基于网络药理学与实验验证探讨肉桂酸治疗慢性心力衰竭的作用机制

目的采用网络药理学、分子对接及体外实验验证的方法,探讨肉桂酸治疗慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)的潜在靶点及作用机制。方法通过网络药理学在线数据库预测肉桂酸靶点及CHF靶点,取交集靶点于String数据库构建蛋白互作网络,通过Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析,筛选出核心靶点,使用Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析,预测肉桂酸治疗CHF的作用机制,采用分子对接技术及体外实验验证上述结果。结果网络药理学分析结果发现,肉桂酸潜在靶点187个,与6094个CHF疾病靶点相交,得到132个交集靶点,涉及CASP3、JUN、PTGS2、MMP9、TLR4等10个核心靶点。GO和KEGG富集分析显示,肉桂酸治疗CHF的作用主要与细胞对活性氧的反应、对氧化应激的反应等生物过程有关,涉及细胞凋亡等信号通路。分子对接结果显示,肉桂酸与10个核心靶点均具有良好的结合活性。体外实验结果显示,肉桂酸能显著降低心肌细胞H9c2凋亡率及活性氧水平(P<0.05),降低c-Jun、PTGS2、MMP9、TLR4 mRNA表达水平(P<0.05)和caspase-9、caspase-3、Bax蛋白表达水平(P<0.05),升高Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);使用乙酰半胱氨酸后,细胞凋亡率、活性氧水平及Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),与肉桂酸作用一致。结论肉桂酸能够调节多个信号靶点、抑制心肌细胞氧化应激损伤及细胞凋亡,发挥治疗CHF的作用,肉桂酸是苓桂术甘汤防治CHF的重要物质基础之一。

基于网络药理学与体外实验探讨茯苓酸治疗心肌纤维化的作用机制

目的:基于网络药理学与体外验证实验探讨茯苓酸治疗心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)的作用机制。方法:借助SwissTargetPrediction、GeneCards等数据库预测茯苓酸、氧化应激及MF靶点,取三者交集靶点于STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络,借助Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析,筛选出核心靶点,使用Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析,预测茯苓酸治疗MF的作用机制,采用分子对接技术及大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)实验加以验证。结果:预测发现,茯苓酸潜在靶点164个、氧化应激靶点3040个、MF靶点4441个,三者交集靶点84个,涉及Bcl-2、PTGS2、Bcl-2L1、MMP-2等9个核心靶点。GO分析发现,生物过程主要作用于抗氧化活性、对缺氧的反应。KEGG分析显示,茯苓酸治疗MF的主要信号通路为PI3K/Akt。分子对接结果显示,茯苓酸与Bcl-2、PTGS2、Bcl-2L1、MMP-2等9个核心靶点均具有良好的结合活性。体外实验结果显示,茯苓酸(5、10、20μmol/L)能显著抑制CFs迁移能力(P<0.01),降低ROS、MDA水平(P<0.05),升高SOD水平(P<0.05),下调CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-9、MMP-2、PTGS2 mRNA水平(P<0.05)和CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA蛋白表达(P<0.05),上调PI3K、Akt、Bcl-2、Bcl-2L1 mRNA水平(P<0.05)和p-PI3K、p-Akt蛋白表达(P<0.05)。采用PI3K抑制剂(LY294002)后,茯苓酸对CFs细胞中ROS、SOD、MDA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、p-PI3K、p-Akt作用被逆转(P<0.05)。结论:表明茯苓酸能够抑制CFs氧化应激损伤和心肌纤维化,该作用与其调控PI3K/Akt信号通路密切相关。

