人参总皂甙对大鼠脑缺血的保护机制的研究

目的:探讨人参总皂甙(SPG)对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制。方法:用线栓法制成大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,放射性同位素法测定脑微血管及脑组织中一氧化氮合酶(NOS)活性,用红四氮唑(TTC)染色、图像分析仪测定梗塞体积,显微镜观察病理变化。结果:局灶性脑缺血大鼠不同部位、不同时相的NOS活性不同,脑微血管中NOS活性在缺血4h(I4)组明显升高(P<0.01),脑组织(纹状体,海马)的NOS活性在I4却明显降低(P<0.01,P<0.05),同时梗塞体积扩大、病理改变明显加重。SPG使缺血4h(I4G)组脑微血管中NOS活性明显低于脑缺血4h(I4)组(P<0.01),而脑组织(纹状体、海马)NOS活性明显高于I4组(P<0.05,P<0.01),并伴随梗塞体积的减小(P<0.01)及病理变化的减轻。结论:脑微血管中NOS活性变化在局灶性脑缺血损伤中起重要作用,脑组织中NOS活性变化也参与了其病理生理过程。SPG对MCAO大鼠有明显的保护作用,其机制可能是通过降低脑微血管中NOS活性及使脑组织中的NOS活性维持在一定水平上而实现的。

应用NMDA受体拮抗剂MK-801治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的 :研究N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体拮抗剂MK 80 1对大鼠局灶性脑缺血模型的治疗作用和治疗时窗 ,为临床治疗提供依据。方法 :采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制成局灶性脑缺血模型。以 [3H]噻吩环己哌啶 ([3H]TCP)为配基 ,采用宏观和微观放射自显影术观察不同时间缺血组和给药组NMDA受体通道的活性变化。结果 :缺血前及缺血 2h内给予MK 80 1(0 .8mg/kg体重 )可有效拮抗NMDA受体的过度激活。而缺血 3h后给药则无此作用。结论 :MK 80 1对局灶性脑缺血的治疗时窗在

干细胞向胰岛素分泌细胞诱导分化的研究进展

近年来．糖尿病的发病率不断上升。而且发病更趋年轻化。文献报道：全世界的糖尿病患者已超过2亿，并且以每年200万人的速度增加。我国的糖尿病患者已经超过4000万，预计到2010年将达到6000万人。其中Ⅰ型糖尿病占5％左右。糖尿病患者虽然采用胰岛素治疗在一定程度上能够改善患者的糖代谢紊乱。然而长期的胰岛素注射不仅给患者带来不便。并且不能有效地防止或逆转糖尿病引起的微血管病变及其并发症。胰岛移植不仅能够纠正糖代谢紊乱．而且还能有效地防止或逆转糖尿病引起的微血管病变及其并发症。但是，由于胰腺供体的缺乏。极大地限制了胰岛移植的临床应用。而异种胰岛移植的排斥反应和动物源的病毒污染等问题至今没有解决。

人外周血T淋巴细胞亚群的克隆培养与分析研究

人T细胞克隆培养始于70年代末,目前国内尚未见报告。本文是简化的一步法获得成功。培养体系中,PHA 2μl/ml,2-ME 5×10^(-5)M/ml,SRBC 0.1%为最佳条件。在 T 克隆中,E-玫瑰花结形成细胞数为90.9%,OKT-4阳性率51.3%,OKT-8为44.1%,OKT-4:OKT-8之比为1.2:1。培养7例淋巴瘤细胞(T 淋巴瘤3例,B 淋巴瘤4例),均可获得克隆成功。这一克隆体系将应用于 T 细胞系的建株,评价各类病人及婴幼儿的 T细胞功能以及用于研究中药对细胞免疫功能的影响等。

一种饮料型免疫调节剂效应的实验研究

利用食用植物研制了一种富含维生素、微量元素和养料,不含人工色素、糖精、香精和药物等物质的饮料型免疫调节剂。试验表明可显著增强植物血凝素、刀豆蛋白、美州商陆等诱导的淋巴细胞转化和免疫球蛋白的产生,可望对于某些疾病的辅助治疗和康复有所裨益。

