慢性肾功能不全患者血浆血管紧张素Ⅱ、神经肽Y、神经降压素和甲状旁腺激素的变化及其临床意义

目的 探讨慢性肾功能不全患者血浆血管紧张素Ⅱ (AngiotensinⅡ ,AngⅡ )、神经肽Y(NeuropeptideY ,NPY)、神经降压素 (Neurotensin ,NT)全段甲状旁腺激素 (Intactparathyroidhormone ,iPTH)浓度变化及其临床意义。方法 采用放射免疫方法 (Radioimmunoassay ,RIA)检测血浆AngⅡ、NPY、NT浓度 ,采用免疫放射方法 (Immunoradiometricassay,IRMA)检测血清iPTH。健康对照组 (A组 ) 2 0例 ,肾功能不全代偿期 (B组 ) 2 0例 ,氮质血症期 (C组 ) 2 0例 ,尿毒症期 (D组 ) 2 0例。结果 随肾功能衰竭程度日趋加重 ,AngⅡ浓度依次升高 ,C、D组与A组相比 ,有显著性差别 (P <0 .0 0 1) ;NPY浓度逐渐增加 ,B、C、D组与A组相比 ,有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NT浓度依次降低 ,D组与A组相比有显著性差异 (P <0 .0 0 1) ;iPTH浓度逐渐升高 ,D组与A组相比 ,有显著性差别 (P <0 .0 0 1) ;AngⅡ、NPY、iPTH与Ccr呈负相关 ,NT与Ccr呈正相关 ;AngⅡ与NT呈负相关。结论 增高的AngⅡ、NPY、iPTH和降低的NT在CRF进展中起重要作用 ,为CRF的预防和治疗提供理论依据。

两步法分离和培养人羊水来源胚胎间充质干细胞的生物学特征

背景:目前对干细胞的体外分离纯化技术大多是建立在对细胞表面标记识别的基础之上,包括单抗贴壁铺展法、流式细胞分选法、免疫磁珠分选法等,但操作复杂,价格昂贵。目的:观察两步法分离和培养人羊水来源胚胎间充质干细胞的生物学特征。设计、时间及地点:开放性实验,于2008-03/2009-03在新疆医科大学干细胞研究室完成。材料:10例羊水标本来自怀孕16～22周行产前诊断或自愿引产的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得20～40mL羊水。方法:采用改进的两步培养法分离和培养人羊水间充质干细胞,首先同一步法将羊水标本离心、接种、培养至出现梭形细胞为主、类成纤维细胞的间充质干细胞集落。然后将上清培养液转移至新的25cm2培养瓶中继续培养,至出现梭形细胞为主、类成纤维细胞的间充质干细胞集落且达70%汇合后消化,改用α-MEM培养基,同样添加碱性成纤维细胞生长因子,接种培养,记为第1代。主要观察指标:①原代及传代羊水间充质干细胞形态学变化。②羊水间充质干细胞细胞核型、细胞周期、生长曲线和集落形成能力测定。③流式细胞仪、免疫荧光和RT-PCR检测表面抗原和细胞因子。结果:实验成功分离、培养和传代人羊水间充质干细胞。①孕中期羊水细胞原代培养平均7d可见散在的梭形细胞为主、类成纤维细胞的间充质干细胞集落;传代细胞在12h内完全贴壁,经过一两天潜伏期后增殖迅速,培养六七天可达90%融合,细胞排列有一定的方向性,呈漩涡状、辐射状排列,细胞为长梭形,相互之间界限不清。②两种方法得到的羊水间充质干细胞染色体核型为正常二倍体核型;生长曲线均呈S形,但两步法在第(6.1±0.5)天就达到高峰,显著快于一步法第(7.2±0.6)天(P=0.035)。流式细胞仪检测结果显示两步法羊水P3细胞S期细胞占(14±2.3)%,显著多于一步法(9.0±1.4)%(P=0.031)。两种方法获得的羊水间充质干细胞低密度种植7d后,均可形成散在的细胞集落,但两步法集落形成率为(15.0±2.3)%,显著多于一步法(10.0±1.8)%(P=0.021)。③流式细胞仪检测结果显示,羊水间充质干细胞表达CD44、CD29、CD105,而CD34、CD45、HLA-DR阴性;免疫荧光检测表明羊水中含有Oct-4阳性细胞,但两步法羊水间充质干细胞中Oct-4阳性细胞比例为(1.2±0.3)%,显著高于一步法(0.9±0.2)%(P=0.041);RT-PCR分析表明两种方法获得的羊水间充质干细胞均表达Oct-4。结论:人羊水中也存在间充质干细胞,两步培养法是一种高效、简便实用而且不干扰常规产前诊断程序的方法。

