全反式维甲酸和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK对胰腺癌细胞凋亡的作用

目的 观察全反式维甲酸 (ATRA)对体外胰腺癌细胞生长的影响以及 caspase抑制剂 Z-VAD- FMK对细胞凋亡的作用。方法 胰腺癌细胞 Pa Tu8988与 ATRA或与 ATRA+ caspase抑制剂Z- VAD- FMK共同孵育后 ,用 MTT方法观察细胞活性 ,观察细胞超微结构改变 ,DNA断裂分析 ,流式细胞仪检测凋亡细胞比例和测定 caspase- 3活性。结果 ATRA对细胞的生长有明显的抑制作用。 A-TRA诱导后电镜和 DNA断裂分析发现典型凋亡特征。与 ATRA处理组相比 ,ATRA和 Z- VAD- FMK联合作用对细胞凋亡比例无影响。ATRA组 caspase- 3蛋白的活性随孵育时间延长而升高 ,且与凋亡比例相关 ,Z- VAD- FMK处理组 caspase- 3活性明显下降。结论 ATRA能够抑制胰腺癌细胞生长并诱导细胞凋亡。同时 ,与 Z- VAD- FMK联合作用能抑制 caspase蛋白活性 ,但未使细胞凋亡比例相应降低 ,提示在胰腺癌凋亡过程中可能有其他蛋白酶的作用。

rhIL-15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的 获得rhIL 15基因工程菌。方法 从肺癌细胞株A549中提取细胞总RNA ,用RT PCR法扩增编码人IL 15成熟区基因的片段。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,插入融合表达质粒pGEX 4T 2的相应酶切位点 ,构建重组融合蛋白表达质粒 ,并转化感受态大肠杆菌BL2 1而得到工程菌。结果 重组质粒插入片段核酸序列测定的结果 ,与文献报道的IL 15蛋白成熟区的核酸序列相一致。该工程菌所表达的融合蛋白多数以包涵体的形式存在 ,占菌体蛋白总量的 39%。复性后 ,纯化的rhIL 15蛋白经MTT比色法初步测定 ,具有促进CTLL 2细胞增殖的能力。结论 获得了具有生物学活性的rhIL

全反式维甲酸对胰腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,通过体内实验观察全反式维甲酸(ATRA)对胰腺癌的治疗作用。方法将人胰腺癌细胞株SW 1990和Bx-PC3细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,予ATRA 40 mg/kg每日口服,或4 mmol/LATRA每次0.1 mL隔日瘤内注射。观察瘤体质量和体积变化,TUNEL法观察ATRA干预后移植瘤组织内的细胞凋亡情况,免疫组化法检测caspase-3的表达。结果成功建立两种人胰腺癌细胞株的移植瘤模型;口服和瘤内注射ATRA后,抑瘤率在Bx-PC3移植瘤分别为64.24%和55.78%,在SW 1990移植瘤分别为44.03%和49.13%;TUNEL法和电镜观察证实,ATRA诱导后移植瘤内出现细胞凋亡;免疫组化显示,caspase-3表达增加。结论ATRA口服或瘤内注射均能抑制胰腺癌移植瘤的生长,活化胰腺癌细胞内caspase-3,促进细胞凋亡。

干扰素研究进行时——干扰素基因工程回顾与展望

病毒的相互干扰是人们早就知道了的现象,即当人(或动物)受到第一次病毒感染之后,会干扰(或阻止)第二次病毒的再感染,1957年Isaacs和Lindenmann证明这是由于第一次病毒感染时,产生了一个物质中干扰素(Interferon),它可以干扰第二次病毒的感染.

干扰素只分三大类

干扰素的分类问题,很多人存在错误和混淆不清的概念,我在此澄清一下.最早干扰素分为I型与Ⅱ型,后来发现I型中又有两种成分,虽然它们共有干扰素受体成分,但二者的免疫原性完全不同,于是将I型又分为α及β两类,前者曾称白细胞干扰素,后者曾叫成纤维细胞干扰素.

干扰素研究进行时——干扰素基因工程回顾与展望

病毒的相互干扰是人们早就知道了的现象，即当人(或动物)受到第一次病毒感染之后，会干扰(或阻止)第二次病毒的再感染，1757年Isaacs和Lindenmarm证明这是由于第一次病毒感染时，产生了一个物质叫干扰素(Interferon)，它可以干扰第二次病毒的感染。在这以前科学家已发现了磺胺和抗生素，对于细菌的感染产生了很好治疗和防范作用，但人们对于病毒的感染，当时仍束手无策，所以干扰素的发现就引起科学家们的极大重视和兴趣，希望能将它用之于防治病毒感染性疾病。