一种新的抗肿瘤实验动物模型的研究

鉴于荷瘤动物存活期较短,传统抗癌实验动物模型不能观察长期用药效应,笔者首次用荷瘤动物传代给药法建立了一种新的、可以超越荷瘤动物死亡限制、长期连续给药观察的抗肿瘤实验动物模型。实验中,黄芪一组分用传统的一代次荷瘤给药法未发现其给药作用,而用荷瘤传代给药法证实了长期作用下小鼠肝癌细胞(H_(22))对环磷酰胺敏感性增强作用的有效性,提示本实验动物模型为某些长期用药效应的实验考核以及非离体研究某些因子对癌细胞的长期影响作用提供了可能。

神经元研究的回顾和展望

神经细胞被命名为神经元(neuron)至今已有100年。神经元是神经系统的结构和功能单位。神经元通过突触与别的神经元进行接触性联系,形成神经回路。一切神经活动包括脑的复杂功能(学习、记忆等)都是通过特定的神经元及神经回路的活动而实现的。

克癌7851抗癌作用的实验研究

本文报告了由铜、铁微量元素与清热解毒、活血化瘀中草药组成的克癌7851对小鼠肝癌和肺癌抑制作用。对肝癌抑制率45.9％～73.5％,肺癌34.3％～35.9％。与对照组相比,荷瘤动物活存动态曲线明显抬高,癌细胞分裂指数下降,对照组33.4‰～39.8‰,给药组19.6‰～24.2‰,癌细胞DNA含量较少,对照组42.9～47.2 A.U.,给药组33.5～41.1 A.U.,组方图明显左移。

人参总皂甙对大鼠脑缺血时脑微血管及脑组织中一氧化氮合酶的影响及脑保护作用

目的:探讨人参总皂甙(SPG)对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制。方法:用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,用放射性同位素法测定大鼠脑微血管及脑组织中一氧化氮合酶(NOS)活性用氯化三苯四唑(TTC)染色,用图像分析仪测定脑梗死体积,显微镜下观察脑组织的病理学变化。结果:中药保护4h(I4G)组脑微血管中NOS活性〔(12.9±11.7)nmol·mg-1·min-1〕明显低于假手术(S)组〔(42.1±21.0)nmol·mg-1·min-1,P<0.01〕及脑缺血4h(I4)组〔(103.8±34.9)nmol·mg-1·min-1,P<0.001〕,脑组织NOS活性〔纹状体(47.5±11.2)nmol·mg-1·min-1,海马(65.3±8.9)nmol·mg-1·min-1〕明显高于I4组〔纹状体(36.6±7.4)nmol·mg-1·min-1,海马(49.9±9.7)nmol·mg-1·min-1,P<0.05和P<0.01〕并伴随脑梗死体积减小(P<0.01)及脑组织病理变化减轻。结论:SPG对MCAO大鼠有明显的脑保护作用,其机制可能是通过减少脑微血管中NOS活性及使脑组织中的NOS活性维持在一定水平上而实现的。

大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的再灌注时间窗

目的 :探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的再灌注时间窗 ,为临床治疗提供最佳时机。方法 :线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型。脑切片红四氮唑染色 ,图像分析仪测定梗死区体积。结果 :于脑缺血 1h、 2h、 3h、 4h、 6h、 8h、 1 6h和 2 4h (I1 、I2 、I3、I4、I6、I8、I1 6、I2 4 )观察到梗死体积的变化为I8>I6>I4>I3>I2 >I1 (P <0 0 5) ,缺血 1 6h、 2 4h与缺血 8h相比 ,梗死体积无明显差别 (P >0 0 5)。脑缺血 2h、 3h分别再灌注 2 2h、 2 1h (I2 R2 2 、I3R2 1 ) ,其梗死体积分别与缺血 2h、 3h (I2 、I3)相比无统计学差异 (P >0 0 5)。而缺血 4h再灌注 2 0h (I4R2 0 )后 ,其梗死体积较缺血 4h (I4)显著增大 (P <0 0 1 )。结论 :大鼠脑缺血后梗死体积随缺血时间的延长而逐渐增大 ,缺血 8h达到最大。线栓法制成的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的再灌注时间窗在 4h以前。

