Mammotome微创旋切系统在乳腺外科中的应用(附132例分析)

目的探讨B超引导下Mammotome微创旋切系统对乳腺肿块诊断与治疗的应用价值.方法132例221处乳腺肿块在B超引导下进行Mammotome微创旋切术.其中一侧单发肿块79例,单侧或双侧多发肿块53例,直径0.5～5.2cm,平均1.4 cm,149处肿块临床可扪及.结果所有肿块均完成Mammotome微创旋切切除,平均旋切24次,平均36 min (10～40 min).无一例操作失败.所有肿块均获得明确病理诊断,良性病变129例,乳腺浸润性导管癌3例均行乳腺癌改良根治术.皮肤伤口小,除10例有轻度皮下瘀血外无其它并发症.结论B超引导Mammotome微创旋切系统进行乳腺肿块切除,操作简易,切除彻底,创伤小.

提高石蜡包埋组织中提取DNA质量的实验研究

目的 :确定从石蜡包埋组织中提取 DNA的最佳条件。方法 :改变石蜡切片厚度、组织脱蜡时间、消化液蛋白酶 K浓度、组织消化时间等参数 ,组合出 96种不同提取 DNA的条件 ,比较各种条件下所提取 DNA的数量和质量。结果 :各种条件均可以提取出一定数量的 DNA,但有些条件所提取的 DNA不适合于做 PCR及 DNA序列测定。结论 :从石蜡包埋组织中提取 DNA的最佳条件为 ,1 0 .0 μm组织切片 ;切片脱蜡 2次 ,脱蜡时间分别为 2 h和 1 2 h;消化液中蛋白酶 K浓度5 0 0 mg· L-1;组织消化 1 2

129例亚急性甲状腺炎外科手术差错分析

目的 :分析亚急性甲状腺炎外科手术差错的原因。方法 :回顾性分析错误地行甲状腺部分或大部分切除术的 1 2 9例亚急性甲状腺炎病历。结果 :医生对亚急性甲状腺炎只了解局部的体征而忽视全身症状和 (或 )整个病史是导致该病误诊、误治的主要原因。绝大多数病例术前可以明确诊断而避免不必要的手术。结论 :临床工作中可进一步降低亚急性甲状腺炎的医疗差错。

石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应影响因素的研究

目的 探讨石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。方法 应用从石蜡包埋组织中提取的DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子 ,分析石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。结果 10 .0 μm× 1组织切片组 ,PCR反应循环次数 4 0次组 ,PCR反应模板量 0 .0 5 μg组PCR反应取得高质量目的基因DNA。结论 减少提取组织用量有利于减少抑制PCR物质的量 ,有利于反应的成功 ;PCR反应循环次数一般应大于 4 0次 ;PCR反应时减少模板量有利于PCR反应成功。

XIAP和bcl-2在乳腺癌中的表达及其意义

为探讨XIAP和bcl-2在乳腺癌中的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系,笔者采用免疫组化SP法检测60例乳腺癌中的XIAP,bcl-2和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并用TUNEL法测定凋亡指数。结果示XIAP在患者的年龄、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移等指标各组间差异无显著性(均P>0.05),但患者的生存期≥3年者XIAP的表达率显低于<3年者(P<0.05)。bcl-2在乳腺癌I级,II级与III级相比较差异有显著性(P<0.05)。XIAP与细胞凋亡和增殖有关;而bcl-2仅与细胞凋亡有关。提示XIAP与乳腺癌患者的生存期有关,可作为独立的评估预后的因素;其表达与bcl-2表达之间无关,提示两者是通过不同途径发挥各自的生物学作用。

