B7-H3在结直肠癌中的表达特征分析和临床意义

目的探讨B7同源物3(B7-H3)在结直肠癌(CRC)组织中的表达特征及临床意义,探究其与肿瘤糖酵解过程以及与肿瘤微环境中免疫细胞浸润的相关性。方法从肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)下载CRC转录组数据和临床病理数据,分析B7-H3的表达情况和临床意义。基于TCGA数据分析CRC内糖酵解相关基因表达与B7-H3表达的相关性。使用通过估计RNA转录物相对子集的细胞类型鉴定(CIBERSORT)算法探究B7-H3表达与22种免疫细胞浸润的关系。收集51例CRC患者的手术标本及癌旁正常组织标本,应用免疫组织化学染色方法对数据库分析结果进行验证。结果B7-H3在CRC组织中的表达上调,且与肿瘤浸润深度、TNM分期晚期和不良预后密切相关。此外,B7-H3表达与CRC内糖酵解相关基因上调密切相关。免疫细胞浸润分析显示共有16种免疫细胞的浸润水平与B7-H3表达密切相关,进一步发现B7-H3表达与CD8+T细胞浸润在转录水平上呈负相关,但两者在蛋白水平上不相关。结论B7-H3在CRC组织中高表达,与CRC疾病进展和患者的不良预后密切相关。此外,B7-H3与糖酵解相关基因以及免疫细胞浸润之间的相关性,提示B7-H3在调控肿瘤糖酵解和肿瘤免疫中起到关键作用。

靶向Hippo信号通路治疗原发性肝癌的研究进展

原发性肝癌(肝癌)是临床常见恶性肿瘤,包括肝细胞癌(HCC)和肝内胆管细胞癌(ICC)。近年来,肝癌发病率呈不断上升趋势,2020年全球原发性肝癌发病率为4.7%,死亡率为8.3%,位居全球常见恶性肿瘤第5位和肿瘤致死病因第3位^([1])。因早期诊断难,且具有高转移、高复发等特点,大多数患者确诊时已处于中晚期,导致肝癌预后差,5年生存率低于15%^([2])。

CAR-T细胞免疫疗法临床研究伦理问题探析

探讨与分析CAR-T细胞免疫疗法临床研究的现状与存在的伦理问题,结合本中心伦理审查的实践,为推进CART细胞产品及细胞治疗临床研究在国内健康开展、规范我国细胞免疫治疗研究的伦理标准、保障受试者安全与权益提供参考。方法国内CAR-T细胞免疫疗法临床研究发展迅猛,但存在很多未知风险,结合CAR-T细胞免疫疗法国内外研究概况、细胞免疫疗法临床研究存在的伦理问题、本中心伦理委员会在CAR-T细胞免疫临床研究审查中的实践经验进行分析与论述。CAR-T细胞免疫疗法仍属于新兴技术,在目前开展的临床研究中,其技术标准、临床疗效与潜在风险尚需长期更多数据的积累,伦理审查中应了解新技术的发展,结合相关法规,完善伦理审查体系,把握伦理审查的要点,持续跟踪审查,从多角度确保受试者的安全与权益。在CAR-T细胞免疫疗法临床研究的发展中,加强伦理建设是科学研究的重要组成部分。伦理委员会应不断完善审查体系,提升认知和审查能力,科学监管、持续跟踪才能推进CAR-T产品及细胞治疗技术在国内健康发展,让这项新技术惠及更多的肿瘤患者。

BMI1分子调控肿瘤干细胞自我更新及免疫逃逸的作用机制

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)分子属于多梳家族(PcG)成员,作为重要的干细胞标志物之一,通过转录调控基因的表达维持机体的正常生理功能。研究报道,BMI1也是影响恶性肿瘤发生发展的关键分子,在肿瘤干细胞(CSCs)的自我更新、迁移侵袭、耐药及免疫逃逸中发挥重要的调控作用,参与肿瘤的复发、转移等过程。本文总结近年的研究进展,阐述BMI1的分子结构和生物学功能,分析BMI1分子对CSCs自我更新、迁移侵袭、耐药及免疫逃逸的调控作用,探讨BMI1作为新型靶点在肿瘤免疫治疗中的潜在价值。