微量元素硒对HL-60细胞凋亡的诱导及bcl-2/bax基因的表达调控

目的 :研究微量元素硒诱导人类白血病细胞凋亡的作用及其相关的基因调控。方法 :体外培养人急性早幼粒白血病细胞 (HL 60 ) ,加入硒使其终浓度分别为 0、0 .1 μg/ml、1 μg/ml、2 μg/ml,作用 4 8h后收集细胞 ,分别作形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度计分析、TUNEL及bcl 2 /bax基因蛋白表达的细胞化学检测。结果 :上述多项指标的分析结果均证明元素硒能诱导癌细胞凋亡。通过流式细胞光度计检测到对照组、0 .1 μg/ml、1 μg/ml、2 μg/ml加硒组的凋亡百分率分别为 4 .4 3 %、8.3 6%、3 7.91 %、63 .4 7%。这说明浓度为0 .1 μg/ml的硒没有明显的诱导癌细胞凋亡的作用 ,而浓度为 1 μg/ml、2 μg/ml时凋亡细胞显著增多并呈剂量依赖关系。随着凋亡细胞的增多 ,bcl 2基因表达相应减弱 ,而bax基因表达相应增强。结论 :微量元素硒可诱导HL 60细胞凋亡 ,并且呈剂量依赖关系 ,凋亡的发生受bcl 2

地塞米松诱导幼龄大鼠胸腺细胞凋亡模型

目的 :建立一个比较实用且成型时间短的地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡模型。方法 :给幼龄大鼠 ( 4周～ 5周 )腹腔注射地塞米松 ( 0 0 2 g/kg) ,采用形态学 (光镜和电镜 )、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度分析等方法研究 3、 6、 9、 1 5、 2 4h等不同注射时间胸腺细胞凋亡变化。结果 :在 1 5h内 ,地塞米松诱导的大鼠胸腺细胞凋亡百分率随时间延长 ,凋亡发生率从 6 2 %逐渐增至 58 5% ;注射地塞米松 1 5h ,在光镜和电镜下均观察到胸腺细胞凋亡的典型形态变化 ;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形条带 ;流式细胞光度分析可见凋亡峰出现。结论 :幼龄大鼠腹腔注射地塞米松 ( 0 0 2 g/kg) 1 5h可成功地诱导出一个比较理想的体内胸腺细胞凋亡模型。该模型成型时间短 ,适用于凋亡调控药物及其作用机理的研究。

大鼠局灶性脑缺血时脑微血管及组织中一氧化氮合酶的变化

目的探讨大鼠局灶性脑缺血时脑微血管、脑组织中一氧化氮合酶(NOS)的活性变化及其与脑损伤的关系。方法将Wistar雄性大鼠73只随机分为假手术组19只;缺血组54只,据缺血时间1、2、3、4h再分Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅰ3、Ⅰ4组。用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型,用放射性同位素法测定脑微血管及脑组织中NOS的活性。结果局灶性脑缺血时不同部位、时间,NOS活性的变化不同。脑微血管中NOS活性在缺血4h(Ⅰ4)组为(0.104±0.035)pmol/mg蛋白,假手术组为(0.042±0.021)pmol/mg蛋白,两组比较差异有显著意义(P<0.001)。纹状体、海马的NOS活性在Ⅰ4组分别为(0.037±0.007)pmol/mg蛋白、(0.050±0.010)pmol/mg蛋白,假手术组为(0.079±0.018)pmol/mg蛋白、(0.059±0.008)pmol/mg蛋白,两组比较差异有显著意义(P<0.001,P<0.05)。结论脑微血管中NOS活性变化在局灶性脑缺血损伤中起重要作用,脑组织中NOS活性变化也参与了其病理生理过程。

人血浆儿茶酚胺及其代谢产物的高效液相色谱——电化学检测法

血浆儿茶酚胺包括去甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺,由交感神经、肾上腺體质合成与释放,是神经递质之一,调节生理功能的重要物质。因此、测定人血浆中儿茶酚胺(catechol amine,CA)含量有着十分重要的意义,可作为临床某些疾病如嗜铬细胞瘤、类癌瘤等的诊断与预测工具。国内外有关CA测定方法报道甚多,有荧光分光光度计法、放射酶法。

