钾矿区海金沙内生真菌多样性及生态分布研究

为探明不同钾矿区同种植物内生真菌的物种多样性、群落组成以及生态分布规律,运用传统组织分离方法与分子生物学方法相结合,对3个不同钾矿区(龙南安基山、南京小龙山、黎川龙安)的海金沙居群地采样,进行了海金沙内生真菌的分离频率、种类组成、多样性和生态分布分析,同时与非钾矿区(庐山莲花洞)海金沙内生真菌进行对比分析。结果表明:从海金沙1200个组织块中分离出477株内生真菌,其中产孢菌株229株,占总数48%,不产孢菌248株,占52%。根据形态学特征和形态型菌株的rDNA的18S基因和ITS序列的相似性比较和分子系统发育分析确定477菌株中438菌株鉴定隶属于Alternaria、Colletotrichum、Fusarium、Peniccillium等75个分类单元,还有39株不产孢类群无法鉴定。在真菌属的水平,以Colletotrichum(20.96%)、Fusarium(11.32%)和Alternaria(8.81%)为优势菌群。从分离频率来看,不同钾矿区内生真菌出现频率存在差异,各矿区内生真菌菌群之间的相似性低,相似性系数(Cs)在0.07—0.30之间。钾矿区海金沙内生真菌出现频率高于非钾矿区,非钾矿区(莲花洞)菌株分离频率为19.08%,而在钾矿区中南京分离频率最高(33.33%)。在宿主组织中,海金沙叶片、叶柄和根状茎等不同组织部位内生真菌在数量、种群分布以及优势种群等方面存在较大差异,叶柄(44.44%)>叶片(39.41%)>根状茎(16.15%),在各个组织部位的优势类群分布也存在一定的差异。形成内生真菌分布差异性与不同地理位置、气候因素、土壤理化性质和宿主植物组织的生理状况以及化学组成变化等密切相关。

超声-微波协同提取庐山石耳多糖条件优化及其功能活性研究

为探索超声波-微波辅助提取庐山石耳多糖的工艺及其功能活性。以超声-微波协同提取方法,分别考察微波功率、超声波-微波协同提取时间、料液比对庐山石耳多糖得率的影响,在单因素实验的基础上,通过L_9(3~3)正交实验,对庐山石耳多糖提取工艺进行优化。结果表明,庐山石耳多糖最佳提取工艺:微波功率为150 W、料液比为1∶30(g∶m L)、超声波-微波协同提取时间为240 s,庐山石耳多糖得率为12.87%;通过测定清除DPPH·对庐山石耳多糖的体外抗氧化活性评价。结果表明,庐山石耳多糖具有较高的体外抗氧化活性,浓度为65μg/m L时对DPPH·的清除率为65.62%;利用MTT法分析庐山石耳多糖对Hep G2细胞体外生长增殖的抑制作用,结果显示:庐山石耳多糖对Hep G2细胞的抑制作用明显,庐山石耳多糖浓度在0.001~2 mg/m L范围内,对Hep G2肿瘤细胞的抑制率呈现出急剧上升,当庐山石耳多糖浓度为10 mg/m L时抑制率为87.79%,IC_(50)值为0.6637 mg/m L。