对中药资源与开发专业建设的思考

中药资源与开发专业建设需要进一步完善。本文结合广州中医药大学的中药资源与开发专业的情况,对本专业的建设方向提出建议和改革措施。本专业的建设方向是要抓住"保证中药材质量、保障中药资源可持续利用"这一中心任务,从单纯重视药学课程向兼顾生物课程、进一步重视实验课程进行改革。

中药资源与开发专业本科生科研能力的培养

本科生参与教师科研工作是培养和提高其科研能力的有效途径,是高等教育培养创新人才、提高学生素质的客观要求,是教育教学改革的重要内容,也是实施质量工程的重要组成部分。以中药资源与开发专业的本科生为例,讨论以实验课时、内容、上课形式、教师教学计划以及学校经费投入和学生参与教师科研项目的热情方面来培养提高本科生的科研能力。

适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法的研究

目的建立适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法。方法以6种富含次生代谢物质的药用顽拗植物为材料,对7种DNA提取方法进行比较。结果CTAB法3对中药材具有通用性,操作简便、快速,提取的DNA浓度和合格率比其他对照方法高,能满足DNA条形码PCR扩增的要求。该方法主要特点:(1)用3%的CTAB浓度代替常用的2%CTAB;(2)采用1%的PVP与0.2%β-巯基乙醇共同去除杂质和防止DNA降解;(3)采用10000r/min离心15min去除蛋白质等杂质。结论CTAB法3是适合中药材DNA条形码研究的DNA提取方法。

广东省广藿香种植业发展策略

为了给广藿香种植业的政策制定和科研方向提供参考,通过调查分析广东省内阳江市、茂名市、湛江市、肇庆市4个产区内广藿香的生产现状,指出产区内广藿香种植业存在种质来源混杂、病虫害严重、栽培管理粗放、销售价格不稳定、政府支持力度不足等导致生产逐渐萎缩的问题,结合现代南药发展趋势,提出发展广藿香种植业的策略。最后指出建立大型广藿香栽培基地、明确市场容量以引导生产、突破连作障碍技术等,是广藿香种植业良性发展的关键。

阳春砂3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因的克隆及分析

目的克隆阳春砂萜类生物合成途径上游关键酶——3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)(EC:1.1.1.34)的编码基因;分析基因的功能及其在阳春砂不同组织中的表达。方法用基于RT-PCR的方法从阳春砂叶片中获得编码HMGR的cDNA全长序列,克隆基因编码区;用生物信息学的方法对其编码蛋白进行相似性检索和功能分析;用半定量RT-PCR法比较基因在阳春砂不同组织中的表达差异。结果获得了全长2 023 bp的编码阳春砂HMGR的cDNA序列,命名为AvHMGR(GenBank登记号:FJ455511)。AvHMGR编码的蛋白与其他植物来源的HMGR有很高相似性,含有NADPH结合基序和底物HMG-CoA结合基序,N-端有两个跨膜结构域。保守功能结构域的分析结果表明AvHMGR属于3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶家族。AvHMGR在包括茎、根、果皮和种子团的广泛组织中表达,且在这些组织中的表达量均高于在叶片中的表达。结论从阳春砂中克隆了AvHMGR基因,为进一步鉴定基因功能、探明阳春砂萜类生物合成的基因调控机制打下基础。

穿心莲种子发芽试验标准化研究

通过发芽试验来探讨温度、光照及发芽床等因素对穿心莲（Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees）种子萌发的影响。设25.0、27.5、30.0、32.5、35.0℃共5种恒温温度处理,设纸上（TP）和砂上（TS）2种发芽床处理,光照设0（全黑暗）和500 lx 2个处理。试验结果表明：穿心莲种子发芽最适温度为25~30℃,发芽床可选择纸上（TP）法,对光照敏感,初次计数时间为发芽后第2天,末次计数时间为发芽后第7天。幼苗生长发育类型为子叶出土的双子叶农作物种子,幼苗鉴定只考虑初生根的发育状况。

