猪圆环病毒2型感染性克隆的构建及拯救病毒的双抗体夹心ELISA鉴定

旨在构建猪圆环病毒2型(PCV2)感染性克隆,并利用双抗体夹心ELISA对拯救病毒进行鉴定。通过PCR从阳性病料中扩增出PCV2两种基因型2b与2d的全基因组DNA,并分别克隆入pMD-19T载体,获得2个重组质粒,命名为p19T-PCV2b与p19T-PCV2d。利用SacⅡ酶切获得l 767 bp的PCV2全基因组,并在体外分别用T4连接酶连接而环化,将环状基因组转染至PK-15细胞,传至P6代,利用间接免疫荧光试验(IFA)对拯救病毒进行鉴定,结果表明PCV2b与PCV2d感染性克隆可拯救出病毒。利用PCV2单克隆抗体(单抗)作为捕获抗体,用辣根过氧化酶(HRP)标记的PCV2多抗作为检测抗体,建立检测PCV2病毒粒子的双抗体夹心ELISA方法,用于PCV2拯救病毒的鉴定。将该检测方法与IFA和半数组织细胞感染量(TCID_(50))结果进行对比分析,结果显示,ELISA检测值与Image-J所计算的IFA荧光强度及TCID_(50)的相关系数分别达到0.7和0.8以上,说明该方法与IFA及TCID_(50)检测结果均具有较强的一致性,可以用于PCV2拯救病毒的快速鉴定。

生猪肺脏及肛门拭子中血清4型猪腺病毒的PCR检测与分析

猪腺病毒感染极其普遍，猪场感染率很高，研究表明，英国西南部地区26％一53％的猪群具有种群特异性抗体，加拿大魁北克市猪腺病毒血清4型感染率高达18．3％。在自然条件下，猪腺病毒主要通过粪口途径或者气溶胶暴露进行水平传播，对于猪腺病毒来说猪是目前已知的唯一易感动物。

脐带血检测技术在产房仔猪腹泻防控中的应用

从2010年以来，产房仔猪腹泻问题一直困扰着广大养猪人，且在疾病问题中产房仔猪腹泻这几年来一直排在第一位，不论在举办的大小养猪培训和会议，大家谈论最多的话题都是产房仔猪腹泻问题，笔者一直在临床一线，

从猪乙脑疫苗的使用看我国养猪业的发展趋势!

01.猪价行情将如何发展?猪价持续低迷,加上近期蓝耳等疫情的影响,养猪业正面临着前所未有的巨大挑战。在这种情况下,母猪存栏变化多大?生猪产能去化如何?未来猪价行情如何发展?诸多此类问题无不牵动着广大养猪人的神经。接下来笔者将依托可靠的数据来源,从一个实际可行的角度帮助大家分析母猪存栏及结构变化,供大家参考。

湖南地区猪源多杀性巴氏杆菌部分保护性抗原基因分子流行病学调查

为探索多杀性巴氏杆菌(Pm)的保护性抗原基因在A与D血清型之间分布规律及其保守性,本研究通过对湖南地区分离的92株(A型:50株;D型:42株)猪源Pm的ompA、ompH、omp87、plpE、plpP、ptfA、fhab2、vacJ和tbpA等9种保护性抗原基因进行PCR检测。结果显示:在以上9种基因中ompA、ompH、omp87以及ptfA的检出率最高,均为100%;vacJ和plpP基因的检出率分别为91%和66%。而fhab2和plpE基因仅在A型菌株中检出,检出率分别为42%和40%。选取部分菌株,对其4种检出率为100%的基因进行测序显示,omp87的同源性介于99.1%~100%;ptfA的同源性介于97.2%~100%;ompA的同源性介于91.2%~100%;ompH的同源性介于84.6%~100%。此外,经抗原表位预测,omp A和ompH基因在部分抗原表位区域存在明显差异。本研究发现omp87和ptfA两个基因存在于本研究分离的92株猪源Pm,并且相当保守,该结果为巴氏杆菌基因工程亚单位疫苗开发过程中保护性抗原的选择提供了依据。

