈癌的进展中可能起着重要作用。

卵巢成熟性畸胎瘤的假复层室管膜小管临床病理学分析

目的:探讨卵巢成熟性畸胎瘤(mature teratoma,MT)的假复层室管膜小管的形态和免疫组织化学表达。方法:收集广州中医药大学深圳医院(福田)、中山大学附属第八医院2019年3月至2022年3月伴有假复层室管膜小管的MT病例5例,另收集广州中医药大学深圳医院(福田)2019年3月至2022年3月伴有单层室管膜上皮的MT病例15例及海南省人民医院2019年3月至2022年3月未成熟性畸胎瘤(immature teratomam,IMT)7例作为对照。通过HE染色以及检测和神经上皮分化状态相关基因的免疫组织化学表达,即SALL4、Glypican3、巢蛋白、SOX2、Foxj1、Ki-67的表达,比较观察假复层室管膜小管和单层室管膜上皮、原始神经上皮小管的形态学特点及免疫表型。结果:伴有假复层室管膜小管的MT 5例,平均年龄26(19~31)岁,左卵巢2例,右卵巢3例,肿物切除后随访0.5~3年,平均1.5年,均无瘤生存。MT的假复层室管膜小管衬覆柱状或卵圆形上皮,层次可达4~6层,形态学和IMT的原始神经上皮小管较相似,不同于MT的单层室管膜上皮。MT的假复层室管膜小管、MT的单层室管膜上皮不表达SALL4、Glypican3,表达Foxj1,不表达Ki-67;IMT的原始神经上皮小管SALL4、Glypican3表达不定,不表达Foxj1,表达Ki-67。以上3组均表达巢蛋白和SOX2。结论:MT的假复层室管膜小管在形态学上和IMT的原始神经上皮小管较相似,在免疫表型上和MT的单层室管膜上皮较一致。Foxj1、Ki-67的联合应用,有助于鉴别MT的假复层室管膜小管和IMT的原始神经上皮小管。