不同花色香石竹在发育过程中花青素、总黄酮及山奈酚糖苷的含量变化

为测定不同花色香石竹在花蕾期(F_(1))、初开期(F_(2))、半开期(F_(3))、盛开期(F_(4))以及茎、叶、花萼中花青素、总黄酮、山奈酚3-O-新橙皮苷、山奈酚三糖苷的含量。采用紫外分光光度计法、pH示差法、HPLC法分别测定花青素、总黄酮及山奈酚糖苷含量,比较不同品种之间的差异。结果表明,花青素含量表现为紫色>红色>粉色,绿色和黄色石竹未检测出花青素。随着花的生长,花青素的含量逐渐增高。5种花色中茎、叶和花萼中均未检测到花青素;总黄酮的含量表现为紫色>红色>绿色>粉色>黄色。随着花期的变化,黄酮的含量逐渐减少。所有品种中,花萼中黄酮的含量最低,除粉色石竹的茎中黄酮含量最高,其他品种的石竹叶中的黄酮含量最高;山奈酚三糖苷含量表现为绿色>粉色>紫色>黄色>红色。除红色石竹在初开期(F_(2))中含量最高,其他花色中山奈酚三糖苷随着花期的变化呈下降趋势。5种花色石竹中,茎中山奈酚三糖苷的含量最低。紫色和红色石竹的叶中山奈酚三糖苷的含量最高,粉色、绿色和黄色的花萼中山奈酚三糖苷的含量最高;山奈酚-3-O-新橙皮苷含量表现为粉色>绿色>红色>紫色,黄色石竹未检测出山奈酚-3-O-新橙皮苷。山奈酚-3-O-新橙皮苷含量最高的为初开期(F_(2)),表现为初开期(F_(2))>花蕾期(F_(1))>半开期(F_(3))>盛开期(F_(4))。5种花色的茎和花萼中山奈酚-3-O-新橙皮苷含量较少,叶中含量极少。

超声波辅助提取地涌金莲多酚及其抗氧化活性分析

【目的】采用响应面法优化超声波辅助提取地涌金莲多酚的工艺条件,评价其抗氧化活性,以期为地涌金莲的开发利用提供参考依据。【方法】以地涌金莲花瓣为原料,在单因素试验的基础上,依据Box-Behnken中心组合原理选择超声波功率(X_(1))、提取温度(X_(2))、提取时间(X_(3))和料液比(X4)为试验因素,多酚提取量(Y)为响应值进行响应面试验,优化得到超声波辅助提取的最佳工艺条件;并以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)阳离子自由基的能力及总抗氧化能力(FRAP)为指标,评价地涌金莲多酚提取物的抗氧化活性。【结果】各因素对地涌金莲多酚提取量的影响排序:X_(2)>X_(3)>X_(1)>X4;X_(1)X_(2)、X_(1)X_(3)的交互作用对多酚提取量的影响极显著(P<0.01),X_(2)X_(3)的交互作用对多酚提取量的影响显著(P<0.05)。模型方程优化为Y=100.73-4.87X_(1)X_(2)-5.03X_(1)X_(3)-4.09X_(2)X_(3)-11.13X_(1)^(2)-9.06X^(2)_(2)-12.05X_(3)2-10.46X42,此时的地涌金莲多酚提取最佳工艺参数为超声波功率360 W、提取温度55°C、提取时间30 min、料液比1∶20(g/mL),在此条件下的地涌金莲多酚提取量为10.51 mg/g,与理论值(10.08 mg/g)接近。抗氧化试验结果显示,地涌金莲多酚提取物清除DPPH自由基和ABTS阳离子自由基的半抑制浓度(IC_(50))分别为20.03和39.68μg/mL,FRAP值为47.540μg/mL,且抗氧化能力高于槲皮素。【结论】超声波辅助提取的地涌金莲多酚具有良好的抗氧化活性,可开发为一种安全、天然、可食用的抗氧化剂。

超声介导下羟基喜树碱纳米粒抗细胞增殖活性的研究

目的比较载羟基喜树碱纳米粒经超声刺激前后对鼠源性肝癌细胞H22、鼠源性乳腺癌细胞4T1、人正常肝细胞LO2及人源性肝癌细胞Bel-7402增殖活性的影响。方法采用MTT法、MTS法检测超声前后羟基喜树碱原药、注射液及纳米粒对H22、4T1、LO2、Bel-7402细胞增殖活性的影响。结果与羟基喜树碱注射液及原药比较,未经超声辐照,纳米粒对4种细胞的增殖抑制性较低,4T1细胞存活率>50%,H22细胞、Bel-7402细胞及LO2细胞存活率均>60%;经超声辐照48 h后,纳米粒对细胞的增殖抑制性升高(P<0.05),H22、4T1、Bel-7402、LO2细胞IC_(50)值降低至32.75、19.88、69.68、11.94μg/mL。结论未经超声辐照下羟基喜树碱纳米粒安全性较好;超声辐照后纳米粒对肿瘤细胞的抑制作用优于原药及其注射液。