道地产区不同栽培品种阳春砂果实与花形态特征调查与分析

【目的】开展阳春砂高产优质新品种的认定,根据花与果实的形态方面特征为阳春砂的品种认定提供依据。【方法】对阳春砂道地产区(广东省阳春市)的阳春砂品种进行调查,对2个主要栽培品种"长果"、"圆果"和选育中品种"春选"的果实形态性状、花形态性状进行测量和统计。【结果】筛选出不同栽培品种间具有显著性差异的性状。【结论】道地产区阳春砂不同栽培品种在果实和花的形态上具有各自可区别的显著特征。

基于26S rDNA D1-D3区和mat K基因序列分析的阳春砂分子鉴别

【目的】建立阳春砂不同栽培品种的DNA分子鉴别方法,为阳春砂的优良品种选育提供依据。【方法】以阳春砂栽培种长果、圆果、"春选"及海南砂为材料,用相应引物对26S rDNA D1-D3区和matK基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增和测序,对测序结果进行分析,寻找差异位点,并根据序列构建系统发生树。【结果】测序得到的26S rDNA D1-D3序列为739 bp,阳春砂与海南砂在该区域存在4个碱基位点的差异。长果阳春砂与圆果阳春砂序列相同,但它们与"春选"阳春砂存在1个碱基位点的差异,根据26S rDNAD1-D3序列建立的系统发生树揭示了"春选"阳春砂与另外2个栽培品种间的区别。测序得到的matK序列为824 bp,阳春砂3个栽培品种的matK序列相同,与海南砂存在1个碱基位点差异。【结论】从分子水平上可鉴别阳春砂的3个栽培品种,"春选"品种比长果(或圆果)品种与海南砂有着更近的亲缘关系。

穿心莲种子质量分级标准研究

[目的]制定穿心莲(Andrographis paniculata)种子质量分级标准。[方法]测定不同来源的穿心莲种子净度、千粒重、水分和发芽率等指标,使用SPSS软件,对千粒重、发芽率数据进行K-均值聚类分析,制定分级标准。[结果]以发芽率为主,综合水分、千粒重及净度4个指标初步制定了穿心莲种子质量分级标准,把穿心莲种子质量等级分为3个等级。[结论]该研究制定的质量分级标准具有生产实用性,可作为穿心莲种子的质量控制标准。

不同栽培品种阳春砂的化学成分比较

【目的】比较阳春砂的3个栽培品种长果、圆果及春选果实化学成分的差异。【方法】分别采用气相色谱法、水蒸气蒸馏法、甲苯法对3个不同品种10个批次的阳春砂中乙酸龙脑酯、挥发油、水分的含量进行测定。【结果】阳春砂3个栽培品种长果、圆果、春选中挥发油含量差异无显著性意义(P>0.05),但春选品种乙酸龙脑酯含量较长果、圆果显著偏低(P<0.05)。3个品种水分含量均小于150 mL/kg,符合药典要求。【结论】不同栽培品种阳春砂的化学成分含量有所不同。

海南砂生殖生物学特性研究

为了提高海南砂的产量,研究了其小花数目、花粉活力、柱头可授性、落果率等生殖生物学特性以及海南砂花粉在不同贮藏条件下的活力。结果表明,海南砂每个花序有7.28(±0.83)朵小花;小花的花期为1.5 d;离体萌发法测定花粉活力在花朵刚刚开放时达83.6%,开花12 h后降为21.0%,24 h后降为11.4%;柱头和花粉在花朵开放6 h内都具极强可授性,寿命维持24 h,比花粉寿命长12 h以上;人工授粉率和自然授粉率分别为64.10(±29.80)%和17.55(±15.49)%、落果率为20.65(±31.39)%和11.11(±32.34)%。高湿度条件下贮藏花粉12 h后活力降为0.6%,而在低温高湿条件下贮藏花粉12 h的活力为23.4%,表明低温更有利于海南砂花粉贮藏。

药用植物栀子优良种质的初步筛选

采用形态学和RAPD标记技术对来自樟树栀子种植基地的14个表型各异的栀子样品进行种质分类,采用主成分分析法比较栀子果实的产量及有效成分含量,依据综合得分筛选优良种质。形态学研究表明,栀子表型存在广泛的变异;RAPD分析结果显示,该基地栀子的遗传多样性较为丰富,聚类分析可将14份栀子样品分为4大类,且与形态学聚类结果较为吻合;结合分子鉴定和形态聚类分析可将14份样品分为6大类;产量和有效成分含量测定结果表明,1、8、13、14号栀子综合表现较好。本研究初步筛选出4个优良种质,为种植基地栀子的品种选育提供参考。

