医学动物实验应关注“动物福利”

目的:促进医学实验工作者对"动物福利"问题的重视,科学、合理、人道地使用动物,使生物医学研究与人类道德文明同步协调发展。方法:从生物医学和伦理学角度阐述"动物福利"的概念及关注"动物福利"的必要性,并介绍动物实验中体现"动物福利"的具体方法。结果:在医学动物实验中关注和贯彻"动物福利"观念,旨在唤醒动物实验工作者和医学研究者爱护、保护、善待动物。结论:尊重生命,尊重实验动物是每个医学工作者应有的道德,医学实验工作者应树立科学的"动物福利"观。

O^6-甲基鸟嘌呤DNA转移酶在神经胶质瘤中的表达及其与亚硝脲耐药的关系

目的 :探讨O6 甲基鸟嘌呤DNA转移酶 (MGMT)在人脑神经胶质瘤中的表达情况及其与亚硝脲耐药之间的关系。方法 :采用免疫组化法对人脑神经胶质瘤石蜡标本中MGMT进行了检测 ,并与临床应用亚硝脲的疗效评价结果进行了比较。结果 :116例神经胶质瘤中MGMT阳性表达率为 6 7.2 %。MGMT阳性表达率最高者为髓母细胞瘤 (10 0 % ) ,表达率最低者为少枝胶质细胞瘤 (35 .7% )。在使用亚硝脲治疗的患者中 ,MGMT阳性表达与亚硝脲化疗效果呈显著负相关 (P <0 .0 5 )。肿瘤细胞的耐药程度与MGMT表达强度无关 ,只与其是否阳性有关。结论 :不同病理类型的神经胶质瘤对亚硝脲的耐药和敏感性明显不同。化疗前检测神经胶质瘤MGMT的表达情况 ,对预测化疗敏感性、指导临床使用亚硝脲化疗具有重要意义。

亚健康状态躯体症状自评量表的编制及信度、效度检验

目的编制适用于亚健康状态躯体症状评估的自评量表。方法预调查量表经148例测试后,根据反馈信息及统计结果,形成包括16个条目的正式调查用量表,将量表在626名医院员工及104名大学生中施测;采用症状自评量表(SCL-90)、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)作为效度参考;分析量表的重测信度、内部一致性信度、结构效度和效标关联效度。结果(1)亚健康状态躯体症状自评量表(简称简易症状量表)包括疲劳感觉、疼痛感觉、睡眠障碍及胃肠不适4个因子,共解释总方差的56.2%,因子载荷范围在0.380-0.849之间;量表及各因子的Chronbachα系数在0.908-0.515之间;重测信度在0.633-0.746之间。(2)量表疲劳感觉、疼痛感觉及胃肠不适因子与SCL-90的躯体化因子的相关系数在0.524-0.349之间,睡眠因子和PSQI总分的相关系数为0.719。(3)医院员工的量表总分及各因子分均高于大学生(38.79±18.98/28.13±14.5,18.55±9.64/14.21±8.14,P<0.01)。结论亚健康状态躯体症状自评量表有较好的信度和效度,可用于亚健康躯体症状的筛选及初步评估。

高脂喂养大鼠主动脉内皮细胞粘附分子水平的变化

目的 :观察经不含胆固醇的高脂饲料长期饲养 ,大鼠主动脉内皮细胞各种粘附分子表达的变化及其与内皮病理改变间的关系。方法 :8周龄雄性SD大鼠 16只 ,随机分为高脂饲养组 (CF ,n =8)和正常饲养组 (CC ,n =8)。按照成年大鼠常规进食量喂养 ,保持两组大鼠每日摄取总热量相等 ,但是饲料中脂肪占总热量的比例不同(CF组脂肪占 5 9% ;CC组脂肪占 13% )。饲养至 36周龄 ,处死全部动物 ,取大鼠主动脉制成冰冻切片 ,以免疫组化方法分别检测内皮细胞中各种粘附分子表达 ,并经图像分析定量。同时 ,取大鼠主动脉组织行病理检查 ,观察光镜、电镜下主动脉内皮变化。结果 :高脂喂养 2 8周后大鼠出现明显的腹型肥胖 [内脏脂肪占体重百分比分别为 :CF组 10 .7% ,CC组 5 .3% (P <0 .0 1) ]。免疫组化染色显示 ,CF组大鼠主动脉内皮细胞整合素、选择素、免疫球蛋白超家族等粘附分子表达均较CC组增加。经图像分析显示 ,各种粘附分子表达量两组间存在显著差异 ,CF组明显高于CC组 (P <0 .0 5 )。光镜下 ,两组大鼠主动脉内膜均未见明显病变 ;电镜下 ,CF组可见主动脉内皮细胞变形、排列紊乱、部分脱落 ,而CC组主动脉内皮细胞形态正常。结论 :正常SD大鼠经不含胆固醇高脂饲料喂养 2 8周后 ,主动脉内皮细胞粘附分子表达明显增加 。

软骨寡聚基质蛋白对骨关节炎软骨破坏早期诊断价值的研究

目的 探讨软骨寡聚基质蛋白（COMP）对骨关节炎软骨破坏早期诊断价值。方法 兔右后膝伸直位石膏管型固定法制作骨关节炎模型；形态学方法观察造模不同时期关节病理切片；免疫组织化学方法检测软骨内COMP水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清COMP水平。应用t检验，PeErrson相关性分析。结果 ①伸直位石膏管型制动2周，模型关节呈现早期骨关节炎改变，制动6周呈现典型的中晚期骨关节炎特征；②造模前、模型2周、模型6周血清COMP含量分别是[（3．35±0．20）、（3．64±0．18）、（3．96±0．44）μg/L，P均〈O．05]；③未造模、模型2周、模型6周关节软骨内COMP表达强度分别是[（2．7±1．8）％，（5．7±0．7）％，（7．6±0．7）％，P均〈0．05]；④模型2周血清COMP水平与模型2周组、模型6周组OA病理评分存在线性相关关系（r均〉0．770，P均〈0．05）。结论 骨关节炎血清COMP检测对早期诊断骨关节炎软骨破坏具有重要的意义。

