长链非编码RNA锌指蛋白反义链1靶向微小RNA-512-3p抑制肾癌细胞侵袭和转移

目的探讨长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(lncRNAZFAS)靶向调控微小RNA-512-3p(miR-512-3p)表达及对透明细胞肾细胞癌(ccRCC)侵袭和迁移的影响。方法收集2019年2月至2020年4月我院泌尿外科接受肾癌根治术的ccRCC患者30例,获取肾癌及癌旁组织标本。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测30个ccRCC癌肿组织和30个邻近非肿瘤正常组织中lncRNAZFAS和miR-512-3p和可能靶向miRNAs的表达水平。分别通过细胞计数盒(CCK-8)测定、细胞克隆试验、Transwell迁移和侵袭测定测定敲低lncRNAZFAS1对细胞增殖、细胞克隆、迁移和侵袭的影响。lncRNAZFAS1和miR-512-3p的相关性通过生物信息学软件RAIDv2.0和AnnoLnc预测进行分析。lncRNAZFAS1和miR-512-3p之间的相互作用通过荧光素酶报告基因检测验证。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果RT-qPCR结果显示lncRNAZFAS1在ccRCC癌肿组织表达显著高于邻近非肿瘤组织(1.96±0.17比1.00±0.01,t=2.691,P<0.01),miR-512-3p在ccRCC癌肿组织表达显著低于邻近非肿瘤组织(0.67±0.06比1.00±0.01,t=1.319,P<0.05)。CCK-8结果显示,si-lncRNAZFAS1组细胞活性均低于空白组及si-NC组(0.43±0.09比0.96±0.08比0.98±0.05,F=3.759,P<0.05);细胞克隆试验结果显示,si-lncRNAZFAS1组肾癌细胞的克隆形成数显著低于空白组及si-NC组(52.4±8.2比100.2±5.4比99.6±4.3,F=7.924,P<0.05);Transwell侵袭和迁移结果显示,si-lncRNAZFAS1组穿越细胞数低于空白组及si-NC组(132.2±11.4比179.6±16.8比175.2±19.8,F=3.817,P<0.05),差异有统计学意义。双荧光素酶报告基因实验证实miR-512-3p被确定为ZFAS1的靶标。结论lncRNAZFAS1靶向miR-512-3p抑制ccRCC的生长和转移,lncRNA ZFAS1可能成为ccRCC的新治疗靶点。