大河乌猪火腿中新型α-葡萄糖苷酶抑制肽的分离、鉴定及活性研究

大河乌猪火腿在发酵和后熟过程中蛋白质降解可产生丰富的生物活性肽。为探究大河乌猪火腿中是否存在α-葡萄糖苷酶抑制肽及其活性,以大河乌猪火腿为研究对象,通过超滤分离方法制备了不同分子质量的火腿肽;以α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,采用肽组学结合生物信息学分析方法对火腿肽进行鉴定、筛选和活性研究。结果表明:分子质量小于3 kDa的大河乌猪火腿肽具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。从大河乌猪火腿中共鉴定出143条主要来源于肌球蛋白、肌钙蛋白和β-烯醇化酶的肽序列,进一步筛选出的肽段IEEALGDK具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性(IC_(50)值为1.42 mg/mL)。BIOPE P-UWM数据库检索结果显示,肽段IEEALGDK为新型的生物活性肽。肽的稳定性研究表明,肽段IEEALGDK具有较好的热稳定性、耐酸碱性和胃肠道消化稳定性。分子对接结果显示,肽段IEEALGDK主要通过氢键和疏水相互作用占据α-葡萄糖苷酶的活性残基位点Arg594、Arg727、Arg799和Arg467发挥活性作用。大河乌猪火腿的肽段IEEALGDK为新型生物活性肽,具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,研究旨在为大河乌猪火腿肽的进一步开发和利用提供理论参考。

薄皮核桃壳醌类物质微波辅助提取及初步小鼠试验

为了有效利用核桃壳资源,将其开发成绿色饲料添加剂。先采用均匀设计的微波辅助法提取薄皮核桃中醌类物质,再进行初步小鼠试验,研究其对小鼠生长性能、胸腺和脾脏指数的影响。结果表明,最佳微波辅助法提取条件为:时间35 s,料液比1 5,微波功率480 W,核桃壳粒径80#。试验组A的小鼠平均日增重与对照组O相比,差异不显著(P>0.05)、但是脾脏指数有极显著提高(P<0.01)。试验中微波辅助法提取核桃醌类得率为1.779%,核桃醌类物质能一定程度提高小鼠的免疫功能,这对核桃壳绿色添加剂的开发具有借鉴意义。

山竹壳色素通过微波辅助结合超滤法分离研究

为了开发山竹壳色素作为蛋鸡饲料添加剂,采用膜法分离其中的活性物质。采用超滤膜装置结合微波辅助法分离山竹壳色素物质。山竹壳原料粉末质量约50 g,料液比为1:10,采用4因素3水平的正交试验设计,分别研究山竹壳粒度(30、100、200目)、溶剂浓度(30%、40%、50%)、微波功率(160、320、480 W)、微波时间(10、20、30 s)对提取效果的影响。结果表明:粒度、溶剂浓度对提取结果影响差异显著(P<0.05),最佳提取条件为山竹壳粒度过100目筛、提取溶剂为50%乙醇-0.108%HCl混合溶液、微波溶解功率为160 W、微波溶解时间为20 s。在适宜条件下超滤法结合微波辅助法可以用于提取分离山竹壳色素,这为开发山竹壳色素作为新型绿色饲料添加剂做出了有益尝试。