中药治疗支气管哮喘慢性持续期的用药规律及作用机制

目的:基于数据挖掘探讨中药治疗支气管哮喘慢性持续期的用药规律,借助网络药理学技术探究核心药对治疗疾病的作用机制。方法:检索2010年1月-2023年1月中国知网、万方和维普数据库,收集文献中运用中医药为主治疗支气管哮喘慢性持续期有效的方剂,采用频次统计、关联规则分析用药规律及核心药对。利用网络药理学探索核心药对的作用机制,并使用分子对接进行验证。结果:筛选出治疗支气管哮喘慢性持续期的处方61首,中药133味。关联规则分析出三项关联规则20条,置信度和支持度最高的药对为黄芪-白术-陈皮,确定其主要活性成分为山柰酚、槲皮素、7-O-methylisomucronulatol、柚皮素和芒柄花黄素,核心靶点有鹅丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)1、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素(IL)-6、肿瘤蛋白p53(TP53)和IL-1β,主要作用于PI3K-AKT信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路。结论:中药治疗支气管哮喘慢性持续期的核心药对组合可通过多成分、多靶点、多通路发挥治疗作用,为临床用药提供理论依据。

黄芩-黄连药对有效成分防治2型糖尿病的实验研究进展

2型糖尿病已成为影响全球居民健康的主要慢性疾病之一,黄芩-黄连药对是临床防治2型糖尿病的常用药对,其有效活性成分主要包括黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、药根碱、表小檗碱、小檗碱等,均具有良好的降糖作用,体现了对2型糖尿病防治的多成分治疗机制,也为后期寻找安全有效的先导化合物提供依据。

从病理生理机制谈中药改善糖尿病认知功能障碍

糖尿病是一种以糖代谢紊乱和胰岛素抵抗为特征的慢性代谢性疾病,其患病人数日益剧增,越来越受到人们的重视。机体长期处于高血糖状态不仅会导致血管损伤、器官损伤,还可引发中枢神经系统相关并发症,显著增加认知功能障碍等神经退行性疾病的风险。糖尿病认知功能障碍的发病机制复杂,尚未完全阐明,其中糖代谢异常、胰岛素信号转导异常、内质网应激、神经炎症通路、线粒体代谢异常、tau蛋白磷酸化以及Aβ沉积等均参与其中,共同组成了复杂而相互关联的发病机制。近年来,中药在改善糖尿病认知功能障碍方面取得了较大的进展。该文旨在综述有关糖尿病诱导认知功能障碍的危险因素和病理生理机制,以及相关中药治疗和预防糖尿病认知功能障碍的研究进展。

复方泽漆冲剂通过抑制NLRP3炎症小体活化改善咪喹莫特诱导银屑病样小鼠的作用及机制研究

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体探讨复方泽漆冲剂(泽漆、大青叶、白花蛇舌草、土茯苓等)对咪喹莫特诱导银屑病样小鼠的作用及机制。方法将56只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(阳性药组)、NLRP3抑制剂组(MCC950组)及复方泽漆冲剂低、中、高剂量组,每组8只。小鼠背部脱毛区涂抹5%咪喹莫特软膏诱导银屑病样小鼠模型,连续7 d。造模同时给药干预,复方泽漆冲剂低、中、高剂量组按照9.75、19.5、29.25 g·kg^(-1)剂量灌胃给药,甲氨蝶呤组按照1 mg·kg^(-1)剂量灌胃给药,各组灌胃体积为10 mL·kg^(-1);正常组和模型组灌胃等体积生理盐水;NLRP3抑制剂组按照25 mg·kg^(-1)剂量腹腔注射MCC950;每天给药1次,连续7 d。采用PASI(Psoriasis area and severity index)评分进行银屑病模型小鼠皮损指数评价;HE染色法观察皮损组织病理变化;免疫组织化学法检测皮损组织NLRP3蛋白表达水平;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量;qRT-PCR及Western Blot法检测皮损组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)mRNA及蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠皮损显著增厚,并出现典型红斑、浸润及鳞屑,PASI评分显著升高(P<0.01);皮肤角化过度伴角化不全,棘层增厚、表皮突下延,真皮浅层淋巴细胞浸润明显,表皮厚度显著增加(P<0.01);血清IL-1β、IL-18水平显著升高(P<0.01);皮损组织NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,给药组小鼠背部造模区皮损红斑及鳞屑明显减少,浸润程度明显减轻,PASI评分显著降低(P<0.05,P<0.01),皮肤组织病理损伤程度明显减轻,血清IL-18水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),皮损组织NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达均显著下调(P<0.05,P<0.01);复方泽漆冲剂高剂量组、甲氨蝶呤组及NLRP3抑制剂组小鼠的表皮厚度显著降低(P<0.01),血清IL-1β水平均显著降低(P<0.01)。结论复方泽漆冲剂能改善银屑病样小鼠的皮损,可能与其抑制NLRP3炎症小体的表达,降低血清炎症因子IL-1β、IL-18水平有关。

