槐角配方颗粒质量标准研究

目的:健全槐角配方颗粒质量标准评价体系,促进产品质量稳定可行。方法:采用薄层色谱法对槐角配方颗粒进行定性鉴别;采用HPLC建立槐角配方颗粒特征图谱方法,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)软件对特征图谱进行分析,并通过对比共有峰的保留时间对色谱峰进行指认。结果:槐角配方颗粒薄层色谱斑点清晰,分离度好;槐角配方颗粒特征图谱分析方法有较好的重复性,共检出12个共有峰,并指认槐角苷、芦丁2个化学成分。结论:建立的薄层色谱和特征图谱方法具有专属性强、承载信息量大、操作简便等优点,可用于槐角配方颗粒质量标准研究。

基于HPLC指纹图谱的紫苏子及其炮制品的质量研究

目的:建立紫苏子和炒紫苏子的HPLC指纹图谱,为紫苏子和炒紫苏子提供一种准确直观的定性鉴别方法。方法:采用Kromasil 100-5-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为284 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为30℃,建立紫苏子和炒紫苏子的HPLC指纹图谱;运用相似度评价、聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)对紫苏子炮制前后化学成分变化进行研究。结果:在紫苏子和炒紫苏子的HPLC指纹图谱研究中,紫苏子有10个共有峰,炒紫苏子有12个共有峰,各批次样品相似度均在0.950以上;通过对比共有峰的保留时间和色谱图,指认出部分成分;并发现峰1和峰2为炒紫苏子的特有峰,可用于区别紫苏子和炒紫苏子。聚类分析和主成分分析结果表明紫苏子生品和炮制品之间具有明显差异性。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法简单,分离效果较好,实现了对紫苏子和炒紫苏子的定性鉴别,为深入阐明紫苏子炮制前后药性和药效的差异性提供一定的依据。

虎杖标准汤剂质量标准研究

目的:制备20批来自不同产地的虎杖标准汤剂,测定其出膏率,并对虎杖苷和大黄素进行含量测定,计算其转移率,建立HPLC指纹图谱分析方法,并进行质量标准研究。方法:以Agilent ZORBAX Extend-C18为色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸溶液(80∶20)为流动相;检测波长为254nm,测定饮片的大黄素含量;以乙腈-水(23∶77)为流动相;检测波长为306nm,测定饮片的虎杖苷含量;并采用HPLC指纹图谱技术,建立其HPLC指纹图谱,同时利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)软件对20批虎杖标准汤剂指纹图谱进行分析。结果:通过对20批虎杖标准汤剂进行测定,虎杖苷和大黄素转移率范围分别为19.2%~42.7%和1.8%~3.2%,出膏率范围为14.9%~19.0%;通过指纹图谱分析,确定了10个共有峰,并对20批虎杖标准汤剂分别进行了相似度评价,其相似度均大于0.95。通过对比共有峰的保留时间,指认出3种成分,分别为虎杖苷(峰2)、白藜芦醇(峰4)、大黄素(峰10)。结论:本研究中虎杖标准汤剂的制备方法规范,20批样品的指纹图谱相似度高,其方法精密度、稳定性和重复性良好,可为虎杖配方颗粒的质量控制提供参考。

不同产地白及野生品与栽培品质量比较研究

目的:对不同产地的野生和栽培白及的质量进行比较研究。方法:采用中国药典中相关方法进行薄层鉴别,并测定水分、总灰分的含量;采用紫外分光光度法测定野生和栽培白及中多糖的含量;用醇溶性浸出物测定法测定白及的浸出物含量,用高效液相法测定白及特征成分——1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine)的含量。采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定白及中铅(Pb)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)5种元素的含量。结果:野生白及和栽培白及在性状上有一定差异,水分、灰分均符合药典标准。浸出物和多糖含量野生品小于栽培品,特别是多糖含量,二者差异明显。militarine含量均值野生品大于栽培品。对5种微量元素进行独立样本t检验,发现铅、砷、镉、汞、铜5种元素中,只有铜元素在野生组和栽培组中的含量有显著性差异,其他4种元素的含量没有统计学差异。在白及块茎中,5种微量元素含量排名:Cu>Pb>As>Cd>Hg,说明白及块茎对铜的富集能力最强,对汞的富集能力最弱;野生白及中Cu的含量远小于栽培品,其余4种元素含量都大于栽培品。结论:白及野生品和栽培品在性状上有一定差异。在多糖含量方面,栽培品与野生品相近,可以替代野生品。另外,白及栽培过程中应注重栽培条件,严格控制Cu元素的含量。课题通过对野生和栽培白及的比较研究,为合理保护野生白及资源,推广白及栽培技术,开展白及的野生资源保护提供了重要参考依据。