中药调控肿瘤干细胞作用机制研究进展

肿瘤干细胞具有自我更新与多向分化的潜能,其致瘤性、耐药性及迁移侵袭能力较强,是诱导恶性肿瘤发生发展、复发转移的根本原因。机体正气亏虚,形成痰湿、癌毒、伏邪的病证,影响气血津液运行,气滞血瘀,邪实壅滞,最终形成积聚,因此,正虚邪实是恶性肿瘤发生的病因病机。根据传统中医理论,痰湿、癌毒、伏邪的致病特点与肿瘤干细胞的特性、致病机制非常相似。实验研究发现,中药对肿瘤干细胞特性有一定的抑制作用,进而控制恶性肿瘤发生发展。本文对近年来中药调控肿瘤干细胞的药理作用机制及其相关信号通路的研究现状,进行文献分析和综述,以期为中药临床治疗恶性肿瘤提供科学理论基础。

面向自动化拆蛋的卵细胞定位方法研究

卵细胞拆蛋是人工辅助生殖技术中至关重要的操作之一,但现有手动操作成功率低、丢卵现象时有发生。在自动化操作中,借助显微操作平台和智能运动平台对培养皿中的卵细胞进行反复吹打、清洗是常用的操作方法。设计了面向自动化拆蛋的卵细胞定位方法,利用培养皿内微滴的矩阵布置,通过三点定圆建立实物坐标系,并按回转路径扫描微滴,划分区域检测线,利用计算机视觉对比图像灰度值的方法检测定位卵细胞。结果表明,矩阵微滴内拆蛋和计算机视觉识别缩小了定位范围,提高了卵细胞的定位效率,成功率达到96%。

免疫分子B7-H3在类风湿性关节炎外周血单核细胞上的高表达及其临床意义

目的分析类风湿性关节炎外周血单核细胞上B7-H3分子的表达及其与疾病活动程度、炎症因子水平间的相关性。方法收集69例类风湿性关节炎患者及38例健康对照组外周血,Ficoll分离单个核细胞后流式细胞仪检测CD14、B7-H3分子的表达,ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6的表达。统计学分析其相关性及与疾病活动程度之间的关联。结果类风关患者外周血单核细胞上B7-H3表达较健康对照组高(P<0.001),且与疾病的分期、病程的长短、肿胀关节数、压痛关节数、疾病活动度评分28(DSA28)、类风湿因子有显著相关性,并与炎症因子TNF-α、IL-6呈正相关(P<0.001)。结论免疫分子B7-H3可能参与类风湿性关节炎疾病的进程并可能成为疾病预防及治疗的潜在分子。

亚甲基四氢叶酸还原酶多态性的临床应用研究进展

叶酸属于B族维生素,是体内极为重要的甲基供体,参与DNA合成和修复,维持细胞内正常甲基化和基因组稳定性。叶酸主要存在于食物中,人体无法依靠自身合成。叶酸摄入不足或代谢障碍均会引起叶酸缺乏,进而引起各种疾病。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是叶酸代谢通路中的关键酶之一,其中位于MTHFR上的rs1801131和rs1801133的多态性与肿瘤的发生和用药、心脑血管疾病的发病风险、女性优生优育以及新生儿先天性缺陷等密切相关。

正性共刺激分子sCD40L、sICOSL、sOX40L对2型糖尿病免疫炎症的调节作用及临床意义

目的正性共刺激分子可滑性外周血淋巴细胞表面诱导共刺激分子(sICOS)/sICOS配体(L)和可溶性肿瘤坏死因子受体(sOX40)/sOX40L对2型糖尿病免疫炎症的调节作用及临床意义。方法 2型糖尿病患者分为糖尿病无血管病变组60例,糖尿病伴血管病变组60例;同期来院体检的健康对照组60例。采用流式细胞仪和酶联免疫吸附实验(ELISA)免疫技术结合的方法,分析sCD40L,sICOSL,sOX40L与糖尿病血管病变的关系。结果 2型糖尿病患者的糖化血红蛋白(HbA1c)和三酰甘油(TG)明显高于健康对照组(P<0.05);糖尿病无血管病变组和伴血管病变组之间HbA1c和TG水平无统计学差异(P>0.05);三组总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平比较无统计学差异(P>0.05)。糖尿病患者sCD40L、sICOSL、sOX40L水平明显高于健对照组(P<0.05),糖尿病伴血管病变组sCD40L、sICOSL、sOX40L水平明显高于无血管病变组(P<0.05)。结论 sCD40L,sICOSL,sOX40L与2型糖尿病血管病变的发生有关。