灵芝多糖实验研究进展

灵芝为我国传统的药食两用真菌,含有多糖等丰富的活性成分。研究通过查阅近5年来灵芝多糖的相关文献报道,首先对灵芝多糖的提取方法进行归纳和比较,其次对灵芝多糖的结构组成进行介绍,再者对灵芝多糖免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等药理作用进行概述,最后对目前灵芝多糖相关研究存在的诸多问题进行分析和展望,旨在为其合理开发和综合应用提供理论基础。

多指标综合评分法正交实验优选菊花的炒制工艺

[目的]优选菊花的炒制工艺。[方法]采用正交实验设计,以炒制温度和炒制时间为考察因素,以绿原酸、木犀草苷、3,4-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、芹菜素、总黄酮含量为评价指标,优选菊花炒制工艺。[结果]菊花的最佳炒制工艺为炒制温度130℃,炒制时间8 min。[结论]优选的菊花炒制工艺稳定可行,所得的工艺参数为菊花炒制工艺的建立提供参考。

复方辛夷滴鼻液的指纹图谱及7种成分含量测定研究

目的建立复方辛夷滴鼻液UPLC指纹图谱及7种成分含量测定方法,为其质量评价提供依据。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL/min,进样量1μL,检测波长230 nm,柱温30℃;在此条件下建立复方辛夷滴鼻液指纹图谱,同时,测定其木兰花碱、芍药苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、木兰脂素和短叶老鹳草素A的含量。结果建立了10批复方辛夷滴鼻液的UPLC指纹图谱,确定了16个共有峰,指认了其中7个成分,相似度均大于0.994;聚类分析可将10批样品分为3类;正交偏最小二乘判别分析筛选出对样品分类贡献较大的8个色谱峰;含量测定结果显示,7种成分的平均含量为0.0343~2.0598 mg/mL,RSD值为7.18%~23.52%。结论不同批次复方辛夷滴鼻液整体质量较稳定,但批次间部分成分含量存在一定差异;实验建立的指纹图谱及多成分含量测定方法稳定可行,可为复方辛夷滴鼻液的质量评价提供依据。

二参真武汤调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制心肌纤维化的体外实验研究

目的 探究二参真武汤抑制心肌细胞纤维化的作用机制。方法 采用灌胃给予SPF大鼠二参真武汤、贝那普利7 d的方法制备含药血清,从出生3 d内的乳鼠心脏中提取原代心肌成纤维细胞,采用免疫荧光和台盼蓝染色法鉴定细胞纯度与成活率,采用CCK-8法确定二参真武汤含药血清的最佳给药浓度与给药时间,采用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激原代心肌成纤维细胞复制心肌纤维化模型,将原代心肌成纤维细胞分为正常组、模型组、二参真武汤组、贝那普利组,采用ELISA法检测胶原蛋白(collagenase,Col)-Ⅰ和Col-Ⅲ含量,采用Western blot法检测平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平,qRT-PCR法检测α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达水平。结果 提取的原代心肌成纤维细胞纯度与成活率均达到95%以上。与正常组比较,模型组、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量显著升高(P<0.05),α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,二参真武汤组原代心肌成纤维细胞中α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 二参真武汤抑制心肌纤维化的机制与调节PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

