雷帕霉素对非酒精性脂肪性肝病大鼠的影响

目的探讨雷帕霉素对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的治疗效果及作用机制。方法选用24只清洁级SD雄性大鼠,体重180~220 g,随机选取8只作为正常组,喂普通饲料。剩余16只喂高糖高脂饲料构建NAFLD模型,6周末造模成功后按随机数字表法将其分为模型组、雷帕霉素组,每组8只。雷帕霉素组用2.8 mg/(kg·d)雷帕霉素灌胃,正常组和模型组等量生理盐水灌胃,持续给药4周。实验结束后,采用苏木精-伊红染色及油红O染色观察各组肝组织的病理变化。检测并比较各组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平及肝组织TC、TG水平。检测并比较各组肝组织自噬相关蛋白(Beclin1、ATG5)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、泛素结合蛋白p62表达水平。结果正常组肝细胞形态未见明显异常,模型组肝组织苏木精-伊红染色可见大多数肝细胞内有大小不等的脂肪空泡,油红O染色可见大多数肝细胞内含有脂质被染成橘红色。雷帕霉素组肝组织苏木精-伊红染色及油红O染色可见脂肪空泡和橘红色较少。模型组血清TC、TG、LDL-C、GOT、GPT水平及肝组织TC、TG水平高于正常组,血清HDL-C水平低于正常组(P<0.05或P<0.01)。雷帕霉素组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均高于模型组,血清GOT、GPT及肝组织TC、TG水平均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。模型组Beclin1、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、ATG5表达水平低于正常组,泛素结合蛋白p62高于正常组(P<0.05)。雷帕霉素组Beclin1、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、ATG5表达水平高于模型组,泛素结合蛋白p62低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论雷帕霉素对NAFLD大鼠有保护作用,其机制可能与增强肝组织自噬水平有关。

膈下逐淤汤增强自噬改善非酒精性脂肪肝病大鼠的实验研究

目的 基于自噬研究膈下逐淤汤治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为正常组,模型组,膈下逐淤汤低剂量组,膈下逐淤汤中剂量组,膈下逐淤汤高剂量组,每组8只。除正常组普通饲料加自来水喂养外,其余各组均高糖高脂饲料加5%红糖水喂养。6周末造模成功后,膈下逐淤汤低、中、高剂量组分别给予7.2g/(kg·d)、14.4g/(kg·d)、28.8g/(kg·d)膈下逐淤汤灌胃治疗,持续6周。取材前称取大鼠体重,剖腹取出肝脏称取肝脏重量,获得肝指数;肝脏病理切片HE染色和油红O染色观察肝脏病理变化;全自动生化仪检测大鼠血清血脂及肝功能(TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALT、AST);免疫印迹实验(Western blot)检测肝组织自噬相关蛋白Beclin1、LC3B-II、P62蛋白表达;免疫组织化学法(INF)检测肝组织自噬相关蛋白ATG5、P62蛋白表达。结果 与正常组对比,模型组大鼠肝脏病理变化脂肪变性明显;肝指数、血清血脂(TG、TC、LDL-C)、肝功能(ALT、AST)、肝组织P62蛋白表达显著增高(P<0.05或P<0.01);血清HDL-C、肝组织Beclin1、LC3B-II、ATG5蛋白表达显著下降(P<0.05)。与模型组对比,膈下逐淤汤低、中、高剂量组大鼠肝脏病理变化脂肪变性明显减轻;肝指数、血清血脂(TG、TC、LDL-C)、肝功能(ALT、AST)、肝组织P62蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);血清HDL-C、肝组织Beclin1、LC3B-II、ATG5蛋白表达显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论 膈下逐淤汤可能通过增强肝组织自噬水平对非酒精性脂肪肝病起保护作用。