林蛙油提取物对过氧化氢诱导MC3T3-E1损伤的保护

目的研究林蛙油提取物(ranaoilextract,ROE)对过氧化氢致小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)损伤的保护作用。方法采用MTT方法检测细胞活力,筛选林蛙油提取物促MC3T3-E1细胞生长的最佳给药浓度和时间,Western blotting法检测骨形态发生蛋白-2(BMP2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、骨钙素(osteocalcin)、Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达。应用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechain reaction, RT-PCR)检测骨生长相关基因的表达。结果经过MTT法筛选, 400μg/mL、24 h为ROE的最佳给药浓度及时间,与空白对照组比较,模型对照组MC3T3-E1细胞ALP蛋白表达水平降低(P<0.05), Runx2、BMP2、Osteocalcin表达明显降低(P<0.01)。与模型对照组比较, ROE给药组中ALP、BMP2蛋白表达水平升高(P<0.05)Osteocalcin、Runx2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),与空白组比较,模型组ALP、Runx2、BMP2基因表达均下调(P<0.05),Osteocalcin显著下调(P<0.01);与模型组比较,ROE给药组ALP、Runx2基因表达均上调(P<0.05), BMP2、Osteocalcin基因表达显著下调(P<0.01)。结论 ROE可以调控骨代谢基因和蛋白的表达水平,对H2O2损伤的MC3T3-E1老年型骨质疏松模型有一定的保护作用。

哈蟆油蛋白对去势大鼠骨组织形态保护的实验研究

目的观察大鼠骨密度(BMD)、生物载荷量及股骨组织切片形态学变化,评价哈蟆油蛋白对去势大鼠骨形态的保护作用。方法利用动物骨密度仪和小动物骨骼强度测定仪测量大鼠BMD和生物载荷量;采用HE染色法观察大鼠股骨骨小梁数量变化,应用免疫组化技术观察哈蟆油蛋白对ALP和BMP2表达的调节作用。结果与模型组比较,哈蟆油蛋白明显提高了大鼠的BMD(P<0.05),显著改善了股骨的最大载荷量(P<0.01);150mg·kg^(-1)哈蟆油给药组的骨小梁的排列更加有序,结构更加完整;同时低剂量和高剂量组的ALP和BMP2呈现阳性表达。结论哈蟆油蛋白能增强骨强度、降低骨脆性骨折风险,同时能保护骨小梁结构,促进ALP和BMP2的阳性表达,故哈蟆油蛋白对骨组织形态发挥一定的保护作用,可能参与骨代谢平衡,发挥防治绝经后骨质疏松的作用。