三七治疗肾脏病的药理与临床研究进展

三七具有多种生物学活性。三七可通过对肾小管上皮细胞及肾成纤维细胞的作用延缓肾间质纤维化的进展。其药理作用还包括调节免疫、影响炎性因子表达、清除氧自由基、钙拮抗作用、影响物质代谢和改善微循环等。三七在临床上应用于慢性肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病肾病及慢性肾衰竭等各种肾脏疾病的治疗,取得了良好的疗效。对三七的药理和临床研究的进一步深入,有望为肾脏疾病的防治开辟的途径。

益气养阴解毒方联合埃克替尼治疗老年晚期EGFR突变肺腺癌的临床研究

目的观察益气养阴解毒方联合埃克替尼治疗老年晚期表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR)突变肺腺癌患者的疗效。方法选择2015年1月—2016年8月上海中医药大学附属龙华医院及上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院收治的老年晚期EGFR突变肺腺癌一线或二线治疗患者69例,采用随机、双盲、安慰剂对照的前瞻性研究方法将患者分为2组,试验组39例给予益气养阴解毒方颗粒剂联合埃克替尼治疗,对照组30例予中药安慰剂颗粒联合埃克替尼治疗,2组均治疗至疾病进展或药物不可耐受。治疗1个月后,观察比较2组的客观疗效、中医症状评分及中医症状疗效、体力状况评分、生活质量FACT-L评分;随访至2020年7月20日,比较2组无进展生存期(PFS);记录治疗过程中2组不良反应发生情况。结果治疗1个月后,试验组客观缓解率为45.9%(17/37),对照组为20.7%(6/29),试验组显著高于对照组(P<0.05)。试验组中医症状评分明显低于治疗前(P<0.05),对照组降低不明显(P>0.05);试验组中医症状总有效率为47.1%(16/34),对照组为33.3%(10/30),2组比较差异无统计学意义(P>0.05);2组治疗后体力状况评分、FACT-L各项评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。试验组中位PFS较对照组延长1.73个月,但2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组均未出现严重药物不良反应,且试验组皮疹、皮肤瘙痒及腹泻发生率均明显低于对照组(P均<0.05)。结论益气养阴解毒方可提高埃克替尼治疗老年晚期EGFR突变肺腺癌患者的疾病控制效果,并可减轻患者的不良反应。

中医药联合治疗延缓非小细胞肺癌对EGFR-TKIs耐药的临床研究近况

肺癌是常见的恶性肿瘤,2020年全球因肺癌死亡者180万例,占恶性肿瘤总死亡人数的近1/5[1]。其中85%的肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC),随着靶向治疗药物的出现,NSCLC的临床治疗已取得了实质性的突破[2]。以表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)为代表的靶向药物已取代了经典的含铂双药化疗,被推荐作为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)敏感突变晚期NSCLC的一线治疗[3-4]。尽管如此,患者在接受第一代EGFR-TKIs治疗9~13个月后,仍不可避免地产生获得性耐药,发生疾病进展[5]。

中医药对EGFR突变非小细胞肺癌靶向治疗的临床研究循证述评

肺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一,表皮生长因子受体突变的肺癌患者靶向药物治疗成为首选。近20年来,中医药在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂增效减毒方面的应用受到临床医师越来越多的关注。本文以循证医学和文献学的研究思路与方法,系统检索2010年开始,截至2020年12月27日的Pubmed、Sinomed中国生物医学文献服务系统、中国知网、维普期刊及万方数据库,选择研究方法学质量较高的临床文献,从研究设计、研究对象、治疗方法、观察指标等方面对文献进行探讨和分析,概述中医药对非小细胞肺癌靶向治疗的临床研究现状。文献研究提示中医药可有效提高EGFR-TKI治疗的临床疗效,安全性好;但目前中医临床证候分型尚未统一,中医药对于远期疗效总生存期的相关研究较少,基于效应的机制研究值得且需要进一步深入开展研究。