基于数据挖掘探讨含钙中药药性规律

目的基于数据挖掘探讨含钙中药药性规律。方法查阅《中国药典》《中华本草》《中药大辞典》《安徽省中药饮片炮制规范》中29味主要含钙的中药,确定Ca^(2+)、阴离子含量,制成含钙中药原始数据库。采用Clementine 12.0软件进行关联分析,SPSS 23.0软件进行聚类分析、主成分分析,探讨含钙中药的一般药性规律和主要成分。结果含钙中药大多性寒,味咸,归肝经,主要功效平肝潜阳、安神镇惊,主要分为碳酸钙组、磷酸钙组、硫酸钙组,三者占含钙中药96.5%,主要成分为Ca^(2+)、CO_(3)^(2-)、PO_(4)^(3-)离子。结论含钙中药对小儿高热惊厥、高血压有潜在的治疗效果。

安徽主产区牡丹皮药材质量差异研究

目的探究由安徽道地产区铜陵引种到亳州产区的牡丹皮药材质量是否存在差异。为道地药材牡丹引种种植以及市场牡丹皮商品流通提供科学依据。方法建立牡丹皮药材指标性成分芍药苷、丹皮酚的含量测定方法,通过t检验分析两产地牡丹皮质量差异;建立高效液相色谱指纹图谱方法比较两产地牡丹皮质量差异,通过相似度评价和聚类分析进行整体比较分析。结果通过t检验分析两产地牡丹皮中丹皮酚和芍药苷两种成分含量差异并无统计学意义,通过相似度分析及聚类分析说明铜陵道地产区牡丹引种到亳州地区后所产牡丹皮质量并无明显差异。结论从指纹图谱和主要化学成分比较分析说明亳州产牡丹皮与铜陵道地产区牡丹皮质量差别不大,铜陵道地药材牡丹可广泛推广引种至安徽亳州地区种植。

灵芝在中药美容产品中的应用研究进展

中药灵芝因富含三萜、多糖等一些有效化学成分,在抗衰老、美白、防辐射、抗炎和抗过敏等方面可以改善皮肤美容。本文就灵芝近年来的皮肤美容功效及在化妆品中的应用现状及研究进展进行综述,展望了灵芝在化妆品中的应用前景,为灵芝在国内外美容市场进一步的发展提供科学依据。

基于网络药理学和动物实验探讨红曲治疗脑小血管病的作用机制

目的通过网络药理学和动物实验,初步探究红曲治疗脑小血管病(CSVD)的作用机制。方法通过PubChem、SwissTargetPrediction等数据库获取红曲成分及作用靶点,运用GeneCards、OMIM等数据库获取CSVD的疾病靶点,结合Cytoscape 3.7.1软件构建“药物-成分-靶点”网络;取交集靶点输入STRING 11.0数据库,构建PPI网络;利用DAVID 6.8数据库进行GO和KEGG分析。建立大鼠CSVD模型,通过Morris水迷宫、HE染色、ELISA、Western blot等验证网络药理学分析结果。结果筛选出43个活性成分,37个关键靶点,GO分析结果涉及神经炎症、细胞增殖等,KEGG结果涉及PI3K-Akt和RAS信号通路等;动物实验结果显示,红曲干预后可显著改善CSVD大鼠海马CA1区损伤,降低血清中IL-6、IL-1β、TNF-α炎症因子水平,上调PI3K/AKT/mTOR蛋白的表达。结论本研究结合动物实验对网络药理学预测结果进行验证,发现红曲可能通过调控PI3K/AKT/mTOR通路改善CSVD模型大鼠的症状,为红曲的临床应用提供依据。

经典美白复方“三白汤”质量标志物的预测分析

“三白汤”出自明代医家李梴的《医学入门》,由白芍、白术、白茯苓和甘草组方,因其具有补气益血、健运脾胃、美白祛斑等功效而得名。“三白汤”疗效确切,但化学成分众多,目前复方的药效物质基础尚不清楚。中药质量标志物(Q-Marker)是针对中药复杂体系特点提出的中药核心质量概念,主要是根据“质量传递与溯源、成分特有性、成分有效性、复方配伍环境和成分可测性”五原则进行预测。基于此预测分析出芍药苷、芍药内酯苷、没食子酸、白术内酯Ⅱ、甘草酸、甘草次酸、茯苓酸可作为“三白汤”潜在的Q-Marker,为“三白汤”药效物质基础研究和质量控制体系建立提供参考。

