外源性硫化氢通过PI3K/Akt/eNOS通路改善过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞衰老

【目的】本研究拟探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)通路对硫化氢(H2S)改善内皮细胞衰老的作用。【方法】建立60μmol/L过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老模型;衰老模型的评估及不同浓度硫氢化钠(NaHS)预处理对衰老的作用均通过检测纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率来研究评估。同时通过Western blot法检测各组内皮细胞中蛋白激酶B(Akt)蛋白、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,通过硝酸盐还原酶法检测一氧化氮(NO)含量。【结果】与对照组相比,HUVEC经60μmol/L H_(2)O_(2)预处理后,能显著提高细胞SA-β-gal阳性率和PAI-1的表达。而NaHS的预处理可以显著减少PAI-1的表达和细胞SA-β-gal阳性率,但可增加p-Akt蛋白、eNOS蛋白的表达及增加NO含量。【结论】NaHS可以改善H2O2诱导的内皮细胞衰老,其机制与PI3K/Akt/eNOS通路有关。

外源性硫化氢改善人脐静脉内皮细胞早熟性衰老与eNOS表达的关系

目的拟探讨硫化氢(H_(2)S)延缓人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的关系,为延缓HUVECs衰老提供新的靶点。方法建立60μmol/L过氧化氢(H_(2)O_(2))1 h诱导HUVECs衰老模型;通过检测衰老相关β-半乳糖苷酶(SAβ-Gal)染色阳性率来研究评估外源性硫氢化钠(NaHS)预处理对衰老的作用。同时通过Western blot法和RT-PCR法检测内皮细胞中eNOS蛋白和eNOS mRNA的表达,通过硝酸盐还原酶法检测一氧化氮(NO)含量。结果与对照组相比,HUVECs经60μmol/L H_(2)O_(2)预处理后,能显著提高细胞SAβ-Gal阳性率。而NaHS的预处理可以显著减少细胞SAβ-Gal阳性率,但可增加eNOS蛋白、eNOS mRNA的表达及增加NO含量。结论NaHS可以通过上调内皮细胞中eNOS的活性和蛋白表达改善H_(2)O_(2)诱导的内皮细胞衰老。