理化因素对川泽泻凝集素血细胞凝集活性的影响

[目的]明确温度、pH和金属离子等理化因素对川泽泻凝集素血细胞凝集生物学活性的影响。[方法]川泽泻块茎经研磨、浸取、硫酸铵沉淀、离子交换和亲和层析柱分离纯化得到凝集素(Alisma plantago-aquatica Linn.Lectin,APL),然后用系列温度、pH和金属离子等理化因素处理凝集素样品,应用倍比稀释法检测凝集素凝集人类血细胞活性。[结果]APL对家兔、家鸡、鲤鱼等动物血细胞无凝集作用,能使人ABO_(4)种类型血细胞发生不同程度凝集,对A型血细胞凝集活性明显高于其他3种血型红细胞。用20~100℃以10℃梯度处理后,川泽泻凝集素在20~40℃凝集活性很强,50℃凝集活性开始降低,在70℃仅具42%的凝集活性,80℃加热10 min完全失活;当pH为低于5.4或高于7.6时,凝集活性逐渐降低,当pH≤3.4或pH≥9.0时,川泽泻凝集素失去血细胞凝集活性;用EDTA透析后凝集素凝集活性基本消失,Ca^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、K^(+)等离子能使凝集素凝集活性不同程度恢复。[结论]川泽泻凝集对热稳定性较弱;凝集活性最适pH为6.0~6.8,其凝集活性部分依赖于Ca^(2+)、Mg^(2+)等金属离子。