单因素考察结合Box-Behnken响应面法优化脑络欣通颗粒制备工艺及对脑卒中大鼠的影响

目的 完善脑络欣通颗粒的生产制造工艺考察研究,筛选出最佳辅料构成和最佳制备工艺条件,为脑络欣通颗粒的开发和应用提供理论和实验基础。方法 通过对脑络欣通颗粒干燥工艺的研究,考察辅料种类、辅料用量以及进风温度。在单因素实验的基础上研究脑络欣通颗粒最佳药物辅料构成,利用综合评分筛选出最佳的辅料种类、最佳的药辅比及最佳的乙醇浓度,再通过使用Box-Behnken响应面法对制备工艺设计进行优化。根据所得工艺进行制粒,对脑卒中模型大鼠进行脑络欣通颗粒剂灌胃给药,初步观察脑络欣通颗粒对脑卒中大鼠的疗效。结果既得颗粒剂干燥工艺研究考察结果中,辅料种类为糊精,辅料用量为5%,进风温度为145℃。脑络欣通颗粒最佳制备工艺:辅料种类为糊精,药辅比为1∶0.5,乙醇体积分数为95%,在此条件下综合评分值为0.872 946。相比脑卒中模型组大鼠,脑络欣通颗粒剂组神经元细胞数目有明显增加,初步推断颗粒剂对脑卒中大鼠有治疗作用。结论采用响应面法优选脑络欣通颗粒的制备工艺结果可靠,稳定性较高,方法简单可行,颗粒剂药效显著,可为脑络欣通颗粒剂的工业化生产提供依据。

基于Dectin-1-Syk-CARD9信号通路研究三黄汤缓解白念珠菌定植小鼠溃疡性结肠炎作用机制

目的基于Dectin-1-Syk-CARD9信号通路研究三黄汤治疗白念珠菌定植小鼠溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用葡聚糖硫酸钠自由饮用联合白念珠菌灌胃建立白念珠菌定植溃疡性结肠炎小鼠模型。将小鼠分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组、氟康唑组和三黄汤低、高剂量组,分别予相应药物干预。观察小鼠一般状况并进行疾病活动指数(DAI)评分,检测小鼠肠道白念珠菌载荷,测量结肠长度并进行结肠组织病理学评分,透射电镜观察结肠上皮细胞超微结构,ELISA检测血清和结肠组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-12含量,q PCR、Western blot和免疫组化检测结肠上皮细胞和结肠组织Dectin-1、Syk、CARD9及核因子(NF)-κBp65和炎症因子表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠活动减弱、摄食量减少,伴有稀便,DAI评分明显升高,肠道白念珠菌载荷增加,结肠长度缩短,组织病理评分增加,结肠上皮细胞间隙增宽,细胞质溶解,线粒体肿胀,血清和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-12含量升高,结肠上皮细胞Dectin-1、CARD9 mRNA和蛋白表达升高,结肠组织p-Syk、p-NF-κBp65、CARD9、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,三黄汤高剂量组小鼠DAI评分明显降低,肠道白念珠菌载荷减少,结肠长度增加,组织病理评分降低,结肠黏膜上皮细胞微绒毛较完整、排列较有序,线粒体轻度肿胀,血清和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-12含量均降低,结肠上皮细胞Dectin-1、CARD9 mRNA和蛋白表达降低,结肠组织p-Syk、p-NF-κBp65、CARD9、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论三黄汤可能通过抑制Dectin-1-Syk-CARD9信号通路、减少炎症因子释放,发挥抗白念珠菌定植UC作用。