基于偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)的补骨脂炮制前、后组成二神丸提取物的指纹图谱研究和指标成分的定量分析

目的:通过对已建立的二神丸提取物指纹图谱进行化学计量学分析,并结合含量测定,为补骨脂炮制前、后组成二神丸提取物的鉴别和有效质量控制提供参考。方法:运用偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)对已建立的二神丸提取物指纹图谱建立PLS-DA模型,并利用高效液相色谱(HPLC)对指标成分进行定性鉴定和定量测定。结果:建立的PLS-DA模型可靠,预测能力良好。统计结果显示补骨脂炮制前、后分别组成二神丸的石油醚提取物可明显区分,并揭示了对此区分贡献最大的16个潜在标志性色谱峰,结合标准物质定性鉴定了6个色谱峰,其中4个为贡献最大的潜在标志性指标成分。同时测定了该6个指标成分在10批炮制前和10批炮制后提取物的含量,其中补骨脂素、异补骨脂素、甲基丁香酚和甲基异丁香酚炮制后含量升高,去氢二异丁香酚和补骨脂酚炮制后含量降低。结论:该方法从定性和定量两方面控制炮制前、后二神丸提取物的内在质量,更全面地反映了二神丸提取物的化学成分信息及炮制前后的差异性,为提取物质量评价和控制提供了一个有效的参考。

生物酶解法提取干姜精油的工艺及其生物活性评价

采用生物酶解法提取干姜精油,考察其感官特征、理化性质、化学成分及生物活性,为干姜精油的进一步开发提供研究基础.运用Box-Behnken优化生物酶解法提取干姜精油的工艺,并与传统水蒸气蒸馏法比较精油得率、感官特征、理化性质与化学成分差异;同时选用化妆品原料功效评价经典方法,研究2种方法提取所得干姜精油对DPPH和ABTS自由基清除能力及酪氨酸酶活性抑制能力,揭示二者体外抗氧化和美白活性.结果表明,生物酶解法提取的干姜精油得率为0.74%,与传统水蒸气蒸馏法相比,蒸馏时间缩短,精油得率提高了57.45%;生物酶解法提取对干姜精油的品质有一定提升,成分分析结果表明,生物酶解法提取干姜精油使其化合物种类和含量发生变化,主要有效成分α-姜烯的含量增加了4.48%;2种方法提取的干姜精油均有DPPH和ABTS自由基清除能力和酪氨酸酶活性抑制能力.通过响应面分析法优化后的生物酶解法提取干姜精油工艺稳定可行、可控,干姜精油得率高、品质好,具有良好的抗氧化和酪氨酸酶活性抑制作用,为化妆品开发提供了一种兼具抗氧化和美白作用的天然原料.

4种不同基源郁金药效学比较研究

目的:比较4种不同基源郁金的药效学。方法:采用小鼠热板法、醋酸致扭体法以及对小鼠全血血液流变学的影响对比4种不同基源郁金的药效学差异。结果:4种不同基源的郁金均能提高小鼠热板法和醋酸致扭体法痛阈值,降低小鼠血液黏度、红细胞聚集指数以及卡森黏度等血液流变学指标,且以黄丝郁金效果较好。结论:4种不同基源的郁金在药效学方面存在一定差异。

基于化学模式识别的黄丝郁金醋炙前后HPLC指纹图谱研究

目的:建立黄丝郁金、醋黄丝郁金HPLC指纹图谱,并结合化学计量学探讨黄丝郁金醋炙前后化学成分的差异及潜在质量差异标志物。方法:收集15批四川产黄丝郁金药材并制备醋炙品,建立指纹图谱,进行相似度评价,采用SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析。结果:建立了黄丝郁金、醋黄丝郁金指纹图谱,均确定了20个共有峰,并指认出2号峰为Bisacurone、3号峰为Bisacurone B、6号峰为双去甲氧基姜黄素、7号峰为去甲氧基姜黄素、8号峰为姜黄素、9号峰为莪术二酮、14号峰为芳姜黄酮、15号峰为吉马酮。相似度均≥0.939。聚类分析和主成分分析可基本上区分黄丝郁金、醋黄丝郁金,正交偏最小二乘判别分析共筛选出黄丝郁金醋炙前后7个质量差异标志物。结论:该研究建立的黄丝郁金、醋黄丝郁金HPLC指纹图谱结合化学计量学方法可用于探索黄丝郁金醋炙前后潜在质量标志物。

