H_2S通过MAPK信号通路影响缺血再灌注损伤大鼠回肠上皮细胞凋亡

目的:建立大鼠肠缺血再灌注(I/R)损伤模型,研究H2S对I/R损伤大鼠回肠上皮细胞凋亡、MAPK信号通路表达的影响。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组、I/R+Na HS组。建立大鼠肠I/R损伤模型。再灌注前10 min时经大鼠尾静脉注入100μmol/kg Na HS,随后按1 mg·kg^(-1)·h^(-1)输注直到再灌注2 h。RT-PCR检测回肠组织ERK、JNK和p38MAPK的mRNA表达,Western blot检测回肠组织p-ERK、p-JNK、p-p38MAPK、p-NF-κB P65的蛋白水平。TUNEL染色检测回肠上皮细胞凋亡。敏感硫电极法测定血、回肠组织匀浆中的H2S浓度。结果:I/R组的H2S浓度、ERK、mRNA、p-ERK均低于sham组和I/R+Na HS组,JNK mRNA、p38MAPK mRNA、p-JNK、p-p38MAPK、p-NF-κB P65和凋亡指数高于sham组和I/R+Na HS组。结论:H_2S通过下调ERK的mRNA表达及磷酸化,上调JNK、p38MAPK mRNA的表达,促进JNK、p38MAPK、NF-κB磷酸化,从而减轻I/R损伤大鼠的回肠上皮细胞凋亡。

硫化氢对肠缺血再灌注损伤大鼠回肠上皮细胞凋亡的影响

目的:探讨硫化氢(H2S)对大鼠缺血再灌注(I/R)损伤回肠上皮细胞线粒体形态和功能及凋亡的影响。方法:24只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组和I/R+Na HS组。建立大鼠肠I/R损伤模型。在灌注前10 min时经I/R+NaHS组大鼠尾静脉注入100μmol/kg Na HS后按1 mg·kg-1·h-1输注直到再灌注2 h,实验结束后取回肠标本测定回肠上皮细胞形态和呼吸功能指标。敏感硫电极法测定血浆H2S含量。RTPCR检测回肠组织Bcl-2和Bax mRNA表达,Western blot检测总caspase-3、活化型caspase-3、细胞色素C(Cyt C)、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:I/R组线粒体的面积、体积密度、最大直径、最小直径、等效直径以及活化型caspase-3、Cyt C和Bax表达均显著大于I/R+Na HS和sham组(P<0.01)。I/R组线粒体数量、周长、比表面、面积密度和粒子数密度、血浆H2S、R3、R4、RCR、P/O和Bcl-2表达均显著小于I/R+Na HS和sham组(P<0.01)。结论:硫化氢下调活化型caspase-3、Cyt C和Bax的蛋白水平,上调Bcl-2表达,对I/R损伤大鼠回肠上皮细胞线粒体形态和功能均有保护作用。

硫化氢在重症急性胰腺炎患者血浆中的表达及意义

目的:探讨硫化氢(H2S)在重症急性胰腺炎患者血浆中的表达及意义。方法:重症急性胰腺炎(A组)患者40例,同期健康体检者40例为正常对照组(B组)。敏感硫电极法测定血浆H2S浓度,化学法测定血浆NO含量,采用ELISA检测血浆中TNF-α、IL-6、高敏C反应蛋白(hsCRP)表达。结果:A组TNF-α、IL-6、hsCRP、NO及H2S均显著高于B组(P<0.01),H2S与TNF-α、IL-6、hsCRP、NO呈正相关(r=0.612、0.743、0.629、0.649,P<0.01)。结论:内源性H2S是一种炎症介质,在重症急性胰腺炎中起促进炎症反应效应。

H_2S对肠缺血-再灌注损伤大鼠凝血功能异常的影响

目的:H_2S对肠缺血-再灌注损伤大鼠凝血功能异常的影响及机制。方法:24只雄性Wistar大鼠随机分为A(假手术)组、B(缺血-再灌注)组和C(缺血-再灌注+NaHS)组。建立大鼠肠缺血-再灌注损伤模型,再灌注前10 min C组大鼠经尾静脉注入100μmol/kg NaHS并以1 mg/(kg·h)速度静脉维持到再灌注2h。RT-PCR、流式细胞仪法分别检测单核细胞蛋白酶激活受体-1(PAR-1)、PAR-3 m RNA及蛋白表达;ELISA法检测血组织因子(TF)、TNF-α、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1);敏感硫电极法测定血H2S;检测凝血VIII因子活性(FVIII:C)、血管性血友病因子(v WF)、纤溶酶原活性(PLG:A)、抗凝血酶活性(AT:A)、血小板计数。结果:C组PAR-1、PAR-1 m RNA、TF、TNF-α、FVIII:C、v WF、t-PA、PAI-1均低于B组、高于A组,差异有统计学意义(均P<0.01);C组H2S、PLG:A、AT:A低于A组、高于B组,差异有统计学意义(均P<0.01)。H_2S与PAR-1、PAR-1 m RNA、TF、TNF-α、FVIII:C、v WF、t-PA、PAI-1呈负相关(r=-0.58、-0.68、-0.62、-0.64、-0.73、-0.55、-0.57、-0.64,均P<0.01),与PLG:A、AT:A呈正相关(r=0.57、0.61,均P<0.01)。结论:H_2S通过降低PAR-1、TF、TNF-α含量,改善大鼠肠缺血-再灌注损伤时的凝血功能异常。