海南砂种子贮藏条件的研究

为了探索海南砂种子的最佳贮藏条件,分别研究了沙磨、赤霉素(GA3)处理、贮藏条件、贮藏时间对海南砂种子萌发率的影响。以当年采收的海南砂种子为试验材料,对其进行沙磨、GA3处理,并将种子分别在不同条件下贮藏,进行种子萌发试验,统计萌发率。研究结果表明:沙磨处理并不能显著提高海南砂种子的萌发率,但可促进GA3进入种子内部并发挥作用;GA3对海南砂种子萌发具有浓度效应,且80μmol/L GA3处理8 h效果较好,浓度过高则表现出抑制作用;阴室贮藏是海南砂种子的最佳贮藏方式,有利于种子后熟,最高萌发率可高至(97.78±3.84)%,最佳贮藏时间为8个月。该试验获得了海南砂种子的最佳贮藏条件,为推广海南砂播种育苗技术奠定了坚实的基础。

阳春砂1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因的克隆及表达分析

【目的】克隆阳春砂萜类生物合成途径的上游关键酶——1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reducto iso merase,DXR)(EC:1.1.1.267)的编码基因;分析基因的功能及其在阳春砂不同组织中的表达。【方法】通过基于逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)的方法从阳春砂叶片中获得编码DXR的cDNA全长序列,克隆基因编码区;用生物信息学的方法对其编码蛋白进行相似性检索和功能分析;用半定量RT-PCR法比较基因在阳春砂不同组织中的表达差异。【结果】获得了全长1749bp的编码阳春砂DXR的cDNA序列,命名为AvDXR1(GenBank登记号:FJ459894)。AvDXR1编码的蛋白与其他植物来源的DXR有很高相似性,含有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)结合基序和DXR活性位点基序,N-端有叶绿体靶向转运肽。保守功能结构域的分析结果表明AvDXR1属于1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸还原酶家族。AvDXR1在包括茎、根、果皮和种子团的广泛组织中表达,且在这些组织中的表达量均高于在叶片中的表达。【结论】AvDXR1基因是阳春砂DXR的编码基因,该基因在阳春砂的叶、茎、根、果皮和种子团中广泛表达。

药用植物阳春砂花器形态特征

通过解剖阳春砂(Amomum villosum)小花,以体视镜观察并测量长果、圆果和仲华3个阳春砂栽培类型小花的形态指标。结果表明,仲华的假合蕊柱与唇瓣间的纵向距离最小,但3个栽培类型之间的横向距离差异不显著。假合蕊柱与唇瓣的距离大小主要由假合蕊柱的挺直程度决定,角度γ值是栽培类型的特征参数。仲华的花粉囊最长,长果次之,圆果最小;而3个栽培类型间的花粉囊宽度差异不显著;花粉囊长度的差异是栽培类型的另一个特征。仲华柱头的开口面积与长果和圆果差异不显著;但长果柱头的开口面积比圆果大。3个栽培类型柱头的开口均高于花粉囊顶端;圆果柱头的开口与花粉囊顶端的距离(Dsp)显著大于长果和仲华,而长果与仲华的Dsp差异不显著。该研究建立了阳春砂花器形态的研究方法,比较了3个栽培类型小花的形态特征,为寻找适宜的传粉途径和提高产量奠定了基础。

两面针及其4种常见混淆品的药理作用研究进展

目的:为发掘两面针资源及其代用品提供参考。方法:查阅近年来国内、外相关文献,对两面针及其4种常见混淆品飞龙掌血、竹叶椒、刺异叶花椒和花椒的药理作用进行归纳总结。结果:4种混淆品的药理作用均与两面针有相同点,但亦有显著差异。结论:两面针、飞龙掌血、竹叶椒、刺异叶花椒和花椒有各自独特的药理药效,可进行深入、系统的研究,以为开发新药资源、扩大用药品种提供依据。