抗中性粒细胞胞质-髓过氧化物酶抗体相关性血管炎肽酰基精氨酸脱亚胺酶4表达的变化及临床意义

目的初步探讨抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎(MPO-AAV)患者中性粒细胞肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)表达的变化及临床意义。方法选择39例初诊未治的MPO-AAV患者为病例组,记录患者伯明翰血管炎活动度积分(BVAS),选择39名健康志愿者为对照组。采用流式细胞术检测2组受试者外周血中性粒细胞PAD4的表达水平,ELISA法检测外周血中性粒细胞胞外陷阱(NETs)、补体C5活化片段a(C5a)及抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体(MPO-ANCA)水平。采用t检验比较2组间PAD4、C5a及NETs水平差异,采用Spearman相关分析和多元线性回归分析病例组内各检测指标与BVAS间关系。结果病例组表达PAD4中性粒细胞比例及PAD4表达的平均荧光强度(MIF)均显著高于对照组[分别为(71±11)%与(26±6)%,t=22.456,P<0.01;(33±4)与(14±4),t=18.668,P<0.01]病例组NETs和C5a水平均高于对照组[分别为(0.62±0.22)与(0.26±0.15),t=8.466,P<0.01;(4.6±1.0)ng/ml与(2.9±1.0)ng/ml,t=7.697,P<0.01]。相关分析结果显示病例组BVAS分别与表达PAD4的中性粒细胞百分比、PAD4的MFI、NETs、C5a和MPO-ANCA呈正相关(分别为r=0.843,P<0.01;r=0.821,P<0.01;r=0.4111,P<0.01;r=0.613,P<0.01;r=0.790,P<0.01)。多元线性回归分析显示表达PAD4中性粒细胞百分比和MPO-ANCA水平分别是BVAS的独立影响因素(分别为β=0.325,t=5.889,P<0.01;β=0.796,t=4.298,P<0.01)。结论活动期MPO-AAV患者外周血中性粒细胞PDA4表达水平显著增强,且是影响MPO-AAV疾病活动度的独立因素,干预中性粒细胞PAD4的表达可能是MPO-AAV治疗的潜在新靶点。

抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎患者外周血滤泡辅助T细胞的变化及其临床意义初探

目的初步探讨抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎（MPO-AAV）患者外周血滤泡辅助T细胞（Tfh）的变化及其与病情活动性间的关系。方法纳入38例初发未治疗的MPO-AAV患者和38例健康对照者。流式细胞术检测所有受试者外周血Tfh及其诱导共刺激分子（ICOS）和程序死亡蛋白-1（PD-1）表达水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测所有受试者外周血抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体（MPO-ANCA）；评估每例患者伯明翰血管炎活动度评分（BVAS）。结果与健康对照者比，MPO-AAV者外周血CD4＋T细胞中Tfh、ICOS＋ Tfh、PD-1＋ Tfh细胞的比例显著高于健康对照者[Tfh：（25.9±3.8）%比（21.0±5.3）%，P〈0.001；ICOS＋ Tfh：（1.8±0.8）%比（0.8±0.5）%，P〈0.001；PD-1＋ Tfh：（10.2±2.8）%比（8.2±2.2）%，P=0.001]。MPO-AAV者外周血Tfh胞膜的ICOS、PD-1表达水平显著高于健康对照者（ICOS：59.6±10.0比49.2±6.9，P〈0.001；PD-1：532.6±104.2比485.1±73.4，P=0.025）。MPO-AAV者中，外周血Tfh比例分别与ICOS＋Tfh比例（r=0.407，P=0.011）、ICOS表达（r=0.705，P〈0.001）、MPO-ANCA水平（r=0.737，P〈0.001）、BVAS（r=0.648，P〈0.001）呈正相关，外周血Tfh的ICOS表达分别与ICOS＋Tfh比例（r=0.388，P=0.016）、MPO-ANCA水平（r=0.645，P〈0.001）、BVAS（r=0.653，P〈0.001）呈正相关，外周血Tfh的PD-1表达强度仅与PD-1＋Tfh比例呈正相关（r=0.473，P=0.003）。结论MPO-AAV患者外周血Tfh比例增高，活性增强，可能通过增加MPO-ANCA的产生，加重MPO-AAV病情。外周血Tfh及其表达的ICOS可能是探索MPO-AAV治疗的潜在新靶点。

髓过氧化物酶-抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎患者外周血中性粒细胞CD55、髓过氧化物酶表达及其意义

目的 初步探讨髓过氧化物酶（MPO）-抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）相关性血管炎（AAV）患者外周血中性粒细胞CD55、MPO表达及其意义。方法 选40例初诊活动期MPO-AAV患者为血管炎组，30例健康志愿者为健康对照组，采用流式细胞术检测2组受试者外周血中性粒细胞CD55和MPO表达水平，ELISA检测外周血MPO和补体B因子活化片段a（Ba）水平，评估患者伯明翰血管炎活动度评分（BVAS-V3），采用Spearman相关分析和多元线性回归分析指标间的关系。结果 （1）血管炎组患者外周血中性粒细胞膜CD55表达（4 068.6±2 306.0比2 999.5±1 504.9，P＝0.033）、血清MPO[500.0（381.0, 612.7） IU/L比286.9（225.5, 329.1） IU/L，P〈0.001]和Ba[35.2（25.2, 79.5） ng/L比18.0（15.0, 28.0） ng/L，P〈0.001]水平均高于健康对照组。血管炎组患者中性粒细胞胞内MPO表达水平低于健康对照组（1 577.1±1 175.9比3 105.3±2 323.0，P＝0.003）。（2）血管炎组患者中性粒细胞胞内MPO表达水平分别与外周血MPO水平（r＝－0.710，P〈0.05）和Ba水平（r＝－0.598，P〈0.05）呈负相关；血清MPO与Ba水平呈正相关（r＝0.691，P〈0.05）；中性粒细胞CD55表达分别与患者年龄（r＝0.514, P＝0.001）、C反应蛋白（r＝0.376，P＝0.018）、中性粒细胞计数（r＝0.485, P＝0.001）及BVAS-V3（r＝0.484, P＝0.002）呈正相关，与病程呈负相关（r＝－0.403，P＝0.01）。（3）多元线性回归分析显示，中性粒细胞CD55表达与BVAS-V3呈正相关（β＝0.001，P＝0.027）。结论 CD55在MPO-AAV患者中性粒细胞膜表达增强，且是影响病情活动的独立危险因素，其可能通过保护细胞免受激活补体旁路的破坏促进炎症反应，加重病情。CD55可能是治疗MPO-AAV未来的潜在的新靶点。