核桃肽的制备、分离纯化及生物活性研究进展

核桃粕是一种优质的植物蛋白资源,利用其制备的核桃肽有抗氧化、降血压等保健功能。但目前核桃粕常被作为废弃物或低价值饲料、肥料,该现状阻碍了核桃产业的发展。因此,利用核桃粕开发生物活性肽等产品,对于实现综合利用、提高副产品附加值具有重要意义。本文综述了核桃肽的制备、分离纯化及其生物活性,探讨了核桃肽在食品、医药行业的不同用途,旨在为核桃粕的高效利用和核桃产业发展提供参考信息。

中药注射剂大分子杂质与类过敏反应:线索与原理

从技术上寻找中药注射剂安全性问题的解决方案一直是中医药界的热点问题。本文基于口服药物吸收规律较系统地分析了不能直接吸收的大分子杂质是导致其安全性问题的重要因素,可能通过病原相关分子模式(PAMP)和损伤相关分子模式(DAMP)激发机体的固有免疫反应而引发(类)过敏反应,最后提出去除大分子杂质是提高中药注射剂安全性的重要策略。

去大分子注射用聚山梨酯80的安全性提高

目的 发现并证明大分子杂质是影响注射用聚山梨酯80安全性的因素,测定去大分子聚山梨酯80的主要物理常数。方法理论分子量为1310 Da的注射用聚山梨酯80原液用超滤膜得到组分A(>100 kDa)、组分B(10~100 kDa)和组分C(<10 kDa)。各组分冷冻干燥后获得各组分在原液中的比例。各组分用生理盐水配置成10%浓度,按照《中国药典》2015年版进行豚鼠过敏和类过敏反应检查,同时用昆明种小鼠进行静脉注射的5 d毒性检查,并观察5 d恢复期。按照《中国药典》方法检测各组分的物理常数。结果分子量大于10 kDa的组分占85%以上,聚山梨酯80原液、组分A和组分B能诱发过敏和类过敏反应,而组分C反应阴性。组分A和B能在5 d恢复期减慢体重恢复;根据器官指数变化,聚山梨酯80原液能导致小鼠肝脏、肾脏、脾脏和肺轻度损伤,5 d后仍不能完全恢复;其中肝肾损伤得到了显微病理支持。其中组分C对各器官的影响最小,且容易恢复。去大分子后(组分C),其增溶能力、粘度、密度、吸收光谱、pH和颗粒大小得到了不同程度的改善。结论注射用聚山梨酯80中含有大量的大分子杂质,这些杂质是导致器官毒性、过敏和类过敏反应的重要因素,去除大分子杂质能提高其安全性。

山药多糖对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响及作用机制

为研究山药多糖对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠胰岛素抵抗的影响及作用机制,选取SPF级C57BL/6小鼠,随机分为正常组、模型组、山药多糖(低、中、高剂量)组、二甲双胍组,采用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)结合高脂饲料喂养法建立T2DM小鼠模型,连续灌胃多糖6周后取血清测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹血清胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)及胰岛素耐量(insulin tolerance test,ITT)。取肝脏进行油红O染色,观察脂肪沉积情况,16S rRNA基因测序检测肠道菌群丰度,代谢组学检测其短链脂肪酸的含量。研究结果表明,各剂量山药多糖均能够显著降低小鼠的FBG、FINS、HOMA-IR(P<0.01)。相比于模型组小鼠,山药多糖组小鼠的肠道菌群物种总量及多样性增加,厚壁菌门与拟杆菌门比值、变形菌门水平显著降低,乳酸菌属、阿克曼氏菌属水平显著提高,肠杆菌属、脱硫弧菌属水平显著降低。山药多糖显著提升小鼠肠道中短链脂肪酸含量(P<0.01),其中以丙酸、丁酸的上升趋势较为显著(P<0.01)。研究结果表明,山药多糖可改善T2DM小鼠的糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗,其可能通过增加菌群物种总量及多样性,并改变其菌群群落比例及增加短链脂肪酸的含量,发挥生物活性。研究旨在为山药多糖的开发利用提供理论参考。

