转录因子TWIST1干扰神经发生对睡眠剥夺小鼠抑郁样行为的影响

目的探究转录因子TWIST1对睡眠剥夺诱发抑郁样行为小鼠神经发生的影响。方法将小鼠随机分为对照(Con)组,对照+LV-sh TWIST1(Con+LV-sh TWIST1)组,睡眠剥夺(SD)组,睡眠剥夺+LV-sh TWIST1(SD+LV-sh TWIST1)组。通过LV-shTWIST1降低小鼠脑组织中TWIST1表达,采用睡眠剥夺构建小鼠抑郁症模型,连续7 d,期间每天腹腔注射50 mg/kg BrdU溶液。通过糖水偏好测试、悬尾测试、强迫游泳测试与旷场测试检测小鼠抑郁样症状,Morris水迷宫检测小鼠学习、记忆能力,Western blot检测神经发生相关蛋白表达,电生理测试检测突触可塑性,免疫荧光检测神经发生情况。结果与Con组比较,SD组小鼠糖水偏好率与旷场测试评分明显减少(P<0.05),悬尾与游泳不动时间明显增加(P<0.05),Morris水迷宫中首次到达平台时间明显增加(P<0.05)。然而,与SD组比较,SD+LV-shTWIST1组糖水偏好率与旷场测试评分明显增加(P<0.05),悬尾与游泳不动时间明显减少(P<0.05),Morris水迷宫中首次到达平台时间明显减少(P<0.05)。此外,Western blot检测TWIST1表达明显降低的同时Wnt3a与β-catenin蛋白表达明显增加,与此同时,fEPSP斜率明显升高且BrdU阳性细胞数明显增加。结论睡眠剥夺造成的小鼠抑郁样行为与脑组织中TWIST1表达升高相关,通过降低TWIST1表达能够激活Wnt3a/β-catenin信号通路,促进神经发生,达到改善小鼠抑郁样行为的作用。

槲皮素通过Rac1/LIMK1/cofilin信号通路治疗抑郁症的机制研究

目的 探讨槲皮素(Que)对慢性不可预测轻度应激(CUMS)小鼠抑郁行为的影响和可能的作用机制。方法 将60只C57BL/6J小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、氟西汀组(Positive组)、低浓度Que组(L-Que组)、高浓度Que组(H-Que组)。构建CUMS小鼠抑郁模型,给予不同浓度的槲皮素(20 mg·kg、40 mg·kg)灌胃治疗,氟西汀(10 mg·kg)作为阳性对照。通过体质量测量、糖水偏好实验、悬尾实验、强迫游泳行为学实验检测小鼠抑郁程度;尼氏染色检测小鼠海马神经元形态和数量;高尔基染色检测海马神经元树突棘形态;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B (TrkB)、突触素(SYP)及突触后致密物-95 (PSD-95)mRNA表达;Western blotting检测小鼠海马中BDNF、TrkB、SYP、PSD-95、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、LIM激酶1 (LIMK1)、p-LIMK1、丝切蛋白(cofilin)、p-cofilin蛋白水平。结果 与Control组比较,Model组小鼠体质量、糖水偏好百分比显著降低,悬尾和强迫游泳的不动时间显著增加(P<0.05);Model组小鼠海马神经元数量明显减少,尼氏小体部分消失或溶解,海马区树突棘密度显著减少,BDNF、TrkB、SYP、PSD-95 mRNA水平以及BDNF、TrkB、SYP、PSD-95、Rac1、p-LIMK1、p-cofilin蛋白水平均显著降低(P<0.05)。L-Que组和H-Que组显著改善了小鼠的抑郁样行为(P<0.05);与Model组比较,L-Que组和H-Que组小鼠海马神经元数量明显增多,树突棘密度升高,BDNF、TrkB、SYP、PSD-95 mRNA水平以及BDNF、TrkB、SYP、PSD-95、Rac1、p-LIMK、p-cofilin蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结论 Que通过激活Rac1/LIMK1/cofilin通路增强突触可塑性从而改善小鼠抑郁样行为。