罗哌卡因减轻LPS诱导的人结肠上皮细胞系NCM-460凋亡

目的探究罗哌卡因对脂多糖(LPS)诱导的人结肠上皮细胞系NCM-460凋亡和对核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体活性的影响。方法体外培养人结肠上皮细胞系NCM-460,将细胞分组:对照组(control,不干预)、模型组(model,10μg/mL的LPS处理)、低/中/高浓度组(0.5、1、1.5 mmol/L罗哌卡因干预模型组)。然后将细胞分为对照组、模型组、罗哌卡因组(1.5 mmol/L罗哌卡因干预模型组)、罗哌卡因+抑制剂组(1μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082干预罗哌卡因组)、抑制剂组(1μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082干预罗哌卡因组)和罗哌卡因+激活剂组(1μmol/L NF-κB通路激活剂Prostratin干预罗哌卡因组),干预24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;EdU掺入法检测增殖率、Hoechst 33258染色法检测凋亡率;Western blot检测周期蛋白D1(cyclinD1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、NLRP3和NF-κB通路相关蛋白水平。结果与对照组相比,模型组细胞活力降低,高浓度罗哌卡因组活力升高(P<0.05)。与对照组相比,模型组细胞炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α浓度、凋亡率和caspase-3、NLRP3、磷酸化(p)-NF-κB蛋白水平上升(P<0.05),增殖率和cycilnD1蛋白水平下降(P<0.05);与模型组相比,罗哌卡因组和抑制剂组IL-6、IL-8、TNF-α浓度、凋亡率和caspase-3、NLRP3、p-NF-κB蛋白水平下降(P<0.05),增殖能力和cycilnD1蛋白水平上升(P<0.05);与罗哌卡因组相比,罗哌卡因+抑制剂组上述指标趋势变化更加显著(P<0.05),罗哌卡因+激动剂组则显著扭转了这些指标趋势(P<0.05)。结论罗哌卡因抑制LPS诱导的NCM-460细胞凋亡,促进增殖,NF-κB通路可能参与起作用。