乳痛方提取物通过蛋白激酶B通路影响人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的:研究乳痛方(RTP)提取物对人乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:实验分为空白对照组、阳性对照组(表柔比星)和RTP给药组,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度方剂(0.5,1,2,4,8,16 mg·mL-1)分别在24 h、48 h和72 h对MCF-7细胞增殖的抑制率;流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡率;免疫蛋白印记法(Western blot)检测Bcl-2、Bax、总蛋白激酶B(Akt)和p-Akt的表达。结果:与空白组相比,高浓度的RTP能明显抑制MCF-7细胞的生长,且具有时间和剂量的依赖性。RTP可诱导MCF-7细胞凋亡,细胞凋亡率随给药浓度的增加而增强。Western blot表明,RTP可明显上调Bax蛋白表达,而下调Bcl-2和p-Akt蛋白表达水平,具有明显统计学差异(P<0.05或P<0.01),且具有浓度依赖性,但对总Akt表达却无明显影响。结论:RTP可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与上调Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达,抑制Akt磷酸化从而阻断P13K/Akt信号通路,启动线粒体凋亡途径有关。

左卡尼汀联合表柔比星对不同肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的研究左卡尼汀(LCNT)与表柔比星(EPI)联合用药对人肺腺癌GLC-82和A549细胞增殖和凋亡的影响。方法分别将GLC-82和A549细胞分为空白对照组、EPI组、LCNT组和EPI+LCNT组,给予对应药物作用24 h后采用噻唑蓝实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和早期凋亡情况,蛋白质印迹法检测P53和Bcl-2蛋白的表达。结果与空白对照组比,单独给药LCNT能促进GLC-82细胞的增殖,20.00 μg/ml LCNT作用24 h后GLC-82细胞的增殖率为37.56%(P<0.01),而A549细胞的增殖率仅为6.32%,差异无统计学意义(P>0.05)。EPI联合LCNT可减弱EPI对GLC-82细胞增殖的抑制作用,联合作用24 h后GLC-82细胞的增殖抑制率较EPI组降低了12.14%( P<0.05)。与EPI组相比,EPI联合LCNT可使GLC-82和A549细胞的G0/G1期比例明显升高[GLC-82:(50.42±1.21)%比(25.94±0.66)%,P<0.01;A549:(54.92±1.71)%比(38.63±0.69)%,P<0.01],GLC-82细胞的S期比例降低[(34.21±0.96)%比(59.68±1.25)%, P<0.05 ],并阻止GLC-82细胞早期凋亡,而不影响A549细胞的凋亡。与EPI组相比,EPI+LCNT组GLC-82和A549细胞中P53蛋白表达均下调(均P<0.05),但EPI+LCNT组GLC-82细胞中Bcl-2蛋白表达明显上调(P<0.01),而A549细胞中Bcl-2蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论 LCNT与EPI联用可减弱EPI对GLC-82细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用,而对A549细胞无明显影响。LCNT能促进GLC-82细胞增殖,并使其细胞周期阻滞于G0/G1期,其机制可能与下调P53蛋白和上调Bcl-2蛋白的表达有关。