增殖细胞核抗原表达及细胞核DNA含量在胃癌早期诊断中的意义

应用免疫组化ＬＳＡＢ法及流式细胞分析技术（ＦＣＭ），对１２例早期胃癌，１５例胃癌前病变（８例胃粘膜中～重度不典型增生，７例轻度不典型增生）及６例正常胃粘膜增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及细胞核ＤＮＡ含量进行了测定。着重探讨了胃粘膜癌变过程中ＰＣＮＡ的表达及ＤＮＡ含量变化的意义，试图为胃癌的早期诊断提供客观依据。结果表明：ＰＣＮＡ标记指数（ＬＩ）随胃粘膜病变程度的加重呈递增趋势。中～重度不典型增生与早期胃癌之间无明显差异（Ｐ＞０．０５）；ＤＮＡ非整倍体检出率比较，早期胃癌明显高于胃粘膜轻度不典型增生组（Ｐ＜０．０１）。

胰腺损伤的诊断和外科治疗

目的 探讨胰腺损伤的诊断和外科治疗。方法 回顾性分析 41例胰腺损伤的临床资料。结果 胰腺损伤 41例中I级 8例 ,II级 16例 ,III级 8例 ,Ⅳ级 5例 ,Ⅴ级 4例。单纯性胰腺损伤 12例 ,合并其他脏器损伤 2 9例 (70 7% )。术前诊断胰腺损伤 7例 ,占17 1%。 41例均行手术治疗。治愈 34例 ,死亡 7例 ,死亡率为 17.1% ,其中 4例死于严重多发伤。发生胰瘘、肠瘘等并发症者 16例 ,占 39 0 %。结论 胰腺损伤的诊断要结合临床资料综合分析判断 ,术中要认真探查。应根据胰腺损伤的情况选择合理的术式 。

PTEN与VEGF在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的通过对张力蛋白同源物基因(PTEN)和血管内皮生长因子(VEGF)在大肠癌中表达的研究,探讨PTEN和VEGF的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测58例大肠癌组织及20例正常大肠组织中PTEN和VEGF的表达。结果大肠癌组织中PTEN蛋白表达显著低于正常大肠组织(P<0.01),与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。VEGF在大肠癌中的表达显著高于正常大肠黏膜的表达(P<0.01),与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。PTEN在大肠癌中的表达与VEGF呈负相关(P<0.05)。结论PTEN失活或蛋白表达降低与大肠癌淋巴结转移及Dukes分期相关,且与VEGF呈负相关。联合检测PTEN、VEGF有助于提高大肠癌侵袭转移能力的评估,对大肠癌的预后判断具有重要的临床意义。

超声技术在预防PICC所致血栓中的应用

目的探讨超声检查技术降低PICC所致静脉血栓及留置导管失败的作用。方法将96例肿瘤化疗PICC置管患者按入院时间分为超声组(38例)和常规组(58例)。超声组于PICC置管前、后应用超声检查选择血管,观察血管情况、血流变化并采取针对性措施预防血栓;常规组常规穿刺置管。结果两组一次置管成功率比较,差异无显著性意义(P>0.05);血栓发生率比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论采用超声技术可以有效降低PICC置管患者静脉血栓的发生率。

C-erbB-2、Nm23和MDR1基因在原发性乳腺癌中的表达及与转移和预后的相关性

目的:探讨C-erbB-2、Nm23和MDR1在原发性乳腺癌中的表达及其与转移和预后的关系。方法:采用免疫组化法(S-P法)检测49例乳腺癌患者手术切除组织中C-erbB-2、Nm23和MDR1的表达,并分析3种基因之间的相关性及其与转移的关系。结果:49例乳腺癌患者中C-erbB-2、MDR1高表达和Nm23低表达的患者转移发生率高(P<0.05)。MDR1的表达与C-erbB-2的表达有相关性(rs=1.00,P<0.05),Nm23与C-erbB-2的表达无相关性(rs=0.80,P>0.05),MDR1的表达与Nm23的表达无相关性(rs=0.80,P>0.05)。C-erbB-2、MDR1同时阳性的患者及C-erbB-2阳性、Nm23阴性的患者转移发生的几率较高,预后较差。结论:C-erbB-2、Nm23和MDR1与乳腺癌转移有关,多个指标联合检测用来估计患者预后指导意义更佳。

