同济医科大学病理生理学教研室中澳友谊补体实验室简介

作为中澳教育合作项目之一的中澳友谊补体实验室是在原同济医科大学病理生理学教研室补体科研组的基础上建立的。1988年9月西澳大学及澳大利亚皇家第二医学中心的达金斯(R L Dawkins)教授应同济医科大学赵修竹教授的邀请访问了武汉,经过充分的协商,双方签署了象征中澳友谊的补体实验室成立的备忘录,不久即得到双方国家教育部门的批准。达金斯教授领导的澳国皇家第二医学中心内两个医院的临床免疫学实验室是国际上颇具声望的免疫遗传学研究中心之一,该室在下列方面进行过出色的工作:①HLA第一类与第二类血清学工作;②补体定型,包括C4、Bf、C2及C3;③DNA限制性片段长度多态现象(RFLP);包括Southern印迹及脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)等。

中国湖北地区汉族家系补体第四成分(C4)单倍型的检测

用我室仿国际标准C4定型程序改进后建立的方法及羧肽酶B处理后C4分型方法对湖北地区93个无血缘关系的汉族家系进行C4单倍型的检测,对310个C4单倍型分析可见,我国汉族以A3B1频率最高(0.4194),A3B2次之(0.1161),A2B1与A4B2均为0.0903。以下依次是AQOB1(0.0645)、A3BQO(0.0548)、AQOBQO(0.0322)、A2B2(0.0256)、A4B1(0.0161)、A2B92(0.0129)等。从连锁不平衡参数(Δ)的卡方数值可见,A4B2、AQOBQO及A2B92具有极显著意义的阳性△值;而A4B1与AQOB2则具有极显著意义的阴性△值。将我们的结果与日本人、美国及德国白人,南非黑人的资料进行了对比,并进行了一些讨论。

中国维、苗、瑶、壮四个少数民族补体C4的遗传多态现象的检测报告

使用国际第四届补体遗传学会议推荐的方法及薄层激光扫描技术,检测了我国维吾尔族、苗族、瑶族、壮族的补体组分4(C4)的多态性,并与我们以往检测过的汉族的C4多态性一起进行了比较。结果发现,在C4A座位上,以C4A3频率最高,以下在汉族、苗族、瑶族、壮族中依C4A2、Q0、4、1次序降低。在C4B座位上,频率最高的均为C4B1。其它基因频率的依次排列,汉与维为2、Q0、3,苗与壮为92、Q0、2、3,瑶为Q0、2、92等。民族间的差异比较集中地存在于C4A2、C4B2、C4AQ0、C4BQ0等4个基因。本文还对中国汉族、日本人、白种、黑种人群的C4同种异型差异进行了对比与讨论。

HLA第三组补体成分C_2、B因子及C_4别型与脑中风关联的研究

对58例脑中风病人作了 HLA 第三组成分 C_2、B 因子及 C_4别型的检测,并与110例正常人作了对照,结果发现 B 因子的 FF 纯合子表型及 B 因子 F 基因频率在中风病人显著增高.

中国广东汉族人C_4、Bf多态性及其补体单倍型研究

目的探讨广东汉族人C4、Bf遗传多态性及其构成的补体单倍型频率。方法用琼脂糖高压电泳及免疫固定的方法对广东正常汉族家系144条染色体作了属于HLA-Ⅲ的Bf、C4A、C4B的遗传多态性及其构成的补体单倍型检测与分析。结果共发现13个补体单倍型,居前4位者为S32、S31、S42、F42,其中有4个单体型呈高度连锁不平衡。表型以BFS(0、8542)、C4A3(0、7291)、C4A4(0、2188)、C4B2(0、5937)、C4B1(0、3542)最常见。结论广东汉族C4、Bf多态性及其构成的补体单倍型有自己的遗传背景。

中国人HLA-Ⅲ(C4A、C4B、Bf、C2)的遗传多态性及其与疾病的关系

C4、Bf、C2均为补体的固有成份,为形成两条途径C3转化酶与C5转化酶的关键分子。这三个补体蛋白的基因紧密连锁,定位于人第6染色体短臂(6p21.3)。

HLA-Ⅲ类成份及其构成的补体型与重症肌无力相关性的研究

对42个无血缘关系的重症肌无力(MG)患者家庭及36个健康献血员家庭成员的EDTA血浆用琼脂糖高压电泳及免疫固定的方法对属于HLA-Ⅲ的Bf,C4A及C4B的遗传多态性及其构成的补体型进行了检测。通过家系分析及对比发现,MG的Bf基因频率与正常人无差异;C4A~*4的基因频率病人远大于正常人,而C4A~*2则较常人为小。在补体型方便,MG患者与正常人亦不相同:患者以S42的频率最高,常人则以S31最高。MG患者的S42、S31及S40之间存在着正向连锁不平衡,S32和S41之间存在着负向连锁不平衡。进一步分析显示,S42与MG密切相关,这主要是由于C4A~*4与MG强烈相关,而Bf~*S和C4A~*2又与C4A~*4连锁不平衡的结果。