猪流行性乙型脑炎的流行特点及免疫预防

猪乙型脑炎是一种动物和人类共患的蚊媒病毒性传染病,该病对养殖业危害巨大,同时也对人类的公共卫生产生了潜在的威胁。本文主要从流行病学,临床症状及诊断、免疫预防的角度对该病进行总结与阐述。

脐带血检测技术在产房仔猪腹泻疾病预警及其临床应用

当前猪病复杂,其中最令养猪人恐慌的是产房仔猪腹泻,如何更好地预警和防控产房仔猪腹泻是最大的难题,本文从产房仔猪腹泻的预警及临床应用方面进行初步探索。1 当前腹泻相关疾病的感染特性大量临床发现：出生仔猪腹泻的日龄发生在0~5日龄较多,且不吃初乳蛮好,一吃初乳就开始呕吐和腹泻;将发病仔猪放置未发病母猪带,仔猪不发生腹泻。

猪圆环病毒2型基因组DNA的结构与功能研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒病相关疾病的主要致病原,可损伤宿主的免疫系统,加剧一些细菌病和病毒病感染的临床症状,在全球养猪业中造成巨大损失。PCV2的基因组DNA含有11个开放阅读框(ORFs),其中至少有7个ORFs编码的蛋白质分子质量大于5ku,但目前只有5种编码的蛋白(Rep、Rep′、Cap、ORF3和ORF4)发现于PCV2复制过程中。作者概述了当前PCV2基因组DNA的结构与功能,阐明PCV2的病原学,为防控PCV2感染提供科学依据。

不同伪狂犬病活疫苗免疫效力比较

为临床科学选用疫苗,对来自三个生物制品厂的伪狂犬病活疫苗的免疫效力进行了评价。试验选取35日龄伪狂犬阴性猪20头,试验根据疫苗接种情况分为5组,分别为:免疫疫苗稀释液的对照组(第一组)、免疫进口活疫苗组(第二组)、免疫国产活疫苗组(第三组)、免疫本公司ST细胞系增殖制备活疫苗组(第四组)、免疫本公司鸡胚成纤维细胞增殖制备活疫苗组(第五组),然后进行免疫监测和效力评价,观察不同疫苗组仔猪的抗体水平后攻毒保护情况。结果显示:一次免疫后各组抗伪狂犬病毒抗体水平增长缓慢,进行二次免疫后,抗体水平迅速增加并保持较高水平。攻毒后,从身体耐受性、体温变化、体重下降率以及g E抗体水平来看,第二组疫苗B和第四组疫苗D耐受性较强,较快恢复健康,体重下降率较小且g E抗体水平较高。

猪伪狂犬病的流行情况及净化对策

伪狂犬病在我国至今为止仍是对养猪业危害极为严重的疫病之一,文章主要通过伪狂犬病的病原学、流行病学、流行原因可能性分析、净化措施等角度对该病进行总结和提出净化建议。

猪乙型脑炎疫苗研究新进展

流行性乙型脑炎简称乙脑,是人畜共患急性传染病。该病可导致猪发生繁殖障碍性疾病,给养猪业带来了巨大损失。目前,除常用的3种传统疫苗外,亚单位疫苗等新型疫苗的研究也取得了重大进展,在日后的乙脑免疫中,新型疫苗必定会起到更加重要的作用。

猪乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株基础种子的鉴定

建立了猪乙型脑炎活疫苗基础种子库,对三批基础种子进行了鉴定。结果表明,三批猪乙型脑炎基础种子无外源病毒污染,对敏感实验动物小鼠、乳猪和怀孕母猪接种均安全、无异常反应,原代地鼠肾细胞传代至F12代,免疫原性保持稳定、毒力不返强。由此可见,猪乙型脑炎SA14-14-2疫苗株基础种子无外源病毒污染,具有可靠安全性和良好、稳定的免疫原性,可用于疫苗生产,研究为研制猪乙型脑炎活疫苗打下基础。

浅谈动物疫苗耐热保护剂的种类及作用机理

随着畜牧业的快速发展,我国研制出了大量的灭活疫苗、弱毒疫苗以及基因工程疫苗等各类动物疫苗,其中,采用冻干技术的弱毒活疫苗在市场上占据相当大的比重。然而,热稳定性和保护性能差是当前国内疫苗保护剂研究领域急需解决的两大难题;再者,产品对冷链的要求很高,这对疫苗的储存和运输造成很大挑战。因此,研究和开发新型有效的耐热保护剂对提高动物疫苗的质量至关重要。本文综述了目前研究已发现的大量有效的耐热保护剂种娄及其作用机理,以期为研制新型动物疫苗耐热保护剂指明方向。