XIAP基因在乳腺癌发生及发展过程中的表达及意义

目的:探讨XIAP基因在乳腺癌发生和发展中的作用。方法:采用免疫组化S-P法检测正常乳腺组织(96例)、乳腺囊性增生组织(56例)、乳腺不典型增生组织(12例)及乳腺癌组织(119例)中XIAP蛋白的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果:XIAP蛋白在正常乳腺组织、乳腺囊性增生组织、乳腺不典型增生组织及癌组织中的阳性率分别为4.2%(4/96)、5.4%(3/56)、42.7%(5/12)和72.2%(86/119),后两者的阳性表达率明显高于前两者(P<0.005);浸润性非特殊型乳腺癌XIAP蛋白阳性率(82.0%,73/89)明显高于浸润性特殊型乳腺癌(45.4%,10/22)和早期浸润性乳腺癌(37.5%,3/8)(P<0.05);XIAP蛋白表达在有淋巴结转移的乳腺癌中有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05)。结论:XIAP蛋白在乳腺癌发生、发展不同阶段呈不同程度的表达,过度表达提示预后不良。

巴曲亭在胃癌和直肠癌根治术中的应用

目的观察蛇毒血凝酶(巴曲亭)在胃癌、直肠癌根治术中和术后的止血效果。方法胃癌、直肠癌患者各100例,随机分成巴曲亭组和对照组,每组胃癌、直肠癌患者各50例。巴曲亭组术前30min、术中分别静脉滴注巴曲亭1U,创面用浸泡巴曲亭生理盐水溶液的纱布压迫止血,术后静脉滴注巴曲亭2U/d,连续3d;对照组仅用0.9%氯化钠溶液。观察切口的止血时间、切口单位面积出血量(g/cm2),记录术中出血量、术后3d的引流量和围手术期浓缩红细胞的输入量,同时观察巴曲亭对凝血功能的影响。结果巴曲亭组与对照组切口止血时间分别为(120.3±38.7)s和(158.8±37.6)s,切口单位面积出血量分别为(0.2±0.1)g/cm2与(0.3±0.2)g/cm2,术中出血量分别为(254±110)g与(386±145)g,术后总引流量分别为(289±135)g和(405±196)g,浓缩红细胞输入量分别为(0.8±0.4)U与(1.9±0.5)U,巴曲亭组均少于对照组(P<0.05)。而两组术前和术后凝血功能无明显差异(P0.05)。结论巴曲亭在胃癌和直肠癌根治术中具有明显的止血效果,安全性好,能明显缩短手术时间,减少术中、术后出血和围手术期输血。

NK4基因在重组腺病毒中的表达与初步鉴定

目的 构建含有肝细胞生长因子 (HGF)NK4基因的重组腺病毒载体 ,为应用HGF/NK4进行肿瘤基因治疗奠定实验基础。方法 应用AdEasy腺病毒载体系统 ,将PCR扩增所得的NK4基因片段与穿梭质粒pShuttle CMV进行连接 ,获得重组质粒pShuttle CMV NK4 ,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共转化大肠杆菌BJ5 183获得重组腺病毒质粒pAdCMV NK4 ,用该质粒转染 2 93细胞包装产生出重组腺病毒rvAdCMV NK4。重组腺病毒分别经电子显微镜技术及RT PCR、WesternBlot等方法进行鉴定。结果 得到含有NK4基因的重组腺病毒rvAdCMV NK4 ,电子显微镜下可见典型腺病毒颗粒形态 ,RT PCR及WesternBlot分析显示rvAdCMV NK4感染 2 93细胞后NK4基因可有效转录并表达。结论 成功构建出含有NK4基因的重组腺病毒rvAdCMV NK4 ,为下一步开展关于NK4基因的肿瘤治疗提供了基础。