基于网络药理学的七首复方治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究

利用网络药理学和生物信息学技术分析《溃疡性结肠炎中医诊疗专家共识意见》(2017)七首中医经典复方治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制,以筛选治疗UC的潜在共有的重要成分、靶点及通路,同时分析每首复方独有的重要成分、靶点及通路,并对重要证型脾肾阳虚型UC的重要靶点进行实验验证。通过网络药理学方法,筛选出7首中医经典复方的4个共有重要成分、42个共有重要靶点、30个独有重要成分、14个独有重要靶点;KEGG通路分析显示,共有重要靶点主要涉及炎症与疾病相关通路;每首复方独有通路主要涉及HIF-1、T细胞受体等炎症相关通路以及阿尔茨海默病等疾病相关通路;采用AutoDock vina对重要成分和重要靶点进行分子对接验证;采用“饮食失节+劳倦过度+番泻叶灌胃+葡聚糖硫酸钠”建立病证结合的大鼠脾肾阳虚型UC模型,灌胃给予附子理中丸混悬液(1.2 g/kg)21 d后,采用ELISA验证其重要靶点。结果表明,附子理中丸能显著降低脾肾阳虚型UC模型大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平(P<0.001)。本研究初步提示了七首经典复方治疗UC的潜在共性作用机制为消除炎症、调节免疫、调节细胞凋亡及抗癌等作用;附子理中丸可以调控TNF、IL-6等重要靶点,发挥治疗脾肾阳虚型UC的作用,其机制可能与调控T细胞受体等炎症通路相关;β-谷甾醇、豆甾醇、白桦脂酸、山柰酚等参与不同UC中医证型的治疗,为治疗不同UC中医证型的潜在药物发现及临床精准治疗提供参考,也为UC辨证分型的潜在特异性评价指标提供新思路。

基于化学计量学研究黄丝郁金及醋制品化学成分差异

目的:比较黄丝郁金生品、不同醋制品(醋蒸、醋煮、醋炒)中的挥发性成分及姜黄素类成分。方法:样品经水蒸气蒸馏法提取,利用GC-MS技术分析3批生品及其不同醋制品中挥发性成分,采用多元统计分析方法找出主要差异性成分,并以3个主要姜黄素类成分为评价指标,分析不同醋制方法之间的差异。结果:3批生品、醋蒸品、醋煮品、醋炒品中分别鉴定出化合物23、31、29、28个,共有成分12个。此外,醋制能增加姜黄素的溶出度。结论:对黄丝郁金及其不同醋制品姜黄素类成分及挥发性成分进行对比研究,有助于促进各地醋制工艺统一,为筛选出最佳醋制工艺提供理论依据;对促进不同醋制品的临床应用也具有积极指导意义。

正交试验结合 CCD 响应面法优化绿丝郁金酒炙工艺研究

目的优化绿丝郁金酒炙工艺。方法以HPLC法测定酒郁金中吉马酮和莪术呋喃二烯酮的含量作为评价指标,采用正交试验结合CCD响应面法,对影响绿丝郁金酒炙工艺的3个因素进行筛选和优化。结果绿丝郁金最佳酒炙工艺为:每100 g绿丝郁金饮片,加入10 mL黄酒与6.5 mL水的混合液,拌匀闷润,118℃炒制5 min即得。验证实验结果表明该工艺条件重复性良好,具有合理性和可行性。结论采用正交实验和CCD响应面法优选的绿丝郁金酒炙工艺稳定可行,可用于其炮制工艺的优化。

