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粪产碱菌nifH启动子与LacZ的融合基因构建及其表达调控
被引量:
2
1
作者
张海予
林敏
+1 位作者
萧凤回
朱玉贤
《生物化学杂志》
CSCD
1997年第5期499-504,共6页
在pRK290载体上将粪产碱菌固氮酶基因nifH的启动子与报告基因LacZ相融合,获得表达载体pSK6,并转导到粪产碱菌A1501菌株中,探讨了铵和氧对该启动子的表达调控.结果表明,粪产碱菌nifH启动子仍受到铵和氧...
在pRK290载体上将粪产碱菌固氮酶基因nifH的启动子与报告基因LacZ相融合,获得表达载体pSK6,并转导到粪产碱菌A1501菌株中,探讨了铵和氧对该启动子的表达调控.结果表明,粪产碱菌nifH启动子仍受到铵和氧的调节.当铵浓度大于3mmol/L时,其表达水平大幅度下降,但铵浓度高达40mmol/L,仍有很低水平表达.而且,带有巴西固氮螺菌nifH∶lacZ的粪产碱菌接合子在高铵条件下(40mmol/L)也有低水平表达.此外,氧对粪产碱菌的nifH启动子有抑制作用,这在无铵条件下表现最为明显.
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关键词
粪产碱菌
nifH启动子
表达
基因调控
固氮菌
下载PDF
职称材料
粪产碱菌nif H,nif D和部分nif K的克隆、定位及序列分析
被引量:
1
2
作者
张海予
萧凤回
+4 位作者
朱新生
林敏
方宣钧
尤崇杓
萧凤回
《中国科学(C辑)》
CSCD
1997年第6期492-496,共5页
提取粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)总DNA,经限制性内切酶酶切和琼脂糖凝胶电泳,以含肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nif H和nif H-D基因的DNA片段为探针进行Southern杂交,筛选出与nif HDK同源的4.6kb片段,克隆到pBluesript SK^+...
提取粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)总DNA,经限制性内切酶酶切和琼脂糖凝胶电泳,以含肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nif H和nif H-D基因的DNA片段为探针进行Southern杂交,筛选出与nif HDK同源的4.6kb片段,克隆到pBluesript SK^+载体上,构建了重组质粒pBZl.经亚克隆、酶切、DNA序列分析后发现,粪产碱菌具有与其它固氮菌相似的结构特征,其nif HDK共用1个启动子,具有上游激活序列UAS,RNA聚合酶σ^(54)因子识别序列、1个A-T富集区和SD序列.nifH和nif D的阅读框架分别为888和1476bp,GC含量各为61.6%和60.2%.nifH-nif D和nif D-nif K的基因间隔区长度分别为101和105bp,各存在1个7bp的反向重复和1个SD序列.由阅读框架(ORF)推导的铁蛋白和钼铁蛋白α亚基的氨基酸序列与其它固氮菌相比有较高的同源性,高度保守的氨基酸残基所处的位置也很相似.同源性比较说明,粪产碱菌与棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)同源性最高.
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关键词
粪产碱菌
固氮酶基因
克隆
序列分析
原文传递
题名
粪产碱菌nifH启动子与LacZ的融合基因构建及其表达调控
被引量:
2
1
作者
张海予
林敏
萧凤回
朱玉贤
机构
北京
大学
蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
中国
农业
科学
院原子能利用研究所
云南农业大学农业科学和技术学院
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1997年第5期499-504,共6页
文摘
在pRK290载体上将粪产碱菌固氮酶基因nifH的启动子与报告基因LacZ相融合,获得表达载体pSK6,并转导到粪产碱菌A1501菌株中,探讨了铵和氧对该启动子的表达调控.结果表明,粪产碱菌nifH启动子仍受到铵和氧的调节.当铵浓度大于3mmol/L时,其表达水平大幅度下降,但铵浓度高达40mmol/L,仍有很低水平表达.而且,带有巴西固氮螺菌nifH∶lacZ的粪产碱菌接合子在高铵条件下(40mmol/L)也有低水平表达.此外,氧对粪产碱菌的nifH启动子有抑制作用,这在无铵条件下表现最为明显.
关键词
粪产碱菌
nifH启动子
表达
基因调控
固氮菌
分类号
Q939.113 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
粪产碱菌nif H,nif D和部分nif K的克隆、定位及序列分析
被引量:
1
2
作者
张海予
萧凤回
朱新生
林敏
方宣钧
尤崇杓
萧凤回
机构
北京
大学
蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
云南农业大学农业科学和技术学院
中国
农业
科学
院原子能利用研究所
出处
《中国科学(C辑)》
CSCD
1997年第6期492-496,共5页
基金
国家"八六三"计划生物领域资助项目
文摘
提取粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)总DNA,经限制性内切酶酶切和琼脂糖凝胶电泳,以含肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nif H和nif H-D基因的DNA片段为探针进行Southern杂交,筛选出与nif HDK同源的4.6kb片段,克隆到pBluesript SK^+载体上,构建了重组质粒pBZl.经亚克隆、酶切、DNA序列分析后发现,粪产碱菌具有与其它固氮菌相似的结构特征,其nif HDK共用1个启动子,具有上游激活序列UAS,RNA聚合酶σ^(54)因子识别序列、1个A-T富集区和SD序列.nifH和nif D的阅读框架分别为888和1476bp,GC含量各为61.6%和60.2%.nifH-nif D和nif D-nif K的基因间隔区长度分别为101和105bp,各存在1个7bp的反向重复和1个SD序列.由阅读框架(ORF)推导的铁蛋白和钼铁蛋白α亚基的氨基酸序列与其它固氮菌相比有较高的同源性,高度保守的氨基酸残基所处的位置也很相似.同源性比较说明,粪产碱菌与棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)同源性最高.
关键词
粪产碱菌
固氮酶基因
克隆
序列分析
分类号
Q939.103 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
粪产碱菌nifH启动子与LacZ的融合基因构建及其表达调控
张海予
林敏
萧凤回
朱玉贤
《生物化学杂志》
CSCD
1997
2
下载PDF
职称材料
2
粪产碱菌nif H,nif D和部分nif K的克隆、定位及序列分析
张海予
萧凤回
朱新生
林敏
方宣钧
尤崇杓
萧凤回
《中国科学(C辑)》
CSCD
1997
1
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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