去甲肾上腺素对巨噬细胞极化的调节作用研究

目的:研究去甲肾上腺素(NE)在巨噬细胞极化中的功能。方法:获取并培养小鼠腿骨巨噬细胞(BMMs)。BMMs以1×10^(4)个/孔接种于96孔板,待细胞贴壁后给予0、100 ng/ml LPS或20 ng/ml IL-4,再分别给予浓度梯度的NE处理,药物处理48 h后行SRB分析。BMMs以1×10^(5)个/孔接种于12孔板,待细胞贴壁后给予100μmol/L NE处理24 h,同时按照时间梯度再分别给予100 ng/ml LPS或20 ng/ml IL-4,完成M1、M2培养后进行RNA抽提,并进行qPCR检测。流式细胞术分析巨噬细胞纯度及巨噬细胞表面标志物。结果:实验剂量的NE总体对巨噬细胞的毒性较小。NE促进巨噬细胞向M1极化,NE有助维持M2极化的巨噬细胞功能,且NE可能通过调控巨噬细胞代谢状态调控M1及M2的极化与功能。结论:高浓度NE对M1及M2存活及功能具有调节作用,提示NE在适当剂量与合适时间窗口对脓毒症患者的治疗较为关键。

二肽基肽酶4抑制剂在风湿免疫病中的潜在作用

二肽基肽酶4(DPP4)抑制剂已广泛应用于2型糖尿病的二线治疗。DPP4抑制剂通过抑制DPP4酶提高循环中的肠促胰岛素激素、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)的完整生物活性形式水平。风湿免疫病是一组主要累及骨、关节和软组织的疾病,与自身免疫系统相关,造成关节等多个器官系统的损伤。免疫系统拥有复杂而精密的调控机制,因此在风湿免疫病治疗方面更需要个体化和精准化。随着近年来DPP4在纤维化和免疫调节中的作用被发现,DPP4抑制剂与风湿性疾病间的关系也越来越受到关注。该文综述DPP4抑制剂在免疫调控及风湿性疾病中应用的最新进展,为临床治疗中DPP4抑制剂的选择提供参考。

CD39分子在子痫前期患者外周血CD4^(+)T细胞及脐静脉内皮细胞的表达及临床意义

目的:探讨CD39分子在子痫前期患者外周血CD4^(+)T细胞、Treg、Foxp3^(-)CD4^(+)T细胞及脐静脉内皮细胞的表达及临床意义。方法:采集59例正常妊娠者、23例妊娠期高血压患者及65例子痫前患者(包括28例轻度子痫前期患者和37例重度子痫前期患者)外周血,流式细胞技术检测各组妊娠妇女外周血CD4^(+)T细胞、Treg(Foxp3^(+)CD4^(+)T细胞)、Foxp3^(-)CD4^(+)T细胞比例及CD39分子表达率。随机获取胎儿分娩后的脐带(正常妊娠组18例、重度子痫前期组20例),检测脐静脉血管内壁细胞CD31^(+)CD39^(+)内皮细胞群比例。结果:正常妊娠组、妊娠期高血压组、子痫前期组3组母体外周血CD4^(+)T细胞比例[(33.71±9.80)%vs(29.59±14.22)%vs(29.63±11.11)%]及CD39表达率[2.84(0.89~5.51)vs 2.50(0.89~4.19)vs 1.39(0.79~3.51)]差异无统计学意义(P>0.05)。正常妊娠组Treg比例及CD39表达率明显高于子痫前期组[3.25(1.39~4.53)vs 1.63(1.01~2.58);33.90(22.80~59.40)vs 21.20(16.70~32.55),P<0.001];正常妊娠组Foxp3^(-)CD4^(+)T细胞比例明显低于子痫前期组[94.40(93.00~96.10)vs 95.60(94.10~97.40),P=0.016],但3组CD39表达率差异无统计学意义[1.80(0.55~4.49)vs 1.92(0.54~3.60)vs 0.92(0.49~3.24),P=0.340]。轻度子痫前期组与重度子痫前期组外周血CD4^(+)T细胞[(32.35±10.51)%vs(27.56±11.24)%]、Treg[1.80(0.93~2.58)vs 1.44(1.03~2.58)]、Foxp3^(-)CD4^(+)T细胞[95.6(94.5~97.1)vs 95.6(94.0~97.6)]比例差异无统计学意义(P>0.05);轻度子痫前期组CD4^(+)T细胞、Treg、Foxp3^(-)CD4^(+)T细胞CD39表达率均明显高于重度子痫前期组[2.08(1.20~5.05)vs 0.95(0.68~1.78);26.20(19.55~58.55)vs 17.60(13.90~23.15);2.14(0.78~3.69)vs 0.62(0.40~1.73),P<0.05]。重度子痫前期患者脐静脉血管内壁细胞CD31^(+)CD39^(+)内皮细胞群比例明显低于正常妊娠组[6.32(3.27~10.55)vs 18.95(9.90~27.48),P=0.020]。结论:母体外周血发挥免疫抑制功能的Treg数量及CD39分子表达减少可能参与子痫前期发生发展;重度子痫前期患者脐静脉血管内壁细胞CD31^(+)CD39^(+)内皮细胞群较正常妊娠者明显减少,可能与血管内皮损伤机制有关。