血硫化氢与肠缺血-再灌注损伤大鼠凝血功能相关性研究

目的研究血硫化氢(H2S)浓度与肠缺血-再灌注损伤大鼠凝血功能的相关性。方法雄性Wistar大鼠24只,分为S(假手术)组、I(缺血-再灌注)组,N(缺血-再灌注+硫氢化钠(NaHS))组,每组8只。S组仅行剖腹及游离肠系膜上动脉(SMA)术,I和N组剖腹、游离及钳夹肠SMA60min和再灌注120min,建立大鼠肠缺血-再灌注损伤模型。N组于再灌注前10min静脉注射NaHS100μmol/kg后,按1mg/(kg·h)持续静脉注射直到再灌注2h,S和I组静脉注射相同体积的生理盐水,作用时间和持续时间均同N组。取血测定H2S和凝血功能指标。结果 N组PT、APTT、TT、D-二聚体均低于I组、高于S组(P<0.01),N组H2S、FIB低于S组、高于I组(P<0.01)。H2S与FIB呈正相关(r=0.758,P<0.01),与PT、APTT、TT、D-二聚体呈负相关(r=-0.715、-0.721、-0.689、-0.748,P<0.01)。结论血H2S与肠缺血-再灌注损伤大鼠凝血功能改善相关。

硫化氢对急性出血坏死性胰腺炎患者凝血功能的影响

目的探讨硫化氢对急性出血坏死性胰腺炎患者凝血功能的影响。方法对40例急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)患者(设为观察组)和40例同期健康体检者(正常对照组)分别采用敏感硫电极法测定血浆H2S浓度,自动生化分析仪检测血、尿淀粉酶,流式细胞仪检测单核细胞蛋白酶激活受体-1(PAR-1)的平均荧光强度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测浆组织因子(TF)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白含量,凝固法检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和纤维蛋白原(FIB)。结果观察组PT、APTT、血淀粉酶、尿淀粉酶、PAR-1、TF、TNF-α及H2S水平均明显高于正常对照组,FIB水平明显低于正常对照组。H2S与PT、APTT、血淀粉酶、尿淀粉酶、PAR-1、TF、TNF-α呈正相关,与FIB呈负相关。结论内源性的H2S上调急性出血坏死性胰腺炎患者TNF-α表达起促炎作用,上调PAR-1、TF表达致凝血功能障碍。

急性胰腺炎患者内源性硫化氢水平的变化 及与凝血功能的关系

目的：探讨急性胰腺炎（AP）患者内源性硫化氢（H2S）水平的变化及与凝血功能的关系。方法采用前瞻性病例对照研究方法。选取2002年12月至2015年3月浙江省义乌市中心医院住院的轻症急性胰腺炎（MAP组）、重症急性胰腺炎（SAP组）患者各40例，以同期40例健康体检者作为对照（健康组）。留取空腹静脉血，测定血浆H2S、凝血因子Ⅷ（FⅧ）、血管性血友病因子（vWF）、纤溶酶原（PLG）、抗凝血酶（AT）、血小板计数（PLT）、组织因子（TF）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量及单核细胞蛋白酶激活受体-1（PAR-1）表达水平，并对各指标进行相关性分析。结果3组研究对象性别、年龄、体质量及AP两组间病程比较差异均无统计学意义，具有可比性。与健康组比较，MAP组、SAP组血浆H2S、FⅧ、vWF、TF、TNF-α及单核细胞PAR-1表达均显著升高〔H2S（μmol/L）：67.42±6.34、112.47±12.69比42.57±4.18，FⅧ：（67.5±5.8）%、（82.3±4.7）%比（57.2±6.4）%，vWF：（112.6±9.7）%、（142.5±12.5）%比（76.4±8.2）%，TF（ng/L）：45.27±4.34、64.76±6.25比18.15±1.89，TNF-α（ng/L）：197.67±13.62、324.72±25.54比20.08±2.57， PAR-1（荧光强度）：32.16±4.43、56.12±7.07比12.27±2.12，均P＜0.01〕，血浆PLG、AT活性显著减低〔PLG：（52.4±4.7）%、（36.7±3.2）%比（62.1±5.6）%，AT：（43.2±6.9）%、（35.5±5.4）%比（53.6±6.1）%，均P＜0.01〕，且SAP组各指标升高或降低较MAP组更为显著（均P＜0.01）。SAP组PLT明显低于健康组和MAP组（×109/L：8.5±1.1比15.7±2.8、12.4±1.9，均P＜0.01）。H2S与FⅧ、vWF、TF、TNF-α、PAR-1呈显著正相关（r值分别为0.56、0.61、0.72、0.66、0.64，均P＜0.01），与PLG、AT呈显著负相关（r值分别为-0.64、-0.57，均P＜0.01）。结论 AP患者内源性H2S可上调TF、TNF-α、PAR-1表达水平，从而介导AP患者的凝血功能障碍。

