β－磷酸甘油诱导离体成骨细胞非矿化阶段的碱性磷酸酶表达

普遍认为β－磷酸甘油（β－ＧＰ）是成骨细胞培养中诱导骨基质矿化的重要元素之一。然而它对成骨细胞的其它代谢过程的影响仍不甚清楚。本研究的目的是为了了解β－ＧＰ在成骨细胞的早期培养，即非矿化阶段是如何影响它的生长以及β－ＧＰ的这种影响在不同的传代细胞中有何不同。由于碱性磷酸酶（ＡＬＰ）是成骨细胞分化的一个特异指征，我们故选择ＡＬＰ作为研究的主要指标。实验表明，１０ｍｍｏｌβ－ＧＰ／Ｌ提高ＡＬＰｍＲＮＡ表达达２倍左右，增加１～４代成骨细胞的ＡＬＰ活性达１０％～３０％（Ｐ＜０．０１）。β－ＧＰ诱导ＡＬＰ活性增加的作用可被蛋白合成抑制剂环己酰亚胺安全抑制。３Ｈ－胸腺嘧啶核苷结合试验表明，β－ＧＰ对成骨细胞的增殖无影响。本研究结果显示，β－ＧＰ不作用于胎鼠头盖骨成骨细胞的增殖，但在细胞培养的非矿化阶段诱导ＡＬＰｍＲＮＡ表达及增加该酶的活性。

孕酮从基因水平调节骨钙素的合成

目的 观察孕激素对离体成骨细胞骨钙素基因表达及其合成的影响。方法 胎鼠头盖骨成骨细胞在含有不同浓度孕酮的培养基中培养约２０ 天。培养不同时期的骨钙素ｍ Ｒ Ｎ Ａ 含量及骨钙素的生成量通过 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交及放免的方法测定。结果 孕酮刺激骨钙素基因表达及其合成。其对ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的最大作用可达对照组的２ 倍以上。激素的作用呈时间及剂量依赖性。骨钙素ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达及其生成的增加见于培养的中、晚期阶段，提示孕激素对成熟的成骨细胞更具潜能。此外，所选用的４ 种浓度的孕酮以浓度为１０ － ６ ｍｏｌ／ Ｌ 时作用最明显。结论 孕酮从基因水平调节离体胎鼠成骨细胞骨钙素的生成，这种调节呈现时间及剂量依赖。

孕酮对离体胎鼠头盖骨成骨细胞增殖与分化的影响

目的：从细胞、基因水平探讨孕酮对成骨细胞增殖及分化的影响。方法：胎鼠头盖骨成骨细胞在体外经不同浓度（１０－９ｍｏｌ／Ｌ～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）的孕酮作用后，对其细胞增殖、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性、骨钙素ｍＲＮＡ表达、骨钙素分泌及骨小结形成进行检测分析。结果：（１）孕酮对成骨细胞增殖无明显促进作用；（２）孕酮增加细胞ＡＬＰ活性；（３）孕酮提高骨钙素ｍＲＮＡ表达及骨钙素的分泌，孕酮对骨钙素基因表达的刺激作用呈剂量依赖性；（４）孕酮增加骨小结形成的数量及面积。结论：孕酮对离体胎鼠头盖骨成骨细胞的分化具有多重促进效果，但对细胞的增殖无影响。