SD大鼠羊水间充质干细胞向神经样细胞体外诱导分化

目的:探讨体外诱导羊水间充质干细胞(AF-MSCs)分化成神经干细胞.方法:10只SD怀孕大鼠,180-240g,胎龄16d,过量腹腔麻醉致死,开腹全部切除子宫,在无菌的条件下抽取全羊水,采用贴壁法分离AF-MSCs,体外培养扩增,观察细胞生长特性,流式细胞仪检测AF-MSCs表面抗原表达及细胞周期.取第3代AF-MSCs,加入预诱导液(DMEM/F12、100mL/LFBS、1mmol/Lβ-MEM)诱导24h,然后加入诱导液(DMEM/F12、100mL/LFBS、5mmol/Lβ-MEM)诱导24h,最后在分化维持培养液(DMEM/F12、20μg/LEGF、20μg/L bFGF)中培养,行免疫荧光染色,检测NSE和GFAP的表达.结果:成功分离、培养和传代SD大鼠AF-MSCs,流式细胞术检测提示大鼠AF-MSCs的G0/G1期细胞比例约为87.5%、S+G2+M期比例为12.5%,表达CD44为98.3%、CD29为70%、和CD105为33.2%、不表达CD45为0.5%,CD34为1%,DLA-DR(MHCclassⅡ)为0.1%.诱导后,AF-MSCs能表达神经细胞标示物NSE和GFAP,且可在体外继续存活2wk左右.结论:羊水中也存在MSCs,与其他来源的MSCs特点相符;羊水可以作为一种新的胎儿MSCs来源,而且能在体外诱导分化为神经细胞.

维吾尔族SLE的临床特征分析(附与汉族SLE临床特征对照分析)

目的:探讨维吾尔族(维族)系统性红斑狼疮((systemic lupus erythematosus,SLE)临床特征。方法:对78例维族SLE患者进行回顾性分析,与同期住院的307例汉族SLE患者进行临床表现、实验室检查及预后的比较。结果:维族SLE中男性患者的比例和心包积液的发生率显著高于汉族患者;血补体C3水平明显低于汉族,血尿阳性率、血中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)和抗天然(双链ds)DNA抗体(抗dsDNA)阳性均明显高于汉族;但肾功能损害及预后均与汉族无差异。结论:与汉族相比,维族患者心包积液和血尿的发生率高,伴有明显的自身抗体谱明显异常,尤以低补体血症、高ANCA和dsDNA阳性率为明显,因而临床病情重,活动程度高,但如果及时治疗,坚持随访,预后好。

内科常规治疗联合床旁连续性肾脏替代疗法治疗急性重症胰腺炎的效果观察

目的总结内科常规治疗联合床旁连续性肾脏替代疗法治疗急性重症胰腺炎的效果,为急性重症胰腺炎治疗工作提供参考。方法选择我院2015年8月~2016年12月收治的72例SAP患者,以随机数字表法分为对照组和观察组,每组36例。对照组采取内科常规治疗,观察组联合CRRT治疗,对比两组SAP患者治疗期间ApacheⅡ评分、C反应蛋白、降钙素原、血TNF-a浓度等实验指标变化情况以及临床症状(腹痛、腹胀)缓解时间、ICU住院时间。结果治疗后,观察组ApacheⅡ评分、C反应蛋白、降钙素原、血TNF-a浓度等临床指标均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组腹痛、腹胀恢复时间分别为(18.50±6.50)h和(17.20±5.20)h,短于对照组的(85.05±5.60)h和(82.50±6.50)h,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组ICU住院时间为(7.55±3.50)d,短于对照组的(16.50±4.50)d,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论内科常规治疗基础上联合CRRT治疗SAP,可短时间改善患者症状、缩短患者住院时间,应用效果显著。