饲喂大麦对大河乌猪干腌火腿理化特性及脂肪酸组成的影响

【目的】研究大麦饲喂对大河乌猪干腌火腿理化特性和脂肪酸组成的作用,为大河乌猪养殖管理和肉制品加工提供基础数据。【方法】以"长白猪×大河乌猪"二元杂交的仔猪为研究对象,采用大麦饲喂(玉米饲喂为对照)到100 kg(180日龄)、130 kg(210日龄)、160 kg(250日龄)后,选用其后腿肉为原料,按照传统工艺二次撒盐加工成干腌火腿,食盐添加量为原料肉重的8%,取含有半膜肌、半腱肌、股二头肌的肉块,绞碎后测定食盐、蛋白质、水分、肌内脂肪含量、脂肪酸组成、蛋白质氧化、脂肪氧化水平的差异。【结果】与饲喂玉米相比,从100—160 kg,大麦型日粮组的大河乌猪干腌火腿脂肪含量降低了2%—4%,蛋白质含量提高了2%—4%,蛋白质和脂肪氧化程度减小;大河乌猪体重达到160 kg时,干腌火腿的食盐含量降低了1.03%,水分含量增加了4.52%;单不饱和脂肪酸(MUFA)含量最高的是130 kg体重组中饲喂大麦组,饱和脂肪酸(SFA)含量最高的是160 kg体重组中饲喂玉米组,多不饱和脂肪酸(PUFA)含量最高的是130 kg组的饲喂大麦组。饲喂大麦会显著降低100 kg、130 kg组大河乌猪干腌火腿中棕榈酸(C16:0)含量(P<0.05),显著降低130 kg、160 kg组的硬脂酸(C18:0)含量(P<0.05)。与饲喂玉米型日粮组相比,大麦型日粮组的大河乌猪干腌火腿中PUFA含量以及多不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例(PUFA/SFA)显著增加(P<0.05)。随着大河乌猪体重的变化,干腌火腿中羰基含量先升高再趋于稳定。大麦型日粮组中大河乌猪干腌火腿的羰基含量均显著低于玉米型日粮组(P<0.05)。在大麦型日粮组中,大河乌猪体重对干腌火腿中TBRAS值没有显著影响(P>0.05)。在玉米型日粮组中,130 kg体重组的TBARS值显著低于100 kg、160 kg体重组中的TBARS值。饲喂大麦的大河乌猪体重达到160 kg时干腌火腿的品质最佳,其食盐含量、水分含量、蛋白质含量、脂肪含量和PUFA含量分别为7.96%、48.38%、34.64%、8.52%和12.18%,PUFA/SFA和n-6/n-3的比率分别为0.31和30.25,羰基含量和TBARS值分别为0.62 nmol·mg^(-1)蛋白质和2.14 mg·kg^(-1)。【结论】饲喂大麦增加大河乌猪干腌火腿的蛋白质和多不饱和脂肪酸含量,增强其氧化稳定性。

冷却方式对大河乌猪冷却肉贮藏性能的影响

本文对采用不同冷却方式(一段式、两段式冷却)的大河乌猪(活重120kg)冷却肉的贮藏性能进行研究。结果表明:两段式冷却肉的色差b值、汁液流失率、挥发性盐基氮、细菌总数、假单胞菌数低于一段式冷却(P<0.05),而对pH值、色差L值、a值、大肠菌群值等影响不大(P>0.05)。本实验贮藏期约为4-6天,其中两段式冷却可延长2天贮藏期,更适合于大河乌猪冷却肉的生产。

五种食用菌降解小麦秸秆木质素的比较研究

目的:我国每年小麦秸秆产量达2亿t,其开发利用的难点在于木质素的降解,为了有效开发利用小麦秸秆,实验对云芝等5种食用菌降解小麦秸秆木质素的产酶能力进行研究。方法:用云芝、灵芝、香菇、平菇、鸡腿菇分别降解小麦秸秆,在温度23℃~25℃、湿度58%~60%的最佳条件下扩大培养,离心提取以上5种菌种的粗酶液,采用考马斯亮蓝法、用分光光度法等对粗酶液的蛋白质含量和酶活性质进行研究。结果:得到线性方程Y=6.659X+0.3312,相关系数R^2=0.9904,发现5种菌种在培养的过程中蛋白质含量逐渐增加,且在第10天含量都趋于稳定。云芝产锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Lac)效果最佳,第7天时,MnP的酶活最高为313330U/L,Lac的酶活最高为2230U/L。结论:可以用云芝菌的高效产MnP和Lac能力,开发利用小麦秸秆木质素资源。