石竹属植物化学成分及生物活性研究进展

石竹属植物资源丰富,全球约600种,具有利尿通淋、活血通经等功效。主要含有100多种化学成分,现代药理学研究表明具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等药理活性。目前关于石竹属植物综述性报道较少,通过查阅CNKI、PubMed等数据库,对石竹属植物的化学成分及生物活性的研究进展进行综述,以期为石竹属植物后期研究和开发应用提供参考。

不同肥料对香石竹生长和开花的影响

【目的】旨在探究不同化肥对不同品种的香石竹生物学性状的影响。【方法】利用3种不同成分的化肥对3个种香石竹进行施肥处理,并测量其叶长叶宽等生物学性状。【结果】综合对比三种化肥对三个品种香石竹生物学性状的影响发现康乃馨专用肥的效果最好,富补施水溶肥次之,自配肥料效果最差。【结论】每种植物所需的化肥不完全相同,就三个品种香石竹而言,康乃馨专用肥更适合。

蓝莓叶斑病病原菌鉴定及其生物学特性

为明确蓝莓叶斑病病原菌种类及其生物学特性,采用组织分离法和单孢分离法对病原菌进行分离纯化,通过形态学特征和多基因联合序列分析进行病原鉴定,采用叶片涂抹接种法测定其致病性,并于室内对其生物学特性进行研究.结果表明,从发病蓝莓叶片分离得到3株形态特征一致的菌株,代表菌株LC-1菌落呈深棕色,菌丝白色至浅红棕色;大型分生孢子梗无色透明,长303~410μm,分枝末端产生2~4个瓶梗;囊泡棒状,大小为(12~30)μm×(2~5)μm;大分生孢子无色透明,圆柱形,两端半圆形,大小为(48~82)μm×(4~7)μm.采用Act,H3,EF-1α和β-tub 4段基因联合构建系统发育树,供试菌株LC-1与柯氏丽赤壳菌(Calonectria colhounii)聚在同一分支.蓝莓叶片接种菌株LC-1后出现典型的叶斑症状.根据形态学特征和系统发育分析,将该病原菌鉴定为柯氏丽赤壳菌.生物学特性研究结果表明,菌丝最适生长温度为25℃,最适pH值为7,该菌对可溶性淀粉的利用最好,菌丝生长的最适氮源为甘氨酸.

香石竹DcSKP1基因克隆及表达分析

SKP1基因是SCF E3泛素连接酶蛋白复合物的核心成分,参与多种生物过程。然而,香石竹SKP1基因还未被克隆,该文利用RT-PCR结合RACE技术,从香石竹(Dianthus caryophyllus)的花药中分离克隆了1个减数分裂相关基因SKP1的全长cDNA序列,命名为DcSKP1(GenBank登录号为MK931293)。结果表明:(1)DcSKP1基因cDNA全长序列为962 bp,含有1个长度为567 bp的ORF,该基因编码188个氨基酸。(2)蛋白序列比对显示,DcSKP1中存在一个高度保守TPEE基序,还具有Skp1_POZ结构域和Skp1结构域,并与拟南芥的SKP1聚集在一个分支上。(3)利用荧光定量PCR对香石竹DcSKP1基因表达模式进行研究,发现DcSKP1基因在各个组织部位都有表达,在花药中的表达量高于茎、叶组织,且在幼小的花药中表达量最高,随着花药发育的进程表达量下降。由此推测,DcSKP1基因可能在香石竹减数分裂中具有重要作用。