粪便脱落细胞中p53基因突变检测对大肠癌诊断价值的探讨

目的探讨利用PCR—SSCP分析技术进行粪便脱落细胞中p53基因突变检测用于大肠癌早期筛选诊断的可能性。方法对40例大肠癌患者留取手术切除的癌组织及术前保存的粪便。分别从肿瘤组织及粪便中提取DNA。应用基因扩增．单链多态性分析。溴乙锭（PCR—SSCP—EB）染色方法检测两种标本中p53基因扩增情况及第5、6、7、8外显子突变情况，进行对照分析。结果p53基因特异性扩增产物及5，8外显子突变在肿瘤组织及粪便脱落细胞中广泛存在。肿瘤组织中p53基因突变27例，粪便中24例，其p53突变检出的敏感性为60％，无粪便中检出突变而肿瘤组织未检出者，两种标本中突变检出部分符合率为100％。结论检测粪便脱落细胞中p53基因突变为大肠癌的早期诊断提供了可能性。

大肠癌组织中PTEN和COX-2的表达及其相关性研究

目的通过对PTEN和环氧合酶-2(COX-2)在大肠癌中表达的研究,探讨PTEN和COX-2的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测58例大肠癌组织及20例正常大肠组织中PTEN和COX-2的表达。结果大肠癌组织中PTEN蛋白表达显著低于正常大肠组织中表达(P<0.01),且与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。COX-2在大肠癌中的表达显著高于正常大肠黏膜的表达(P<0.01),与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。PTEN在大肠癌中的表达与COX-2呈负相关(P<0.05)。结论PTEN失活或蛋白表达降低与大肠癌淋巴结转移及Dukes分期相关,且与COX-2呈负相关。抑癌基因PTEN和COX-2在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。

PCR反应体系中Mg^(2+)浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响

目的 探讨PCR反应体系中Mg2 + 浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响。方法 从石蜡包埋组织中提取DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 13外显子 ,分析PCR反应体系中Mg2 + 浓度分别为1 5mmol L、2 0mmol L、2 5mmol L、3 0mmol L、4 0mmol L时PCR反应产物中目的基因含量及对PCR产物基因序列测定的影响。结果 5种条件扩增的目的基因经纯化后DNA含量分别为 4 8ng μl(1 5mmol L)、2 6 6ng μl(2 0mmol L)、4 0 2ng μl(2 5mmol L)、38 5ng μl(3 0mmol L)、4 4 5ng μl(4 0mmol L) ;Mg2 + 浓度为 4 0mmol L时PCR产物电泳图见到多条非特异性条带 ;Mg2 + 浓度为 2 5mmol L时PCR产物直接测序反应曲线峰图背景噪音 (噪峰 )减小 ,信噪比 (信号 噪音 )增高。结论 从石蜡包埋组织中提取DNA行PCR反应 ,Mg2 + 浓度为 2 5mmol L时反应特异性强 ,PCR产物质量高。较高的Mg2 + 浓度可以增加PCR反应产量 。

CD44拼接变异体V6与上皮钙粘附素在胰腺癌中的表达及意义

目的探讨CD44拼接变异体V6(CD44 Splice varint V6,CD44V6)和上皮钙粘附素(E-Cadherin,E-CD)在胰腺癌中表达及与胰腺癌浸润、转移的关系,评价CD44V6和E-CD在胰腺癌浸润转移中的作用。方法采用SP免疫组化染色方法,检测43例胰腺癌组织中CD44V6和E-CD的表达情况。结果正常胰腺导管上皮细胞CD44V6呈阴性表达,胰腺癌组织中CD44V6阳性表达率达58.1%(25/43),CD44V6阳性表达与胰腺癌浸润深度、淋巴结转移情况密切相关(P<0.05),与胰腺癌组织分化程度无关(P>0.05)。正常胰腺导管上皮细胞E-CD呈强阳性表达,60.5%(26/43)的胰腺癌组织中E-CD呈异常表达,E-CD的异常表达与胰腺癌组织分化程度、浸润程度、淋巴结转移情况关系密切(P<0.01)。CD44V6和E-CD在胰腺癌中的表达无明显相关性(P>0.05)。结论CD44V6阳性表达和E-CD异常表达与胰腺癌浸润、转移关系密切,检测CD44V6和E-CD表达有助于对胰腺癌浸润转移潜能的判断,二者可以作为胰腺癌浸润转移的生物学指标。