六种食用菌降解小麦秸秆木质素的酶活性比较

我国每年小麦秸秆产量达2亿吨,其开发利用的难点在于木质素的降解,云芝、灵芝、香菇、朱红栓菌等食用菌中含有高效的木质素降解酶,为了有效开发利用小麦秸秆,本实验对云芝菌等降解小麦秸秆木质素的产酶能力进行研究。方法:本文以云芝、灵芝、香菇、平菇、鸡腿菇、猴头菇为研究对象分别降解小麦秸秆,在温度23~25℃、湿度58%~60%的最佳条件下扩大培养,离心提取以上6种菌种的粗酶液,采用考马斯亮蓝法、用分光光度法等对粗酶液的蛋白质含量和酶活性质进行研究。结果:得到线性方程Y=6.659X+0.3312,相关系数R^2=0.9904,发现6种菌种在培养的过程中蛋白质含量逐渐增加,且在第10天含量都趋于稳定。云芝产锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Lac)效果最佳,第7天时,MnP的酶活最高为313330U/L,Lac的酶活最高为2230U/L。结论:可以用云芝菌的高效产MnP和Lac能力,开发利用小麦秸秆木质素资源。

香菇菌粗酶液对猪场雾霾颗粒中菲的作用研究

目的:近5年以来,我国雾霾污染十分严重,猪场也同受其害,雾霾中包括菲等有害物质危害猪和养殖人员的健康;以往的研究发现香菇菌分泌的漆酶等酶类可以降解多种有害物质,因此本实验研究香菇菌粗酶液对雾霾中的菲的作用,以便为消除雾霾中菲对人和动物的有害作用提供一些参考。方法:本实验首先采用L_93~4正交实验,研究流速(0.6m L/min、0.8 m L/min、1.0 m L/min),波长(210nm、220nm、254nm),柱温(25℃、30℃、40℃),有机相甲醇和水相之比(75∶25、70∶30、85∶15)来确定高效液相色谱仪器检测雾霾中的菲的条件参数。然后采用L_93~4正交实验,研究温度(35℃、40℃、30℃),酶处理时间(10h、20h、30h),pH(4.0、4.4、4.8),加入酶的量(5m L、10m L、15m L)对香菇粗酶液降解雾霾中菲的影响。结果:发现最适条件:温度40(℃),pH值4.0,处理时间30(h),加入酶的量10(mL);在此条件下菲含量为0.351846±0.047246ng/m^3,降解前雾霾样品中的菲含量为108.3298 ng/m^3,降解率达到99.68%。结论:可以用香菇菌粗酶液来降解雾霾中的菲,香菇菌粗酶液可以被开发成为有潜力的解毒剂。

屠宰过程中微生物污染与冷却肉品质关系的研究

研究屠宰过程中微生物污染数量与各品质指标变化的关系,并对剥皮与烫毛两条生产线控制前后的初始微生物与各品质指标进行了对比研究。结果表明,冷却肉的品质变化与微生物的生长繁殖程度紧密相关,当微生物数量达到108CFU/g时产品已经开始腐败;采用控制措施显著地减少了初始微生物数量,使得冷却肉的保鲜期(0～4℃条件贮藏)延长3～4 d。

小麦替代玉米对中猪生长性能的影响

目的:研究用小麦替代玉米后,生长育肥猪的生长性能的影响,探讨适宜的替代量。方法:选用平均体重为28.84±1.12 kg的(杜×长×大)三元杂交猪135头,分成5组,每组3个重复,每个重复9头猪。第Ⅰ组、第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别替代基础日粮中0%、20%、40%、60%和80%的玉米,并在其中分别添加0.00%、0.10%、0.15%、0.20%和0.25%的小麦复合酶,试验期60 d。结果 :用小麦替代基础日粮中20%、40%的玉米可不同程度提高生长肥育猪的平均日增重;添加40%的玉米时干物质、粗蛋白、钙的消化率最大,此时分别比对照组增大12.96%、1.57%和1.52%;料重比、饲料成本最低,降低了料重比7.23%,降低饲料成本7.40%,提高利润率41.77%。结论:在添加小麦复合酶的情况下,生长猪的饲料中小麦替代40%的玉米时效果最佳。