羟基喜树碱纳米粒在大鼠体内的药动学、组织分布及靶向性研究

目的:研究羟基喜树碱纳米粒在大鼠体内的药动学及组织分布特征,并探讨其靶向性。方法:将雄性SD大鼠随机分为两组,每组6只,分别单剂量尾静脉注射羟基喜树碱纳米粒和市售羟喜树碱注射液(4 mg/kg,以羟基喜树碱计),在给药后5、30、60、120、240、360、480、600、720 min时于眼底静脉丛取血500μL,采用高效液相色谱法测定不同时间点血浆中羟基喜树碱的含量,以DAS 3.0等软件计算药动学参数。另取雄性SD大鼠随机分为两组,每组24只,分别单剂量尾静脉注射羟基喜树碱纳米粒和市售羟喜树碱注射液(0.6 mg/kg,以羟基喜树碱计),在给药后30、60、120、240 min时于腹主动脉取血并摘取心、肝、脾、肺、肾、脑,采用高效液相色谱法测定不同时间点血浆及组织中羟基喜树碱的含量,考察其分布特征及靶向性。结果:羟基喜树碱纳米粒和市售羟喜树碱注射液在大鼠体内均符合二室模型,羟基喜树碱纳米粒的AUC0-720 min和AUC0-∞分别为市售羟喜树碱注射液的1.89和1.87倍,MRT0-720 min和MRT0-∞为2.74和3.00倍,t1/2β为2.75倍,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);给药后30 min时,羟基喜树碱纳米粒和注射液在肺中浓度最高;随着时间的推移,药物逐渐向肝部位积累,在60 min时肝药浓度达到最高。羟基喜树碱纳米粒在肝的相对摄取率最大(6.28);以肝为靶向器官,其在心、脾、肺、肾、脑和血浆中的靶向效率均大于羟喜树碱注射液;给药后30~120 min,羟基喜树碱纳米粒在心、肺(除给药后30 min外)、肾、脑、血浆中的选择性指数均显著高于羟喜树碱注射液(P<0.05或P<0.01)。结论:羟基喜树碱纳米粒延长了药物的半衰期、提高了其血药浓度、延长了其体内作用时间,且肝靶向性显著。

基于自噬探讨中药复方治疗非酒精性脂肪性肝病作用机制的研究进展

肝自噬与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发生发展密切联系。在非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)阶段肝细胞自噬水平降低;在肝纤维化(HF)阶段,肝星状细胞自噬增强,从而导致疾病的不断发展。因此,研究清楚肝自噬在NAFLD不同时期的变化规律及具体信号通路,有利于对肝组织自噬水平进行调控把握,促使病变减轻。本文通过总结发现不同辨证论治的中药复方对NAFLD不同时期肝自噬有增强或抑制作用,这为NAFLD基础及临床研究提供新的思路。

HPLC法测定不同石竹中山奈酚三糖苷的含量

建立了石竹中山奈酚三糖苷含量的测定方法并检测石竹不同品种、不同花发育时期以及不同部位山奈酚三糖苷的成分含量。使用Agilent ZORBAX SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,具体色谱条件:A通道流动相:1.5%磷酸、40%乙腈、50%冰乙酸,B通道流动相:1.5%磷酸水溶液,A通道从10%~40%进行梯度洗脱。检测波长为267 nm,柱温为30℃,流速为0.8 mL/min,进样量为10μL。研究结果表明石竹16个品种中均含有山奈酚三糖苷成分,但是不同品种中含量有所差异,以‘云粉晕’样品中山奈酚三糖苷成分的含量最高,‘狂欢’含量最低。花中的含量与开放时期有关,随着花逐渐开放山奈酚三糖苷的含量呈下降趋势。不同部位的含量存在显著差异,其中花瓣的含量最高,茎的含量最低。因此,可以依据不同品种活性成分含量的差异,培育并栽培推广专用型的石竹品种,也可以根据目标化合物选择合适的收获时间以及采收植物的不同部位,为进一步开发利用石竹植物资源提供实验基础和依据。

膈下逐淤汤增强自噬改善非酒精性脂肪肝病大鼠的实验研究

目的 基于自噬研究膈下逐淤汤治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为正常组,模型组,膈下逐淤汤低剂量组,膈下逐淤汤中剂量组,膈下逐淤汤高剂量组,每组8只。除正常组普通饲料加自来水喂养外,其余各组均高糖高脂饲料加5%红糖水喂养。6周末造模成功后,膈下逐淤汤低、中、高剂量组分别给予7.2g/(kg·d)、14.4g/(kg·d)、28.8g/(kg·d)膈下逐淤汤灌胃治疗,持续6周。取材前称取大鼠体重,剖腹取出肝脏称取肝脏重量,获得肝指数;肝脏病理切片HE染色和油红O染色观察肝脏病理变化;全自动生化仪检测大鼠血清血脂及肝功能(TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALT、AST);免疫印迹实验(Western blot)检测肝组织自噬相关蛋白Beclin1、LC3B-II、P62蛋白表达;免疫组织化学法(INF)检测肝组织自噬相关蛋白ATG5、P62蛋白表达。结果 与正常组对比,模型组大鼠肝脏病理变化脂肪变性明显;肝指数、血清血脂(TG、TC、LDL-C)、肝功能(ALT、AST)、肝组织P62蛋白表达显著增高(P<0.05或P<0.01);血清HDL-C、肝组织Beclin1、LC3B-II、ATG5蛋白表达显著下降(P<0.05)。与模型组对比,膈下逐淤汤低、中、高剂量组大鼠肝脏病理变化脂肪变性明显减轻;肝指数、血清血脂(TG、TC、LDL-C)、肝功能(ALT、AST)、肝组织P62蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);血清HDL-C、肝组织Beclin1、LC3B-II、ATG5蛋白表达显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论 膈下逐淤汤可能通过增强肝组织自噬水平对非酒精性脂肪肝病起保护作用。