基于PI3K/Akt信号通路探讨肉桂酸保护H_(2)O_(2)诱导H9c2细胞损伤的作用机制

目的:探讨肉桂酸对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞H9c2损伤的保护作用及与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:借助生物信息学预测慢性心力衰竭的作用机制,利用H_(2)O_(2)(100μmol/L)诱导心肌细胞H9c2构建氧化应激损伤模型,设正常组、模型组、肉桂酸(1、2、4μmol/L)组,采用CCK8法检测肉桂酸(1、2、4μmol/L)对H2O2诱导的H9c2细胞活力的影响,Hochest33342/PI双染色法和流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞ROS水平,比色法检测氧化应激标志物SOD、MDA、LDH、GSH和CAT水平,RTqPCR法检测细胞PI3K、Akt、caspase9、caspase3、Bax、Bcl2 mRNA水平,Western blot法检测细胞PI3K、pPI3K、Akt、pAkt、caspase3蛋白表达。加入LY294002(PI3K抑制剂)后对细胞凋亡率、ROS、SOD、MDA、LDH、GSH、CAT水平,PI3K、pPI3K、Akt、pAkt、caspase3蛋白表达进行检测。结果:生物信息学分析出慢性心力衰竭的发生、发展主要与PI3K/Akt信号通路有关。体外实验结果显示,肉桂酸能显著提高H_(2)O_(2)诱导后心肌细胞活力(P<0.01),降低细胞凋亡率和ROS、MDA、LDH水平(P<0.01),提高SOD、GSH、CAT水平(P<0.01),下调caspase9、caspase3、Bax mRNA水平和caspase3蛋白表达(P<0.05),上调PI3K、Akt、Bcl2mRNA水平和pPI3K、pAkt蛋白表达(P<0.05)。加入LY294002后,逆转了对肉桂酸对心肌细胞H9c2的上述作用(P<0.05)。结论:肉桂酸可通过调控PI3K/Akt信号通路抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞H9c2氧化应激损伤和细胞凋亡,保护心肌细胞。

桃红四物汤对大脑中动脉闭塞大鼠lncRNA表达的影响

目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照组、MCAO组和MCAO+THSWD组各获得3个大脑半球组织。采用RNA测序技术鉴定三组中的lncRNA基因表达。鉴定了THSWD调节的lncRNA基因,然后构建了THSWD调节的lncRNA-mRNA网络。通过MCODE插件鉴定lncRNA-mRNA网络的模块。基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书数据库(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)用于分析富集的生物功能和信号通路。鉴定了THSWD调节的lncRNA的顺式和反式调控基因。采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证lncRNA。分子对接用于验证lncRNA-mRNA网络靶点和通路相关蛋白结合能力。结果在MCAO大鼠中,THSWD共调节了302个lncRNA。生物信息学分析表明,一些核心lncRNA可能在THSWD治疗MCAO大鼠中发挥重要作用,此外,我们进一步发现THSWD可能也通过lncRNA-mRNA网络以及网络富集的补体和凝血级联反应等多通路治疗MCAO大鼠。分子对接结果表明,THSWD活性化合物没食子酸和苦杏仁苷与蛋白质靶点具有一定的结合能力。结论THSWD可以通过调节lncRNA保护MCAO大鼠脑损伤,为THSWD治疗缺血性中风提供了新见解。

桃红四物汤对大脑中动脉闭塞大鼠环状RNA表达谱的影响

目的筛选和研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠环状RNA(circular RNA,circRNA)表达的影响,探讨THSWD的可能作用及分子机制。方法采用下一代RNA测序技术检测THSWD治疗后MCAO大鼠circRNA表达谱,并与MCAO模型组和对照组进行比较。生物信息学分析预测潜在的靶向微小RNA(micro RNA,miRNA)和mRNAs。应用GO富集分析和KEGG通路富集分析方法分析差异表达的circRNAs的潜在作用。对表达差异显著的circRNA进行RT-qPCR验证。结果MCAO组与对照组之间存在87个差异表达的circRNA,MCAO组与THSWD组之间存在86个差异表达的circRNA。其中,THSWD可逆转MCAO模型诱导的17个circRNAs。为了证明DECs靶向的mRNAs的作用,使用了GO和KEGG数据库。进一步分析表明,5个表达差异显著circRNAs表达量与测序结果相似。结论首次确定了THSWD治疗后MCAO大鼠circRNAs的全面表达谱,提示THSWD对MCAO的治疗作用可能是通过调节circRNAs的表达实现的。