骨关节炎兔血清中软骨寡聚基质蛋白和基质金属蛋白酶-3水平

目的 探讨血清软骨寡聚基质蛋白（COMP）与基质金属蛋白酶（MMP）-3检测应用于临床评估骨关节炎（OA）软骨病理改变的可能性.方法 伸直位石膏管型制动16只兔右后膝关节制作OA模型.以造模时间不同分为造模2周、造模6周,左后膝关节未造模故为对照组.X线影像学与病理观察模型关节的变化;评估关节软骨降解程度（OA积分）;ELISA检测兔血清COMP、MMP-3水平;分析血清COMP、MMP-3水平与OA积分间的相关性.结果 （1）造模2周影像学变化较造模前不明显;造模6周兔胫骨平台边缘不光滑,关节间隙变窄,表面有毛刺样增生,胫骨平台及股骨内髁外侧可见唇样增生.（2）OA关节病变的形态学观察：造模2周兔关节软骨表面粗糙,表层裂隙;软骨细胞弥漫增多,排列紊乱;OA积分为（4.000±2.204）分.造模6周兔关节软骨表层可见较多裂隙延伸向下深达辐射层;裂隙周围可见脱水固缩坏死的软骨细胞且排列紊乱,部分成簇增生,各层结构不易分辨,有血管翳通过;OA积分为（10.620±1.408）分,与造模2周比,P=0.000.（3）造模2周兔血清COMP[（3.64±0.18）μg/L]、MMP-3[（1.99±0.81）μg/L]水平高于造模前[COMP（3.35±0.20）μg/L,MMP-3（1.61±0.71）μg/L];造模6周兔血清COMP[（3.96±0.44）μg/L]、MMP-3[（3.44±0.91）μg/L]水平高于造模前和造模2周,差异有统计学意义（P值均＜0.05）.血清COMP、MMP-3水平与OA积分呈线性相关关系（r值均＞0.710,P值均小于0.05）.结论 OA血清中COMP和MMP-3水平对评估OA软骨降解程度具有重要意义.

生姜泻心汤对伊立替康化疗后大鼠肠黏膜损伤修复的影响

目的探讨生姜泻心汤对伊立替康(CPT-11)化疗后大鼠肠黏膜及肠功能细胞的影响。方法健康雄性SD大鼠24只,按随机数字表法分为正常对照组、CPT-11组、中药加CPT-11组,每组8只。CPT-11组、中药加CPT-11组于实验第4日尾静脉注射CPT-11150 mg/kg,每日1次,连续2日,复制迟发性腹泻模型,正常对照组尾静脉注射等体积生理盐水。中药加CPT-11组于实验第1日,用生姜泻心汤(2 g/mL)灌胃给药,每只大鼠10 g/kg,连续用药9日,CPT-11组、正常对照组去离子水灌胃。于48、60、72、84、96及108 h时观察记录大鼠腹泻情况,计算腹泻发生率,同时参考Akinobu K方法进行腹泻评分。实验第10日处死大鼠,取回肠、盲肠及结肠组织,10%福尔马林液固定。行HE染色,在光镜下根据chiu标准对肠黏膜损伤分级。PAS染色观察肠杯状细胞、潘氏细胞表达;免疫组化CgA染色观察肠内分泌细胞形态,用Image-Pro-Plus 6.0对阳性细胞进行计数和累计光密度分析。结果正常对照组大鼠各时间点均无腹泻发生。CPT-11组大鼠48、60、72、84、96及108 h腹泻发生率为75.0%(6/8)、100.0%(8/8)、100.0%(8/8)、87.5%(7/8)、75.0%(6/8)及75.0%(6/8)。中药加CPT-11组腹泻发生率48 h为25.0%(2/8),60h为50.0%(4/8),72 h为12.5%(1/8),84 h后腹泻发生率为0.0%(0/8)。与本组60 h比较,CPT-11组48、84、96、108 h及中药加CPT-11组48、72、84、96、108 h腹泻评分明显降低(P<0.05,P<0.01);与本组72 h比较,CPT-11组84、96及108 h腹泻评分明显降低(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,CPT-11组各时间点腹泻评分升高(P<0.01),回肠、盲肠及结肠黏膜损伤分级升高(P<0.05,P<0.01),回肠、盲肠黏膜上皮杯状细胞表达明显减少(P<0.05),潘氏细胞数量及表达降低(P<0.01),内分泌细胞在回肠内表达增高,盲肠及结肠内表达减少(P<0.01);与CPT-11组比较,中药加CPT-11组腹泻评分明显降低(P<0.05,P<0.01),回肠、盲肠黏膜损伤分级降低(P<0.05,P<0.01),回肠、盲肠及结肠黏膜上皮杯状细胞表达均明显增加(P<0.05,P<0.01),回肠潘氏细胞数量及表达升高(P<0.05),内分泌细胞在盲肠及结肠内表达增加(P<0.05,P<0.01)。结论生姜泻心汤通过改善CPT-11化疗所致肠黏膜及肠功能细胞的凋亡、坏死,从而对CPT-11所致迟发性腹泻具有预防和治疗作用。