补骨脂定通过活性氧诱导乳腺癌MCF-7细胞DNA损伤和自噬

目的探讨补骨脂定（Psoralidin,PSO）抗乳腺癌作用与机制.方法培养MCF-7乳腺癌细胞,MTT实验测定细胞毒性.彗星电泳测定DNA损伤.DCFH2-DA测定细胞内活性氧（ROS）生成.Westernblot测定相关蛋白的表达.MDC染色测定自噬泡.结果PSO对MCF-7细胞具有明显细胞毒性,并呈时间依赖性和浓度依赖性.PSO诱导人肺癌A549细胞、乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞出现明显的拖尾现象.蛋白γ-H2AX、ATM、ATR、Chk1和Chk2表达明显上调.PSO诱导MCF-7细胞中噬泡明显增多.自噬信号通路蛋白p62、ULK1、Beclin-1和LC3II明显上调;AKT和mTOR蛋白表达下降,且呈剂量依赖性.PSO诱导细胞内ROS的产生.ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸（NAC）和NADPH氧化酶抑制剂DPI可明显抑制PSO诱导的ROS生成、细胞毒性作用、DNA损伤应答和自噬通路的激活.结论PSO通过ROS诱导肿瘤细胞产生DNA损伤和自噬.