香菇菌粗酶液对猪场雾霾中萘的作用研究

近5年以来,我国雾霾污染十分严重,猪场也同受其害,雾霾中包括萘等有害物质危害猪和养殖人员的健康;以往的研究发现香菇菌分泌的漆酶等酶类可以降解多种有害物质。为研究香菇菌粗酶液对雾霾中萘的作用,以便为消除雾霾对人和动物的有害作用提供一些参考,文章首先采用L934正交实验,研究流速(0.6mL/min、0.8 mL/min、1.0 mL/min),波长(210nm、220nm、254nm),柱温(25℃、30℃、40℃),有机相甲醇和水相之比(75:25、70:30、85:15)来确定高效液相色谱仪器检测雾霾中的萘的条件参数。然后采用L_93~4正交实验,研究温度(35℃、40℃、30℃),酶处理时间(10h、20h、30h),p H(4.0、4.4、4.8),加入酶的量(5mL、10mL、15mL)对香菇粗酶液降解雾霾中萘的影响。结果发现:温度35℃,p H值4.0、处理时间10h、加入酶的量5mL为最适条件;在此条件下萘含量为2.08±2.95(pg·m^(-3)),降解前雾霾样品中的萘含量为0.217494ng·m^(-3),降解率达到99.04%。结论表明,香菇菌粗酶液可以降解雾霾中的萘,具有开发潜力。

香菇菌粗酶液对猪场雾霾颗粒中菲的作用研究

目的:近5年以来,我国雾霾污染十分严重,猪场也同受其害,雾霾中包括菲等有害物质危害猪和养殖人员的健康;而香菇菌分泌的漆酶等可以降解多种有害物质,因此实验研究香菇菌粗酶液对雾霾中菲的作用,为消除雾霾中菲对人和动物的危害提供借鉴。方法:本实验首先采用L_93~4正交实验,研究流速(0.6 mL/min、0.8 mL/min、1.0 mL/min),波长(210 nm、220 nm、254 nm),柱温(25℃、30℃、40℃),有机相甲醇和水相之比(75:25、70:30、85:15)来确定高效液相色谱仪器检测雾霾中的菲的条件参数。然后采用L_93~4正交实验,研究温度(35℃、40℃、30℃),酶处理时间(10h、20h、30h),pH(4.0、4.4、4.8),加入酶的量(5mL、10mL、15mL)对香菇粗酶液降解雾霾中菲的影响。结果:发现最适条件:温度40℃,pH值4.0,处理时间30 h,加入酶的量10 mL;在此条件下菲含量为0.351846±0.047246 ng/m^3,降解前雾霾样品中的菲含量为108.3298 ng/m^3,降解率达到99.68%。结论:可以用香菇菌粗酶液来降解雾霾中的菲,香菇菌粗酶液可以被开发成为有潜力的解毒剂。

香菇菌粗酶液对猪场雾霾颗粒中蒽的降解作用研究

目的:近5年以来,我国雾霾污染严重,猪场也深受其害,猪和养殖人员的健康遭遇威胁;而香菇菌分泌的漆酶等可以降解有害物质,该实验研究香菇菌粗酶液对雾霾中的蒽的作用。方法:实验首先采用L_93~4正交实验,研究流速(0.6ml/min、0.8 ml/min、1.0 ml/min),波长(210nm、220nm、254nm),柱温(25℃、30℃、40℃),甲醇和水相之比(75∶25、70∶30、85∶15)来确定高效液相色谱仪器检测雾霾中的蒽的条件参数;然后采用L_93~4正交实验,研究温度(35℃、40℃、30℃),酶处理时间(10h、20h、30h),pH值(4.0、4.4、4.8),加酶量(5mL、10mL、15mL)对香菇粗酶液降解雾霾中蒽的影响。结果:最适条件下(温度40℃,pH值4.0,处理时间30h,加酶量10mL)蒽含量变为0.186 425±0.263 645(pg·m^(-3)),降解前蒽含量为0.153 598ng·m^(-3),降解率达到99.88%。结论:可以用香菇菌粗酶液来降解雾霾中的蒽,香菇菌粗酶液可以被开发成为有潜力的解毒剂。