硫化氢对缺血-再灌注损伤大鼠回肠Toll样受体4、核因子-κB表达的影响

硫化氢（H2S）由胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）等催化L-半胱氨酸合成，对缺血-再灌注损伤大鼠小肠黏膜屏障功能障碍、肝脏功能障碍起保护作用。本实验旨在观察H2S对缺血-再灌注损伤大鼠回肠组织Toll样受体4（TLR4）、核转录因子-κB（NF—κB）表达的影响。

硫化氢对肠缺血-再灌注损伤大鼠炎症因子及内毒素血症的影响

目的研究硫化氢对肠缺血-再灌注损伤大鼠血C反应蛋白、降钙素原、内毒素、肿瘤坏死因子-α、白介素-6、白介素-8的影响。方法将64只雄性Wistar大鼠随机分为A(假手术)组、B(缺血-再灌注)组,C(缺血-再灌注+NaH S)组,D[缺血-再灌注+炔丙基甘氨酸(PPG)]组。经腹正中切口剖腹及游离肠系膜上动脉(SMA),钳夹B、C、D组大鼠SMA 60 min和再灌注120 min,建立大鼠肠缺血-再灌注损伤模型。C组在灌注前10 min向大鼠尾静脉注入100μmol/kg NaH S后按1 mg/(kg·h)输注直到再灌注2 h,D组在缺血前10 min向腹腔注入PPG50 mg/kg。检测血CRP、降钙素原、内毒素、H_2S、TNF-α、IL-6、IL-8并进行血培养,测定回肠组织匀浆中H_2S。结果与A组比较,B组的CRP、降钙素原、内毒素、TNF-α、IL-6、IL-8升高,H_2S降低。与B组比较,C组的CRP、降钙素原、内毒素、TNF-α、IL-6、IL-8降低,H_2S升高。与C组比较,D组CRP、降钙素原、内毒素、TNF-α、IL-6、IL-8升高,H_2S降低(P<0.01)。B、C、D组分别有14、6、15例血标本培养出大肠杆菌。H_2S与CRP、降钙素原、内毒素、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关。结论 H_2S降低肠缺血-再灌注损伤大鼠血炎症因子,改善内毒素血症。

断流术后下肢深静脉血栓形成的危险因素分析

目的探讨脾脏切除+贲门周围血管离断术后下肢深静脉血栓形成的危险因素。方法回顾性分析义乌市中心医院与广东医科大学附属医院2008年1月—2016年6月600例脾脏切除+贲门周围血管离断术后病例资料:年龄、性别、有无高血脂、有无动脉硬化性疾病、体重指数、吸烟史、大隐静脉曲张、使用止血药与否,并作统计学处理。结果 600例脾脏切除+贲门周围血管离断术后患者中85例出现下肢深静脉血栓,4例患者发生肺动脉栓塞,1例抢救无效死亡。年龄>48岁[OR=4.12,95%CI(1.07~12.31),P=0.007],甘油三酯>2.3mmol/L[OR=3.67,95%CI(1.24~18.32),P=0.013],体重指数>28 kg/m^2[OR=6.25,95%CI(1.67~20.35),P=0.001],使用止血药[OR=4.43,95%CI(2.37~18.36),P=0.006]是脾脏切除+贲门周围血管离断术后下肢血栓形成的独立危险因素。结论高龄、肥胖、高血脂、术后使用止血药物的脾脏切除+贲门周围血管离断术后患者易出现下肢静脉血栓。加强健康知识宣教,提倡低脂饮食、锻炼身体,养成良好的生活习惯,远离疾病。