通心颗粒治疗冠心病心绞痛(气虚血瘀证)临床观察

目的:基于传统中医药理论,针对冠心病心绞痛本虚标实的病机特点,拟通过规范化的随机对照临床试验,揭示通心颗粒对冠心病心绞痛的治疗作用,将其疗效客观化,为临床治疗冠心病心绞痛提供疗效确切、稳定可靠的治疗药物。方法:对符合纳入标准的研究对象随机分为治疗组、对照组,每组样本含量45例,共90例进行对照分析,对照组常规西医治疗,治疗组在其基础上添加通心颗粒治疗,采用随机对照的方法,观察研究对象2个月,比较两组患者治疗前后的心绞痛严重程度和心功能分级、使用硝酸甘油停减率、心电图和中医症状等方面变化,并进行疗效分析和监测临床不良反应。结果:两组冠心病心绞痛患者治疗后的心绞痛症状对比,治疗组的有效率为82.2%高于对照组的55.6%(P<0.05),具有统计学意义;两组冠心病心绞痛患者治疗后的心功能分级对比,两组心功能改善比较差异无统计学意义(P>0.05);两组冠心病心绞痛患者治疗后的硝酸甘油停减率对比,治疗组的停减率为60.0%,对照组停减率为35.6%,两组比较有显著差异P<0.05;两组患者在中医主症的疗效上比较,治疗组患者治疗前后中医主症疗效有显著差异(P<0.05),对照组患者治疗前后中医主症疗效差异无统计学意义(P>0.05),组间比较,两组比较有显著差异P<0.05;两组患者在中医次症的疗效上比较,两组患者治疗后中医次症与用药前组内及组间对比差异无统计学意义(P>0.05);两组冠心病心绞痛患者治疗后的中医症状总体疗效对比,治疗组中医症状有效率为84.4%高于对照组的48.9%,两组比较有显著差异P<0.05;两组冠心病心绞痛患者治疗后的心电图对比,治疗组心电图有效率为71.1%与对照组的66.6%比较无显著差异(P>0.05);两组治疗前后的各项生命体征未见明显异常(如血尿常规,肝肾功能等),无毒副作用,安全性和耐受性较好。结论:通心颗粒可以有效改善冠心病心绞痛(气虚血瘀证)患者的心绞痛发作的严重程度;联合西医常规治疗能缩短心绞痛发作时间和减少硝酸甘油的用量;具有较好的安全性。

PB试验结合BBD响应面法优化绿丝郁金醋炙工艺研究

目的:优化绿丝郁金的醋炙工艺。方法:以HPLC法测定醋郁金中吉马酮和莪术呋喃二烯酮的含量作为评价指标,在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验法,对影响绿丝郁金醋炙工艺的4个因素进行筛选。根据Plackett-Burman试验结果,选取稀释加水量(A)、闷润时间(B)和炒制时间(D)为考察因素,运用Box-Behnken响应面法对绿丝郁金醋炙工艺进行优化。结果:绿丝郁金最佳醋炙工艺为:每100g绿丝郁金饮片,加入10mL米醋与10mL水的混合液,拌匀闷润16min,140℃炒制11min。验证实验结果表明该工艺条件重复性良好,具有合理性和可行性。结论:采用Plackett-Burman法和Box-Behnken响应面法优选的绿丝郁金醋炙工艺稳定可行,可用于其炮制工艺的优化。

当归补血膏制备工艺研究

目的:优化当归补血膏的最佳提取工艺、浓缩工艺和制剂处方工艺。方法:根据当归补血膏的处方特点,以处方中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷的溶出量及出膏率为主要评价指标,采用正交试验法、单因素考察法对处方的提取工艺和浓缩工艺进行考察和验证。制剂处方研究方面,以无糖型处方为出发点,采用外观和口感评测的方式,对制剂处方的辅料种类和加入量进行考察。结果:最佳提取工艺为:加水12倍,提取时间1h,提取次数2次。最佳的浓缩工艺为:温度60~80℃,压力-0.07MPa~-0.09 MPa。制剂工艺处方及比例以清膏∶木糖醇∶β-环糊精(100∶30∶2)为最佳。结论:该研究为当归补血膏处方的推广和应用提供了方向。膏方制剂工艺在延用传统工艺的基础上,采用无糖型处方及低比例的辅料,研究为膏方的传承和创新提供了新思路。

郁金炮制沿革及质量评价方法研究现状

郁金不仅是中医临床常用大宗药材,也是常用的天然染料,是历版《中国药典》的收载品种,具有活血止痛、行气解郁、清心凉血、利胆退黄之功。现代常用的郁金炮制方法有切制、炒制、醋制和酒制等。饮片作为中医临床治病的基础,其炮制品的正确选用和质量好坏直接关系到临床用药的安全性和有效性。通过梳理郁金炮制沿革,对现有关于郁金的炮制进行修正,同时对郁金饮片质量评价方法进行综述,为郁金饮片炮制工艺和质量控制标准化研究提供参考借鉴。

多指标层次分析法结合D-最优设计响应面法优化黄丝郁金酒炙工艺

目的:优选酒炙黄丝郁金的炮制工艺。方法:HPLC法同时测定姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的含量。以层次分析法(AHP)结合D-最优设计响应面法考察加酒量、炒制时间、炒制温度对酒炙郁金炮制工艺的影响。结果:黄丝郁金最优酒炙工艺为每100g黄丝郁金加10mL黄酒,待酒吸尽后于112℃炒制15min。结论:酒炙黄丝郁金的炮制工艺稳定可行,为郁金酒炙工艺提供了依据。