长生降压液对自发性高血压大鼠血压和血浆去甲肾上腺素的影响

观察长生降压液对自发性高血压大鼠的血压、血浆去甲肾上腺素(NE)、心脏重量指数和红细胞膜渗透脆性的影响。高血压大鼠分为对照组和服药组,WKY大鼠组为血压正常组。结果表明:对照组的血压继续升高(25.7kPa),与起始值(22.4 kPa)相比有显著统计学差异(p<0.05);而服药组大鼠的血压只在起始值(22.8 kPa)上下波动,心脏重量指数(4.44 mg/g)也明显低于对照组(4.68 mg/g)。此外,WKY组血浆NE水平(1.63pmol/ml)和红细胞膜渗透脆性(0.06)明显低于对照组(p<0.05)),而服药组与对照组相比仅有降低的趋向。结果提示长生降压液有阻止自发性高血压大鼠血压继续升高的作用;

克癌7851对小鼠HepA肝癌细胞DNA及细胞周期影响的流式细胞光度分析

取灌喂克癌7851(160 mg/kg)20d的荷HepA肝癌小鼠的腹水癌细胞进行细胞生物学特性的研究,把经过一系列处理和荧光染色的癌细胞在FACS 420型流式细胞光度计上进行分析。结果表明:①克癌7851可使癌细胞的DNA含量明显下降(从1511.7±1.2降至133.5±4.4 AU或从157.0±1.7降至146.0±3.0 AU);②DAN指数(DI值)和增殖指数(PI值)亦明显下降(p<0.05和p<0.01);③可使癌细胞的G1期细胞数明显增加,从43.2±4.5％增加到78.3±5.5％,而S期和G 2M期的细胞数明显减少,而且DNA组方图的多倍体峰变得低平。提示克癌7851可以抑制癌细胞的DNA合成。

中药复方“脑梗通”对脑缺血后血浆和脑组织中一氧化氮含量的影响

目的 :探讨中药复方“脑梗通”对脑缺血后血浆和脑组织一氧化氮 (NO)含量的影响 ,了解药物的脑保护作用与NO含量变化的关系。方法 :用不同剂量脑梗通分别给Wistar大鼠灌胃 ,并与用生理盐水调制的活血通脉胶囊灌胃的同类大鼠做对照 ,连续 3d后建造右侧大脑中动脉阻断 (MCAO)局灶脑缺血模型并进行实验 ,观察血浆和脑组织中不同时相NO含量的变化。结果 :大鼠MCAO后 4h血浆及不同脑区的NO含量明显降低 (P <0 0 5) ,2 4hNO含量接近于正常组 (P >0 0 5)。脑梗通组在大鼠MCAO后上述 2个时相中血浆及脑组织NO含量有显著差异 (P <0 0 5) ,MCAO后 2 4hNO含量与对照组有显著差异 (P <0 0 5) ,但与正常组无显著差异 (P >0 0 5)。阳性对照组无上述差异性变化。结论 :在局灶脑缺血不同时相的NO含量不同 ,所起作用具有不同的病理生理意义 ;脑梗通可能通过促进NO合成并调控在正常范围而起保护神经细胞的作用。

克癌7851对荷瘤小鼠造血与免疫功能的影响

本文观察了克癌7851对荷瘤小鼠骨髓造血和免疫功能的影响。结果表明,对照组每根股骨造血祖细胞数量为16856.7±3237.8,给药组为32355.7±4568.9。给药动物的胸腺及脾指数高于对照动物,对淋巴细胞转化及 IL-2产生也有不同程度的促进作用。

胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶、p53蛋白的表达与幽门螺杆菌的关系

目的:探讨胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)和p53蛋白的表达状况及其与幽门螺杆菌(Hp)根除前后的关系。方法:采用实时定量荧光RT-PCR方法检测胃粘膜中hTERT,将hTERT与GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)拷贝数之比的100倍作为标准化hTERT(NhTERT),用快速尿素酶法和Warthin-Starry银染色法检测Hp,同时用免疫组化检测p53蛋白的表达。结果:Hp阳性组hTERTmRNA和p53蛋白的表达率均显著高于Hp阴性亚组的表达率(均P<0.05)。Hp根除组hTERTmRNA的表达率显著低于未根除组(P<0.05),未根除组与阴性对照组之间无显著性差异。结论:在胃癌前病变阶段,Hp感染与端粒酶表达水平及p53蛋白之间有直接关系,提示端粒酶、Hp感染、p53蛋白在胃癌的发生、发展中起重要作用及Hp根除的必要性。