内皮素3／内皮素受体B对A375细胞NF—κB／Bcl-2相关蛋白A1抗凋亡通路的调节

目的研究内皮素3（ET-3）对人恶性黑素瘤（MM）A375细胞核因子（NF）-κB／Bfl-1抗凋亡通路的调节。方法用ET一3（100nmol／L）刺激A375细胞24h后，流式细胞仪检测细胞凋亡率。RT—PCR及Western印迹测定不同浓度ET-3（0、1、10、100nmol／L）及其与内皮素受体B（ETRB）阻断剂BQ788联合干预A375细胞后，Bfl-1在mRNA和蛋白质水平的表达。Western印迹检测相同条件干预下磷酸化NF—KB（pNF—KB）的蛋白表达。结果ET-3可以降低A375细胞的凋亡率（F=10．68，P〈0．05）。ET-3对A375细胞Bn-1mRNA和蛋白表达水平的影响呈浓度依赖性上调，BQ788明显阻断ET-3上调Bn-1的效应（P〈0．01）。Western印迹检测结果显示，ET-3显著上调pNF—KB的表达（P〈0．05），BQ788干预下其表达水平降低，接近对照组，ET-3（100nmol／L）＋BQ788组与100nmol／LET-3组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论ET-3／ETRB通过激活NF—κB／Bfl-1抗凋亡通路抑制A375细胞凋亡。