基于修复肠屏障改善抑郁症小鼠炎症水平的五味子及玫瑰花作用机理研究

研究了五味子及玫瑰花对抑郁模型小鼠行为学和炎症水平的影响,以及其抗抑郁作用和相关机制.在实验中,将36只C57BL/6J小鼠随机分成对照组(Control)、模型组(Model)和五味子及玫瑰花治疗组(S+R),每组12只.除对照组外,模型组和五味子及玫瑰花治疗组均采用慢性不可预知性温和刺激(Chronic unpredictable stress, CUMS)联合孤养制备抑郁模型,连续给予7周刺激,在造模第5周结束后进行行为学检测以判断是否造模成功.在第6周开始,五味子及玫瑰花治疗组给予五味子及玫瑰花灌胃治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水.药物干预2周后取材,通过行为学判断小鼠抑郁样行为;Elisa检测小鼠海马5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)和脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)及血清中白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)和内毒素(Lipopolysaccharide, LPS)的水平;Q-PCR检测结肠组织中IL-6、IL-1β、TNF-α和LPS的mRNA相对表达量;HE染色观察结肠组织炎症浸润情况;Western blot检测结肠组织Occludin、claudin1、ZO-1的蛋白表达水平.结果显示,与模型组相比,五味子及玫瑰花治疗组的体重无明显变化(p>0.05);糖水偏好实验治疗组小鼠糖水偏好率显著上升(p<0.01);旷场实验中总路程呈上升趋势(p>0.05),穿越格子数显著上升(p<0.05);强迫游泳中漂浮时间显著缩短(p<0.01);海马中的5-HT、BDNF的含量显著上升(p<0.01);结肠组织炎症浸润程度减轻,同时结肠黏膜屏障相关蛋白Occludin、claudin1、ZO-1表达显著上升(p<0.05),结肠组织中IL-6、IL-1β、TNF-α和LPS的mRNA相对表达量显著下降(p<0.05);血清中的IL-6、IL-1β、TNF-α和LPS水平显著下降(p<0.05).研究表明,五味子及玫瑰花这一药对可改善抑郁模型模型小鼠的抑郁样行为,其机制可能与修复肠黏膜屏障,减少肠源性炎症介质的释放有关.

基于中西医理论指导的类风湿关节炎动物模型分析

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节炎症、滑膜增生、软骨和骨破坏为主要表现的系统性自身免疫性疾病。本文基于中西医理论对RA的认识,对常用RA动物模型进行梳理,从发病机制、造模方法、模型评价指标、临床症状吻合度以及模型适用研究方面进行分析,以期为建立更好的RA动物模型提供参考。

排毒养颜胶囊对尿酸酶缺失大鼠的降血尿酸作用

目的观察排毒养颜胶囊对尿酸酶缺失大鼠的降血尿酸作用。方法取7只体质量180~220 g的雄性尿酸酶缺失大鼠,灌胃排毒养颜胶囊悬液(0.42 g/kg),连续灌胃5 d。给药前和末次给药后2 h取血制备血清,用磷钨酸法测定血尿酸水平。同时收集给药前24 h和给药第5天24 h尿液和粪便,也用磷钨酸法测定排泄物中的尿酸含量并计算总量。结果对比给药前,给药5 d后大鼠的血尿酸水平显著降低(P<0.05),粪便中24 h尿酸总量显著增加(P<0.05),但24 h尿液中的尿酸总量反而有减少趋势,差异无统计学意义(P=0.109)。结论口服排毒养颜胶囊能通过增加尿酸在粪便中的排泄量而降低尿酸酶缺失大鼠的血尿酸水平。

雄性Kunming-DY大鼠血尿酸水平的主要影响因素

目的研究正常饲养条件下,影响雄性尿酸酶缺失大鼠(Kunming-DY大鼠)血尿酸水平的主要因素。方法取日龄为45 d的雄性Kunming-DY大鼠、杂合子大鼠和野生型大鼠,断尾取血制备血清,测定血清尿酸、血尿素氮和血肌酐水平。将大鼠置于代谢笼内监测其24 h摄入量,收集24 h的排泄物,检测排泄物的尿酸含量。对比分析各组大鼠的检测结果,同时对Kunming-DY大鼠组内的各因素进行相关性分析。结果与野生型大鼠或杂合子大鼠相比,Kunming-DY大鼠体质量明显偏轻,饮水量增加,血尿酸、血尿素氮和血肌酐值升高,尿量增多、尿液和粪便尿酸排泄量增加,血尿酸水平与进食量呈负相关。结论45日龄雄性Kunming-DY大鼠血尿酸水平主要由内源性尿酸生成增多引起,尿酸酶缺失对生长和肾功能存在不利影响。