猪流行性乙型脑炎流行及免疫预防

猪流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎．简称乙脑．是由乙脑病毒引起的一种人兽共患急性传染病．主要是蚊类等吸血昆虫传播．怀孕母猪感染后表现流产、死胎或木乃伊胎．公猪发生睾丸炎．育肥猪持续高热，仔猪常呈脑炎症状。JEV对猪的致死率不高，但此病造成怀孕母猪发生繁殖障碍是主要的经济损失．对作为畜牧业支柱产业的养猪业持续增产造成巨大的危害。

猪群免疫猪瘟疫苗后免疫效果不理想的原因及应对措施

我国自1954年成功培育出猪瘟兔化弱毒株“C株”，并制成疫苗用于猪瘟的防控以来，猪瘟疫苗的生产已有58年的历史。在此过程中，猪瘟疫苗从最早的弱毒疫苗发展到目前市场上普遍使用的ST猪瘟传代高效细胞苗，其生产工艺在不断的改进，疫苗质量和稳定性也有很大的提高。但是，目前全国各个省、市、自治区仍有散发性猪瘟流行，已从全国31个省、市、自治区分离到猪瘟病毒，猪瘟在我国呈上升态势。

鸡群抗体监测的重要性

疫苗免疫接种是控制鸡病流行的主要途径之一，鸡群的免疫保护以体液免疫（包括循环抗体和局部粘膜抗体）和细胞免疫为主。而细胞免疫、局部粘膜免疫抗体均不易用实验室方法评价，只有循环抗体即血凝抑制抗体可以用常规的血凝与血凝抑制方法检测，

猪圆环病毒2型疫苗的研究进展

猪圆环病毒2型(PCV-2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大经济损失。PCV-2感染可破坏动物机体的免疫系统,造成严重的免疫抑制,容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染,给疾病的诊断和治疗带来巨大的困难。疫苗免疫接种是防控PCV-2感染的有效手段,近年来,全球市场上已先后推出PCV-2灭活疫苗、亚单位疫苗和嵌合疫苗,实验室也致力于研究新型活载体疫苗、核酸疫苗、标记疫苗和小RNA分子疫苗等,文章就PCV-2疫苗的研究进展进行综述,为有效防控猪圆环病毒病提供参考。

支原体PCR检测方法的建立和应用

依据GenBank中登录的常见细胞污染支原体16S rRNA基因序列,选择高度保守的区域设计引物,建立了一种快速灵敏的支原体PCR检测方法。该方法可以特异性检测出6种支原体,并能敏感的检测到10个拷贝数的目的基因。采用建立的PCR方法和传统的培养法对23个不同样品(细胞、血清、疫苗成品、半成品)进行检测,符合度100%。该方法的建立可大大缩短疫苗生产过程中支原体检验所需时间。

一例肉鸡传染性法氏囊病的诊治

传染性法氏囊（IBD）是由传染性法氏囊病毒引起．主要危害雏鸡的一种急性高度接触性传染病。该病发生季节明显集中，高峰期为每年的5-7月份，其他月份，特别是9月份-翌年2月份发病率明显降纸。但近3-5年来，这种情况已变得十分不明显，5-7月份的发病率不高，反而其他月份的发病率则相应地升高，使发病季呈全年化趋势。

猪蓝耳病和伪狂犬病混合感染的诊断和防治

在我国养殖业迅猛发展而养殖水平参差不齐的大环境下,猪场疾病情况日趋复杂。猪繁殖与呼吸综合征和伪狂犬病均是猪场常发疾病。猪繁殖与呼吸综合征能引起妊娠母猪繁殖障碍、发热、流产、死胎、木乃伊胎等,仔猪和育成猪呼吸道症状的高死亡率病毒性传染疾病,不仅能造成大规模的死亡,且所引起的免疫抑制问题常造成其他细菌、病毒的混合或继发感染,