准饲料添加剂千里光中没食子酸类物质超滤分离研究

目的:为了开发千里光绿色饲料添加剂,而采用膜法分离其中的活性物质。方法:采用超滤膜装置分离千里光中没食子酸类活性物质。用无水乙醇作溶剂,料液比为1:100,千里光原料粉末质量约10g;采用四因素三水平的正交实验设计,研究溶剂浓度20%、30%、40%,微波处理时间50、60、70 s,粒度30、40、60目,压力0.08MPa,0.15MPa,0.2MPa,对提取效果的影响。结果:溶剂浓度、微波处理时间对吸光度值影响差异不显著(P>0.05);粒度、压力对吸光值影响差异显著(P<0.05),最佳提取条件为粒度40目,压力0.08MPa。结论:在适宜条件下超滤法可以用于提取分离千里光中没食子酸类活性物质,这为开发千里光作为新型绿色饲料添加剂做出了有益尝试。

日粮中添加甲基-天冬氨酸、胍基乙酸、γ-氨基丁酸和甾醇对中猪生产性能和饲料成本影响的研究

目的:为了开发甲基-天冬氨酸、胍基乙酸、γ-氨基丁酸和甾醇绿色饲料添加剂,确定其实际使用效益。方法:采用98头平均体重(50.48±3.89)kg的杜长大中猪分成5组,分成对照组、甲基-天冬氨酸100 g/t组、胍基乙酸500 g/t组、γ-氨基丁酸100 g/t组、甾醇20 g/t组,饲养42 d,研究四种添加剂对中猪生长性能和经济效益的影响。结果:各组日增重、料肉比、价/肉比(元/kg)都差异不显著(P>0.05),但是有潜在的影响。结论:甲基-天冬氨酸、胍基乙酸、γ-氨基丁酸和甾醇的适宜添加量需要深入研究。

SPME-GC-MS结合ROAV分析腌制时间对大河乌猪火腿挥发性风味物质的影响

本研究旨在分析腌制时间对大河乌猪干腌火腿风味品质的影响,揭示干腌火腿的特征风味物质。将172只大河乌猪鲜腿分为4个组,采用传统方法加工后,每组随机抽取4只火腿,采用固相微萃取-气相色谱-质谱(Solid-Phase Microextraction-Gas Chromatography-Mass Spectrometry,SPME-GC-MS)技术并结合相对气味活度值(Relative Odor Activity Value,ROAV)法和主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)法对大河乌猪火腿挥发性风味物质进行分析。结果表明:腌制15、18、21、24 d的挥发性成分的种类分别为57、57、54、41种,共鉴定77种同类挥发性成分;聚类分析表明不同腌制时间的大河乌猪火腿挥发性物质的组成及相对含量存在较大的差异;ROAV分析表明醛类和醇类对风味贡献最大;PCA表明1-辛烯-3-醇、异戊醛、正辛醛、双戊烯是不同腌制期火腿中含量变化最明显的挥发性物质。腌制时间对大河乌猪干腌火腿风味品质有一定影响,研究可为火腿品质控制及风味改良提供理论依据。

辛夷对小鼠生长性能和繁殖性能的影响

目的:研究红辛夷对小鼠的生长性能和繁殖性能的作用。方法:选用72只小鼠,随机分成4组,每组3个重复,每个重复6只小鼠,每组分别添加0%、0.004 5%、0.009%、0.013 5%比例的辛夷煎剂于饮水中进行饲养和繁殖实验。计算总增重、料肉比、排泄量和产仔数、成活率。结果:随着辛夷煎剂浓度增加,料肉比、成活率呈逐渐升高趋势,但是都差异不显著(P>0.05);总末重、产仔数、成活数降低,差异显著(P<0.05);总增重降低,差异极显著(P<0.001);饲料消耗量降低,差异极显著(P<0.001)。日总排泄量呈逐渐降低,差异极显著(P<0.001)。结论:辛夷不适合用在断乳后仔鼠饲料中和妊娠期母鼠饲料中,但是具有使用在断乳前仔鼠饲料中的潜力。

