HCLV在PK-15细胞中的滴度和12nt的变化

在PK-15细胞上连续传代获得的HCLV,从第1～25代病毒的测序结果一致,同源性为100%。从第26代开始在12-nt(ttttttctttttt)插入处出现变化,第26、27代在69位碱基C的左右各多插入了一个T;第28、29代在碱基C的右侧多插入了2个T;第30、31代在C的左侧多插入了6个T,碱基C也变成了T;第32、33代在C的右侧缺失了2个T,碱基C也缺失;第34代在C的左侧缺失了5个T,在C的右侧缺失了5个T,碱基C也缺失,并且在第86位由原来的A变成G,第92位由原来的T变成C。将HCLV1～34代病毒接种24孔板中长满单层的PK-15细胞,于接种后72h进行荧光抗体检查,比较不同代次HCLV在PK-15细胞上增殖的差异。结果发现,从28代开始病毒滴度有所下降。

表达猪瘟兔化疫苗株E0蛋白的PK-15细胞系构建

将克隆到pGEM T-easy载体中的E0基因双酶切回收后,连接到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)中,利用Lipofectami-neTM2000将重组子转染PK-15、BHK-21、VERO 3种细胞,直接在荧光显微镜下用蓝光激发进行观察,在3种细胞中都可以观察到绿色荧光,而且在转染后的24、48、72 h 3个时间点上,观察到的荧光细胞数量逐渐增多,在72 h时荧光细胞的数量在3种细胞中都达到最多,总的来看,在PK-15中荧光细胞的数量最多。通过对细胞荧光的定位发现,重组质粒的荧光主要分布在胞浆内,而且细胞核周围的荧光较强,胞核与胞浆的界限明显,尤其是在PK-15细胞和VERO细胞中这种现象尤为明显。未携带E0目的DNA的pEGFP-N1 Vector转染3种细胞后,都可以观察到绿色荧光,但是整个细胞中是均匀出现荧光的。经酶切、PCR、单抗间接免疫荧光检测,PK-E0细胞中有大量的HCLV的E0表达,单纯的PK-15细胞中没有E0的表达。HCLV株在PK-E0细胞中从48h开始到72h的滴度比在PK-15细胞中的滴度要高。证明PK-E0细胞中E0蛋白的大量表达增加了HCLV在细胞中的复制。

浅析维生素与免疫的关系

营养素对畜禽免疫功能的影响是目前动物营养学的研究热点之一，关于蛋白质、氮基酸等营养素的相关报道很多，而关于维生素的相关报道却较少，维生素中对免疫功能影响较大的有维生素A、维生素D、维生素F（以下分别简称VA、VD、VE）及生物素，本文主要综述了这几种维生素对免疫功能的影响及其免疫机制。

平和心态、客观认识、科学防控口蹄疫

平和心态被本次报告放在最前面,究其原因在于,目前养猪场即使注射十几元的疫苗仍旧发病,这不得不让人发脾气。因而需要平和心态、客观认识口蹄疫,这样才能考虑科学防控。目前,口蹄疫疫苗的确对该病有作用,但并非百分百保护,同样乙肝疫苗、流感疫苗皆是如此,这是对待口蹄疫疫苗的首要认识。

影响多维产品质量的因素解析

维生素是维持动物正常代谢、生长发育和生产所必需的一类低分子营养物质,在配合饲料中所占比例较少,但非常重要,如VA对动物免疫、维护视力、骨骼发育有重要作用;VD可促进动物对钙、磷的吸收,维持骨骼代谢起重要作用;VE可提高动物免疫、生育有重要作用。

维生素对畜禽免疫功能的影响

营养素对畜禽免疫功能的影响是目前动物营养学研究热点之一，关于蛋白质，氨基酸等营养素对动物免疫功能的影响报道很多，而关于维生素对动物免疫的影响研究报道较少，维生素中对免疫影响较大的有VA、VD、VE及生物素，本文主要就这几种维生素对免疫功能的影响及其免疫机制做以综述。