红素抑制血管生长的实验研究

红素抑制血管生长的实验研究高勇１王杰军１梅长林２张登海３王兵１作者单位：１．第二军医大学附属长征医院肿瘤科（上海２００００３）２．长征医院肾内科３．长征医院临床免疫研究所关键词血管内皮细胞红素雷公藤血管形成早在１９７１年，Ｆｏｌｋｍａｎ博士便首次提出...

黄芪多糖治疗溃疡性结肠炎小鼠的实验研究

目的初步研究黄芪多糖在溃疡性结肠炎(UC)治疗中的作用,探讨黄芪多糖是否通过影响MDSC发挥作用。方法通过建立DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型,研究黄芪多糖对MDSC的影响,探讨黄芪多糖(APS)在治疗UC中的效果。分析干预前后,APS对UC小鼠体内MDSC数量的影响。从病理组织学讨论黄芪多糖对UC小鼠肠黏膜修复的影响,评价黄芪多糖对溃疡性结肠炎的治疗效应。结果APS对UC模型小鼠干预后,小鼠骨髓中、脾脏中、外周血中MDSC细胞的表达均明显下降,表明APS对MDSC细胞有明显地抑制作用。结论黄芪多糖在溃疡性结肠炎的治疗中具有潜在应用价值,且可能是通过MDSC来实现的。

髓系来源抑制细胞在胃癌患者外周血和肿瘤组织中的数量及其临床意义

目的观察髓系来源抑制细胞(MDSC)在胃癌患者外周血的数量和肿瘤组织、癌旁组织的表达,探讨MDSC的数量与胃癌患者临床病理特征间的关系。方法收集62例胃癌患者外周血和其中12例患者的新鲜肿瘤组织和癌旁组织以及20份健康志愿者外周血,流式细胞仪分析HLA-DR-CD33+CD11b+MDSC的数量,采用One-way ANOVA和Mann-Whitney U检验以及t检验分析胃癌患者外周血MDSC的数量与肿瘤的浸润深度、分化程度、患者TNM分期和淋巴结转移的关系。结果和健康志愿者相比,初诊胃癌患者外周血MDSC数量增加(P<0.01);MDSC在胃癌患者外周血的数量与肿瘤的浸润深度、分化程度、患者TNM分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05);MDSC在同一病人胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织;复发/转移组患者外周血MDSC的数量明显高于无复发/转移患者(P<0.05);胃癌患者外周血HLA-DR-CD33+CD11b+MDSC高表达负性协同刺激分子T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)。结论 MDSC在胃癌患者外周血的数量与肿瘤恶性程度及复发转移密切相关。

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其临床意义

目的:分析系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其与疾病活动程度的相关性。方法:收集26例系统性红斑狼疮患者及38例健康对照组外周血,Ficoll分离单个核细胞后,TRIZOL抽提总RNA,定量PCR分析PD-L2基因的表达,流式细胞仪检测CD14、PD-L2分子的表达。统计学分析其相关性及与疾病活动程度之间的关联。结果:定量PCR结果提示系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2基因表达高于健康对照组(P<0.05),流式发现单核细胞上PD-L2高表达(P<0.05),且活动期患者表达高于稳定期,并且与疾病的评分(SLEDAI)呈正相关(P<0.05)。结论:免疫分子PD-L2可能参与系统性红斑狼疮疾病的进程并可能成为疾病预防及治疗的潜在分子。