羧肽酶B消除C4副带后对湖北地区C4基因频率及家系C4单体型与补体型的检测

人的补体第四成份(C4)具有高度多态性,其别型的经典检测法仅用神经氨酸酶预处理血浆,这样电泳后每一C4别型表现3条区带,一主两副,定型困难。最新发现,加用羧肽酶B预处理血浆,可以消除副带,使定型变易,且更准确。我们用新的方法重新对湖北地区汉族人的C4基因频率、C4单体型与补体型进行了测定,发现两法结果基本类似,略有区别。鉴于新法优越,建议今后作为检测C4多态性的常规方法。

我国大陆主要少数民族HLA多态性聚类分析和频率分布对中华民族起源的启示

本文是1991年11月6—13日横滨第11届国际组织相容性会议(IHWC)协作科研中我国主要少数民族(苗族、布依族、蒙古族、满族、回族、藏族、维吾尔族)和南北汉族样本HLAⅠ、Ⅱ、Ⅲ类抗原多态性分析的联合报告。聚类分析表明,苗、布依与南方汉族聚类,蒙、满、回、藏与北方汉族集群,提示中华民族包含南北两大群体。维吾尔族非常疏远地共聚于高加索人种。高加索人种起源的HLA抗原基因频率(A3、B8等)由西向东又由北向南递减。东南亚蒙古人种起源的HLA抗原基因频率(B46等)由南向北递减。HLA抗原基因频率的这种梯度分布反映我们祖先自远古史前时期以来的不断迁移和相互融合的过程。本文讨论了中华民族包含南北两大群体这一事实对于中华民族起源的启示。

湖北汉人全身性红斑狼疮患者补体第4成分基因限制性片段长度多态性的研究

用Ｃ４５末端探针和限制性内切酶ＴａｑⅠ对７５例湖北汉人ＳＬＥ患者和５８例正常人进行了ＲＦＬＰ检测，同时用琼脂糖凝胶电泳免疫固定方法测定了其中５１例患者和５７例正常对照的Ｃ４蛋白质表达情况，结果发现，患者中２４例（３２．０％）的ＲＦＬＰ带型为７．０－５．４ｋｂ（Ａ型），１０例（１３．３％）为７．０－６．０ｋｂ（Ｂ型），４０例（５３．３％）患者ＲＦＬＰ带型为７．０－６．０－５．４ｋｂ（Ｃ型），仅一例（１．３％）带型为７．０－６．４－５．４ｋｂ（Ｄ型），即带有表示Ｃ４Ａ基因缺失的６．４ｋｂ片段。正常对照组中ＲＦＬＰ带型仅检出Ａ、Ｂ、Ｃ三型，与患者组在分布上无统计学差异。Ｃ４表型分析结果发现，患者中Ｃ４ＡＱ０者为２２例（４３％），正常对照中Ｃ４ＡＱ０者为１０例（１７．５％），计算ＲＲ值＝３．５６，χ２＝８．４６，Ｐ＜０．０１。上述结果表明，Ｃ４Ａ蛋白质缺失与ＳＬＥ易感性密切相关，但在湖北人群中Ｃ４Ａ蛋白质缺失的主要原因可能不是由于Ｃ４Ａ基因的缺失所致。

广东汉族人群补体C2、Bf、C4的遗传多态现象

对110例广东汉族人血清作了补体C2、Bf、C4的测定,其基因频率分别为:C2*C:0.9500, C2*B:0.0227, C2*A:0182, C2*QO:0.0091;Bf*S:0.8364,Bf*F:0.1409, Bf*SO7:0.0091,Bf*SO25:0.0091, Bf*SO55:0.0045; C4*A3:0.6327, C4*A4:0.1327,C4*QO:0.1020,C4*A5;0.0255,C4*A2:0.0918, C4*A1:0.0053; C4*B1:0.4569, C4*B2:0.4416, C4*QO:0.0558, C4*B5:0.0152,C4*B96:0.0152, C4*B3:0.0102, C4*B92:0.0.051。本调查在我国首次发现一例C2*QO纯合子。

中国布依族HLAⅢ类抗原的分型研究

我们对贵州省布依族人进行了HLA Ⅲ类抗原—Bf、C4A、C4B、C2的分型研究。试验结果表明布依族的等位基因中以BfS、C4A3、C482、C481的频率为最高,分别达95.2、40.1、41.3、35.9.在Bf、C4A、C4B的单倍型频率中以BfS-C4A3-C4B2;BfS-C4A4-C482为最高,分别达18.0、15.5。本文根据国内文献报道和第11届国际会议资料,对布依族和其他少数民族的补体分型结果作了比较。发现布依族的C2A基因频率是最高的,中国少数民族Ⅲ类抗原分布正如血清学对Ⅰ、Ⅱ类抗原分型一样,可以聚类为南北二大群体。