几种饮食因素对尿酸酶缺失大鼠血尿酸的影响

为了观察酸碱溶液、氯化钠和饮酒对尿酸酶缺失大鼠(昆明-DY大鼠)尿酸血的影响.将45 d日龄雄性昆明-DY大鼠自由饮用醋酸氨丁三醇(0.5和1.5 g/L,pH8.4)、盐酸氨丁三醇(0.5和1.5 g/L,pH8.4)、碳酸氢钠(0.5和1.5g/L,pH8.4)、醋酸钠(0.5和1.5 g/L,pH8.4)、氯化钠(0.5和1.5 g/L,pH6.5)、醋酸(0.5和1.5 g/L,pH4.0)、盐酸(0.5 g/L,pH2.0)、乙醇(4 mL/L)溶液和弱碱性矿泉水(pH9.3)14 d,实验前后断尾取血制备血清,收集大鼠24 h尿液和粪便,记录24 h进食和饮水量.样品中的尿酸含量采用磷钨酸法检测.结果发现,醋酸氨丁三醇、盐酸氨丁三醇、碳酸氢钠、氯化钠和盐酸能降低大鼠血清尿酸,乙醇能升高血尿酸,醋酸钠、醋酸和弱碱性矿泉水对大鼠血尿酸无明显影响.综上,氨丁三醇醋酸盐溶液在口服降尿酸方面具有一定优势,禁酒对阻止尿酸升高有利,而弱碱性矿泉水降尿酸作用不明显.

PVDF膜在碱性DMSO中的变色反应

将聚偏二氟乙烯(PVDF)膜用不同碱性溶液浸泡后置于非质子极性溶剂DMSO或其它有机溶剂中,观察膜片的颜色变化和反应体系的pH值变化,研究PVDF膜在碱性DMSO中的变色反应并探讨反应机理。结果表明,PVDF膜具有碱不稳定性,用NaOH溶液浸泡后置于DMSO中,膜片很快变为棕黑色,反应体系由强碱性变为近中性或弱酸性。可能的变色反应机理为:PVDF在强碱作用下生成中间体(具有可逆性),该中间体于非质子极性溶剂中可以脱氟化氢而生成棕黑色的聚一氟乙炔,聚一氟乙炔具有共轭二烯、双键碳氟键和饱和碳氟键结构。

高压干热处理对紫苏粉的灭菌作用和促成分溶出作用

目的与高压湿热和常压干热处理方法进行对比,观察高压干热处理法对中药紫苏粉末微生物和中药成分溶出的影响。方法采用高压湿热、高压干热、常压密闭干热和常压开放干热4种方式分别于110℃、121℃处理紫苏粉0、15、30、60、120 min。每0.4 g药材粉末处理后加入无菌蒸馏水5 mL振摇6 h后取上清进行微生物检查和溶出物吸收光谱检查。结果高压干热处理的灭菌效果略低于高压湿热法,但明显高于常压热处理法。110℃高压干热处理15 min能大大降低药材粉末的微生物载量,30 min后达到无菌效果;121℃高压干热处理15 min也能达到无菌效果。热处理后,溶出物吸收光谱相似,230~370 nm的吸收值明显增加,其中110℃高压干热处理15 min达到较佳效果。结论高压干热处理是一种值得选用的物品灭菌方法。

药用植物紫红獐牙菜的转录组信息分析

紫红獐牙菜是重要的民族药,本研究采用高通量测序技术对紫红獐牙菜进行转录组测序并分析。结果显示,完成的15个样品的转录组测序,获得112.17 Gb Clean data,各样品Clean data均达到6.18 Gb,Q30碱基百分比在94.96%及以上。组装后共获得47 106条unigene,其中长度在1 kb以上的unigene有18 971条。通过与KEGG、GO、KOG、COG等多个数据库进行比对,对unigene进行功能注释,共获得35 375条unigene。GO数据库中注释到的26 570条unigene,可分为生物学过程、细胞组分和分子功能三大类共44个亚类。以KEGG数据库为参考,21 321条基因被注释,参与的代谢通路分为5大类,分别是细胞过程、环境信息处理、遗传信息处理、代谢和有机系统,其中与代谢相关的通路最多,约占所用通路的72.5%;KEGG代谢通路分析发现紫红獐牙菜中1 147条unigene参与到22个次生代谢标准通路中,有77条unigene参与编码环烯醚萜苷类合成通路中的25个关键酶。此外,紫红獐牙菜转录组中找到9 027个SSR重复位点,6种SSR重复类型,最多的为双碱基重复占66%,最少的为六碱基重复,占0.1%。本研究结果填补了紫红獐牙菜的转录组数据空白,为该植物合理利用与品质调控提供一定的帮助。