血液透析患者极低甲状旁腺激素血症与病死率的关系

对于终末期肾病患者而言,肾性骨病、甲状旁腺功能异常与矿物质代谢紊乱综合征均是最为严重的合并症,对透析患者的生活质量和生存期限具有非常明显的影响。在肾性骨病中,有一种分型名为无动力型骨病,占所有肾性骨病的40%[1]。这种病症的起因之一便是患者患有极低甲状腺激素血症（LPHH）。

两步法分离和培养人羊水来源胚胎间充质干细胞及其向神经元样细胞诱导分化的实验研究

目的建立两步培养法分离培养人孕中期羊水间充质干细胞（Mscs）的方法，观察羊水MSCs向神经元样细胞的诱导分化。方法采用改进的两步培养法分离和培养人羊水MSCs，以p巯基乙醇诱导其向神经元样细胞方向分化；并使用流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫细胞化学法研究人羊水MSCs的生物学特性。结果成功分离、培养和传代出人羊水MSCs。流式细胞术检测人羊水MSCs表达CD44、CD29、CD105，不表达CD45、CD34、人白细胞DR抗原（HLA—DR）；免疫荧光法和RT—PCR检测表明，部分人羊水MSCs表达转录因子Oct一4。两步培养法羊水MSCs集落形成率[（15．0±2．3）％]和Oct一4阳性细胞率[（1．2±0．3）％]均高于一步法[分别为（10．0±1．8）％，（0．9±0．2）％，P均〈0．053。羊水MSCs经p巯基乙醇诱导后细胞形态发生改变，伸出突起并呈神经球样改变；免疫细胞化学法检测显示（54．76±3．65）％的细胞表达神经元特异性烯醇化酶（NSE），同时（36．28±4．27）％的细胞表达神经胶质酸性蛋白（GFAP）。结论人羊水中存在MSCs，两步培养法是一种高效、简便、实用而且不干扰常规产前诊断程序的方法。在体外条件下，利用β-巯基乙醇和适宜的培养液可使羊水MSCs定向分化为神经元。

内质网应激标志物在老年射血分数降低的心力衰竭中的预测作用及其与急性代偿失调的关系

目的:探究内质网应激标志物蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在老年射血分数降低的心力衰竭(HFrEF)中的预测作用及其与急性代偿失调的关系。方法:选取2017年1月—2020年1月在本院就诊的HFrEF老年患者216例为HFrEF组,同期无急性、亚急性或慢性病史的老年者187例为对照组。收集受试者基线资料[性别、年龄、肺动脉收缩压(sPAP)、左心室射血分数(LVEF)等]及实验室参数[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、C反应蛋白(CRP)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等],比较内质网应激标志物水平,并通过ROC曲线分析其对HFrEF的预测价值。对HFrEF患者均随访3个月,以急性失代偿性心力衰竭(ADHF)为终点,分析内质网应激标志物对ADHF的预测及住院时间的影响。结果:HFrEF组PERK水平高于对照组,CHOP、GRP78水平均显著低于对照组(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,PERK预测HFrEF的曲线下面积(AUC)为0.684,敏感度为87.5%,特异度为44.4%;CHOP预测HFrEF的AUC为0.716,敏感度为44.0%,特异度为79.7%;GRP78预测HFrEF的AUC为0.846,敏感度为54.2%,特异度为95.7%。216例HFrEF患者发生ADHF 68例(31.48%),ADHF组CHOP、GRP78水平均显著高于非ADHF组(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,CHOP、GRP78预测ADHF的AUC分别为0.755、0.630,截点值分别为63.95 pg/ml、233.45 pg/ml。线性回归分析显示,年龄、CHOP能够正向预测ADHF患者的住院时间(年龄:B=0.083,95%CI:0.008~0.157,P<0.05;CHOP:B=0.064,95%CI:0.043~0.086,P<0.05)。结论:内质网应激标志物CHOP、GRP78对HFrEF具有一定预测准确性;且CHOP可预测ADHF,其与年龄可共同预测ADHF患者住院时间。