全身性红斑狼疮病人HLA-Ⅲ补体单倍型频率的初步检测

对18个SLE病人家系的HLA-Ⅲ补体单倍型进行检测,得出36个补体型,分类归属于14种类型。发现病人补体型CS00的频率较正常对照显著增高,这可能与SLE的发病有关。还有一些型别也有变化,与SLE发病的关系有待进一步探讨。

中国人不同C4基因型时血中C4浓度的定量检测

用神经氨酸酶及羧肽酶B处理血浆,依次经C4高压琼脂糖电泳、免疫固定、薄层激光扫描等步骤,并结合血浆免疫火箭电泳定量法对我国武汉地区随机人群的血浆C4总量及C4两种同种型,主要别型,单、双QO,重复座位等时的血浆C4含量进行了检测与分析。结果发现:遗传因素明显影响血浆C4水平,因而在群体中表现宽广的C4浓度范围,特别在有C4QO与C4重复基因座位时差异特别明显。这一研究提示,不同的C4基因型,循环C4含量表现明显差异。临床上检测C4含量时应该考虑患者的C4基因型别。

广东汉族人群补体C_2,Bf、C_4的遗传多态现象

对110例广东汉族人血清作了补体 C2、Bf、C4的测定,它们的基因频率分别为:C2*C:0.9500,C2*Q0:0.009,C2*B:0.0227,C2*A:0.0182;Bf*S:0.8364,Bf*F:0.1409,Bf*S07:0.0091,Bf*S025:0.0091,Bf*S055:0.0045;C4A*5:0.0255,4:0.1327,3:0.6327,2:0.0918,1:0.0053,Q5:0.1020;C4B*5:0.0152,3:0.0102,2:0.4416,1:0.4569,92:0.0051,96:0.0152,Q0:0.0558。本调查在我国首次发现一例 C2Q0纯合子。本结果与湖北汉族人群的结果分别进行了比较。

HLA中部区域多态性反映单体型遗传保守性

对２８个代表１２种不同的ＨＬＡ单体型的细胞株同时进行Ｃ４、ＣＹＰ２１、ＢＡＴ３的ＲＦＬＰ检测，观察到了７种不同的Ｃ４－ＣＹＰ２１－ＢＡＴ３的ＲＦＬＰ结构形式，结果显示：Ｃ４－ＣＹＰ２１－ＢＡＴ３基因结构具有高度的多态性，且具有祖传单体型性质和祖传单体型特异性性质。本项研究表明，ＨＬＡ祖传单体型在遗传与进化过程中是高度保守的。本文还对祖传单体型研究的意义及随机个体单体型分型的可能性进行了探讨。

中国湖北地区23个汉族家系88条染色体MHC扩展单倍型的检测

人MHC-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类抗原的诸基因座位是紧密连锁的,一起构成MHC-扩展单倍型。我们对我国湖北地区23个家系,共88条染色体的这种单倍型进行了检测,发现仅有HLA-[A11-Cw3-B27-CS31-DR11]两条完全相同,有10条部分相同。此外对HLA-A、C、B、DR与补体型相关情况进行了分析。

中国人C4重复基因座位初探

从78个家系266人次中研究了中国人C4基因的重复情况。在78个家系中有7个家系成员表现C4基因重复,占9.0%;依人头计,在266人中有17人C4基因表现重复,占6.4%。这17人均为C4B 基因重复,重复的类型及人数分别为,①C4B(1,2):2人,②B(1,12):6人;③B(1,1):5人;④B(1,96,96):2人;⑤B(2,2):2人。

武汉地区胰岛素依赖型糖尿病病人补体型的初步检测

对武汉地区22个胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)病人家系成员的补体C2、Bf、C4A 与C4B的遗传多态性进行了检测,并统计分析了这4个成分组成的补体型分布及其频率。在病人44条染色体上共检出12种补体型,其中以SC31(0.386)与SC21(0.182)两种频率最高,与正常人频率分布接近。除3种补体型S(07)C01、S(07)C0(92)和FC20(各1例)仅见于病人外,其余7种IDDM与正常人比较也无显著差异,补体型SC32和SC22在正常人的频率分别为0.058和0.047,而在病人中未检出。此外还有 17种罕见补体型也未见于 IDDM病人中。

我国瑶、汉、壮、苗、维五个民族补体成份B因子多态性的调查报告

用琼脂糖凝胶高压电泳及免疫固定技术对我国瑶、汉、壮、苗、维五个民族人群的补体B因子(Bf)的多态性进行了检测,结果显示,这五个民族的Bf基因频率均以s型最高,但参差不齐。从高到低的顺序是瑶0.9071,汉0.8727,壮0.8426,苗0.7667,维0.6622。BfF基因频率其次,但也高低不一,从高到低的顺序是维0.2680,苗0.2000,壮0.1343,汉0.1159,瑶0.0929。频率居第三位的是BfSO7,差别显著,维0.0586,苗0.0333,壮0.0232,汉0.0091,瑶0.0000。在罕见型方面,220例份汉族人中发现一例SO45杂合子,222例份维族中检出4例FO65及1例F1杂合子。本文结合我国其他民族及全球大量检测数据进行了一些对比讨论。