miR-145-3p在肝癌中的表达及其对肝癌细胞生长的调控作用

背景miR-145-3p在头颈癌、肺癌和胃癌等肿瘤可发挥抑癌的作用,而其在肝癌中的表达和作用并不清楚.目的探讨miR-145-3p在肝癌中的表达及其对肝癌细胞的增殖与凋亡的调控作用.方法用RT-qPCR法检测肝癌组织、癌旁组织、肝细胞株(Hep3B、Huh-7、HepG2和SMMC-7721)与正常肝细胞株L-02中miR-145-3p的表达水平;将miR-145-3p mimic或miR-145-3p inhibitor转入Hep3B细胞,用CCK-8法、流式细胞术、TUNEL法和Western blot法分别检测细胞活力、细胞周期、细胞凋亡和4型黏蛋白(mucin4,MUC4)表达.用荧光素酶报告基因实验鉴定miR-145-3p的靶基因.将pcDNA-MUC4转入已转染miR-145-3p mimic的细胞,用CCK-8法和TUNEL法分别检测细胞活力与细胞凋亡.结果miR-145-3p在肝癌组织和细胞中呈低表达.过表达miR-145-3p能抑制细胞增殖和G0/G1期到S期转换,促进凋亡和降低MUC4表达;而敲减miR-145-3p则作用相反.MUC4是miR-145-3p的靶基因.过表达MUC4能逆转miR-145-3p mimic对细胞存活的抑制作用.结论miR-145-3p在肝癌低表达,且其表达与T分期呈负相关.过表达miR-145-3p可抑制肝癌细胞存活与生长,而敲减miR-145-3p能促进肝癌细胞存活与生长.

五味子甲素增强奥沙利铂对结直肠癌细胞的杀伤作用

背景五味子甲素(schizandrin A,SchA)在多种肿瘤中具有抗癌和逆转多药耐药性的作用,但其对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)在结直肠癌细胞的作用并不清楚.目的探讨SchA是否能增强L-OHP对结直肠癌细胞的杀伤作用,并分析其机制.方法将结直肠癌细胞分为对照组、SchA处理组、L-OHP处理组和SchA+L-OHP联合处理组.用噻唑蓝(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法检测细胞活力;流式细胞术法检测细胞凋亡;活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)探针检测细胞ROS含量;5,5’,6,6’-四氯-1,1’,3,3’-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物(1,1’,3,3’-tetraethyl-5,5’,6,6’-tetrachloroimidacarbocyanineiodide,JC-1)探针评估线粒体膜电位变化;Western blot检测B-细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associatedXprotein,Bax)、细胞色素c(cytochrome c,Cytc)和劈开的半胱氨酸蛋白酶-3(cleavedcysteine proteinase-3,cleaved caspase-3)的表达.结果与L-OHP处理组比较,SchA+L-OHP联合处理组的结直肠癌细胞的细胞活力明显降低,细胞凋亡明显增加.SchA能增强L-OHP导致的结直肠癌细胞内ROS蓄积、Bax和cleaved caspase-3表达、线粒体Cyt c释放,并降低Bcl-2表达.结论SchA增强L-OHP对结直肠癌细胞的杀伤作用,其机制可能与增强细胞内ROS蓄积以及促凋亡相关蛋白表达相关.