HACCP体系在大河乌猪冷却肉生产中的应用

本文研究大河乌猪冷却肉生产线上的危害分析与关键控制点(HACCP)体系,以保障大河乌猪冷却肉的质量。根据冷却肉生产线上微生物污染状况检测,确定了宰杀放血、开膛和冷却分割3个工序点微生物污染较严重,存在显著危害。根据冷却肉生产中微生物学和理化学性质变化的调查测试及危害分析,确定了宰前检疫、刺杀放血、冷却分割3个工序点为冷却肉生产过程中的关键控制点(CCP),并制定了CCP的控制措施及纠偏方法,建立了大河乌猪冷却肉HACCP生产体系。

标准化工艺条件下大河乌猪火腿发酵过程中的挥发性风味物质变化

该研究采用固相微萃取-气相色谱-质谱(solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry,SPME-GC-MS)技术结合偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)和相对气味活度值(relative odor activity value,ROAV)对发酵90 d、150 d、210 d、270 d、450 d和630 d的大河乌猪火腿的挥发性风味物质进行分析。结果表明:发酵过程中共鉴定到137种挥发性风味成分,包括醛、醇、酸、烃、酮、酯、芳香族类及其他类化合物,其中,醛类(51.63%~68.17%)和醇类(12.73%~23.64%)的种类和含量最为丰富;随着发酵时间的延长,挥发性风味物质种类增加了23种,但四个不同发酵期(210 d、270 d、450 d、630 d)的大河乌猪火腿中挥发性风味物质组成相似,说明发酵至210 d时主体风味化合物已经形成;发酵过程中关键风味物质有1-庚醇、3-甲基-1-丁醇、3-甲基丁醛、2,3-辛二酮、苯乙醛、己醛、辛醛、壬醛等16种。标准化工艺条件下发酵时间对火腿挥发性风味物质的形成有一定的影响,且大河乌猪火腿的加工期可定为10~12个月,研究为大河乌猪火腿标准化加工技术提供理论依据。

大河乌猪钙蛋白酶抑制蛋白基因、脂肪细胞定向和分化因子1基因多态性及其与肉质性状的关联分析

利用PCR-RFLPs技术研究大河乌猪脂肪细胞定向和分化因子1(ADD1)、钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)的遗传酶切多态性及其与肉质性状的关联性。结果表明,在CAST基因的MspI-RFLP位点上C等位基因的频率为0.617 3,高于D等位基因的频率;HinfI-RFLP位点上B等位基因为0.512 3,高于A等位基因的频率;在RsaI-RFLP位点上E等位基因的频率为0.506 2,高于F等位基因的频率。在ADD1基因的Eam1104 I-RFLP位点上,等位基因H的频率为0.598 8,高于T等位基因的频率。在对大河乌猪CAST基因与肉质性状的关联分析中,在HinfI-RFLP位点上,肌内脂肪含量AA型与BB型差异显著(P<0.05);肉色评分BB型>AB型>AA型,各基因型间差异显著(P<0.05),失水率AA型显著高于AB型和BB型(P<0.05),贮存损失AA型与AB型差异显著(P<0.05);在MspI-RFLP位点上,失水率DD型显著高于CC型和CD型(P<0.05);在ADD1基因的Eam1104I-RFLP位点上,肌内脂肪含量HH型显著高于HT和TT型(P<0.05),失水率HH型显著高于HT型(P<0.05)。ADD1基因与CAST基因确实与猪的肉质性状存在一定的关联。