野生与栽培白及HPLC指纹图谱建立及天麻素与militarine含量测定

目的:采用HPLC法建立野生和栽培白及的指纹图谱,同时建立白及中天麻素、militarine的含量测定方法,比较野生和栽培白及中天麻素和militarine的含量。方法:色谱柱为ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm);以流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,检测波长为220 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样体积10μL。结果:野生白及指纹图谱共检测出18个共有峰,栽培白及指纹图谱共检测出16个共有峰,二者峰形整体一致。野生白及中天麻素与militarine平均含量较栽培白及高。结论:该研究建立的白及HPLC指纹图谱和2种指标成分定量测定分析方法简便、准确、重现性好,可用于白及药材的质量控制。

Box-Behnken响应面法结合人工神经网络优选蜜炙川芎炮制工艺

目的:优选蜜炙川芎炮制工艺,恢复川芎传统炮制品种。方法:在单因素实验设计基础上,以蜜炙川芎阿魏酸、藁本内酯含量为评价指标,采用Box-Behnken响应面设计实验考察加蜜量、炮制温度、炮制时间、闷润时间对蜜炙工艺的影响,并通过人工神经网络模型进一步优化炮制工艺参数。结果:优选的最佳蜜炙工艺为加蜜量25%、炮制温度160℃、炮制时间15 min、闷润时间2.5 h。结论:人工神经网络模型与Box-Behnken响应面法联用优选的工艺稳定,模型预测效果较好,具备可行性。

基于CRITIC法计算权重系数的Box-Behnken效应面法优化韭菜子盐炙工艺

目的:优化韭菜子盐炙工艺。方法:以腺苷和亚油酸含量为评价指标,用CRITIC法计算权重系数,以闷润时间、炒炙温度、炒炙时间为考察因素,采用Box-Behnken效应面法优化韭菜子盐炙工艺,并进行预测分析。结果:腺苷和亚油酸的权重系数分别为0.48、0.52,最优炮制工艺闷润时间为10 h,炒炙时间为20 min,炒炙温度为120℃(锅底中心温度)。结论:Box-Behnken效应面法可优选韭菜子盐炙工艺,预测性良好。

基于“入血成分-复方功效-靶点通路”的四妙勇安汤潜在质量标志物研究

目的结合血清药物化学和网络药理学,预测四妙勇安汤的潜在质量标志物(quality marker,Q-Marker),并在此结果基础上开展动物实验加以验证。方法采用HPLC-Q-TOF/MS技术分析四妙勇安汤的入血成分,基于入血成分结合网络药理学预测主要作用靶点、通路,使用Cytoscape软件,构建“入血成分-复方功效-靶点通路”网络,依据拓扑学分析结果与四妙勇安汤主治热毒炽盛之脱疽的相关性,综合确定四妙勇安汤的潜在Q-Marker。在此基础上建立热毒炽盛之脱疽模型大鼠,造模成功后连续ig四妙勇安汤(57 g/kg)2周,实验结束后计算各组大鼠创面愈合率,检测各组血清中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平,并采用免疫组化法检测创面组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)蛋白表达。结果鉴定四妙勇安汤20个入血成分,结合网络药理学筛选出四妙勇安汤治疗热毒炽盛之脱疽的42个关键功效靶点、62条相关通路,根据化合物、靶点以及信号通路之间的度值,初步预测木犀草素、异鼠李素、甘草素等9个功效相关的潜在入血成分并结合绿原酸等主要有效成分作为四妙勇安汤潜在的Q-Marker。动物实验结果表明,给予四妙勇安汤后可明显提高热毒炽盛之脱疽大鼠的创面愈合率(P<0.05),显著回调血清中关键功效靶点(VEGF、MAPK、IFN-γ)水平(P<0.05),明显降低创面组织中TNF信号通路相关蛋白TNF-α、IL-1β的表达(P<0.05)。结论通过血清药物化学结合网络药理学挖掘预测四妙勇安汤治疗热毒炽盛之脱疽的潜在Q-Marker,为整体控制和评价四妙勇安汤质量提供科学依据。动物实验初步证实了四妙勇安汤可通过调控VEGF、MAPK和IFN-γ等关键功效靶点蛋白以及TNF信号通路相关蛋白,进而发挥治疗热毒炽盛之脱疽的作用。