9例肺组织中检出诺卡菌的患者临床特征分析及文献回顾

目的总结通过肺穿刺或肺活检组织标本检出诺卡菌的肺部感染患者的临床特征、影像学特点、实验室检查方法与治疗结局。方法回顾性分析中日友好医院从2018年10月至2022年3月间收集的3105份肺组织中检出9例诺卡菌感染病例的临床资料,实验室肺组织培养方法及治疗转归,并对相关文献进行总结分析。结果9例诺卡菌感染肺组织病例中主要临床症状为发热、咳嗽、咳痰、胸闷等。其中1例患者咯血,4例患者既往身体健康,2例患者肺移植术后,1例患者长期使用激素。所有患者经CT引导进行肺穿刺或支气管镜下肺活检术得到的肺组织,经常规平皿培养、BACTEC MGIT BD960和(或)BD真菌/分枝杆菌瓶培养后分离诺卡菌,应用抗菌药物甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、阿米卡星、利奈唑胺等治疗后,9例患者中有8例病情临床好转。结论诺卡菌可致肺组织感染,行病理学检查结果阳性率较低,临床医生应认识到肺组织送检微生物学培养的重要性,需要结合临床表现考虑微生物实验室诺卡菌感染的可能性,以提高诺卡菌检出率。

隐球菌病的实验室检测与临床研究进展

隐球菌在免疫能力低下与正常人群中均可引起感染。随着检测手段的提高与临床认识的增加,隐球菌病发病率不断提高,成为威胁人类健康的重要真菌之一。近年来,隐球菌的分类与命名、实验室检测手段与药物敏感性试验、临床感染的特征与治疗等都有了较大进展。该综述对上述内容进行了总结,以期提高临床与实验室对该菌的认识,及时诊断,早期治疗。

下呼吸道诺卡菌病诺卡菌菌种分布和耐药情况分析

目的 收集中日友好医院106例诺卡菌病患者的108株非重复性诺卡菌,并分析其菌种分布及抗菌药物敏感耐药情况。方法 通过基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱或16S rRNA靶向测序鉴定诺卡菌菌属,采用微量肉汤稀释法测定诺卡菌对15种抗菌药物的敏感耐药情况,总结2例同时感染2种诺卡菌的肺诺卡菌病患者和3例肺移植后肺诺卡菌病患者的临床特征。结果 在108株诺卡菌菌株中,从痰液和支气管肺泡灌洗液分别分离出诺卡菌67株(62.0%)、32株(29.6%)。皮疽诺卡菌(35.2%)、盖尔森基兴诺卡菌(32.4%)和脓肿诺卡菌(11.1%)是分离数居前3位的诺卡菌菌种。所有诺卡菌菌株均未对利奈唑胺耐药,仅有2.6%的皮疽诺卡菌对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑(TMP-SMZ)耐药。结论 诺卡菌菌株对TMP-SMZ和利奈唑胺均高度敏感,但不同诺卡菌菌种对抗菌药物的耐药性特征不同。

耐万古霉素肠球菌基因分型及耐药性分析

目的明确万古霉素耐药肠球菌(vancomycin resistant enterococci,VRE)耐药基因型别及耐药性,指导临床用药。方法收集北京中日友好医院2016年10月至2017年10月临床分离的17株VRE,Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测其对临床常用14种抗菌药物的敏感性,E-test法确证其对万古霉素和替考拉宁的药物敏感性;PCR法检测17株VRE的耐药基因vanA、vanB、vanC1、vanC2/3,并经测序验证。结果 17株VRE均为耐万古霉素屎肠球菌,均对环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、青霉素100%耐药,对利奈唑胺、替加环素、奎奴普丁/达福普汀等敏感;其耐药基因型均为vanA型,其中有4株vanB表型-vanA基因型。结论所收集的VRE均对万古霉素高水平耐药,耐药型均为vanA型,应加强临床分离株的耐药监控,合理使用抗菌药物。

靶向小鼠CREPT基因134位点的CRISPR/Cas9载体构建及效率检测

[目的]构建靶向小鼠CREPT基因134位丝氨酸的CRISPR/Cas9载体并检测其编辑效率。[方法]利用在线网站设计sgRNAs并克隆入体外转录载体pUC57-sgRNA,桑格测序验证重组载体是否构建成功;以上述重组载体为模板体外转录获得的sgRNAs与商品化Cas9蛋白和靶片段于37℃孵育30 min,随后产物进行琼脂糖凝胶电泳以检测sgRNAs编辑效率。[结果]设计了2条靶向小鼠CREPT基因134位丝氨酸的sgRNAs,并分别准确插入pUC57-sgRNA载体,插入序列无突变;2条sgRNAs均能够与Cas9蛋白正确结合从而介导Cas9蛋白对靶片段的切割,编辑效率分别为0.30、0.36。[结论]成功构建了靶向小鼠CREPT基因134位丝氨酸的CRISPR/Cas9基因编辑载体,且由此转录出的sgRNAs均具有编辑活性,可直接用于小鼠受精卵显微注射制备点突变小鼠模型。