基于网络药理学和实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制

通过网络药理学方法及生物学实验研究Jolkinolide B治疗结肠肿瘤的作用机制。通过TCMSP等数据库预测Jolkinolide B作用靶点,并通过靶点富集分析及分子对接预测其防治结肠肿瘤的作用机制,基于预测结果,体内生物学实验初步验证Jolkinolide B对移植瘤小鼠肿瘤的抑制作用,MTT法检测不同浓度的Jolkinolide B对HCT116细胞的增殖抑制活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验观察其对HCT116细胞迁移能力的影响。Western blot检测相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3和MMP12的表达。网络靶点分析结果显示Jolkinolide B与结肠癌(CRC)匹配后得到78个靶点,富集信号通路主要有IL-17信号通路、PD-1/PD-L1信号通路等。分子对接结果显示Jolkinolide B以氢键与STAT3、MAPK8、JUN核心蛋白结合,结合构象较稳定。体内实验结果表明,Jolkinolide B能有效抑制移植瘤小鼠肿瘤体积;细胞水平验证实验结果表明,Jolkinolide B能够有效地抑制结肠肿瘤细胞HCT116的增殖,促进细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;Western blot结果表明Jolkinolide B明显上调Bax/Bcl-2蛋白的表达,诱导了HCT116细胞的凋亡;同时,Jolkinolide B明显下调金属基质蛋白酶MMP3、MMP12的表达,抑制肿瘤细胞侵袭和转移。综上,Jolkinolide B可通过多靶点、多途径实现干预CRC的作用,其抗肿瘤活性可能与影响凋亡基因Bax及Bcl-2、金属基质蛋白酶MMP3、MMP12的表达有关。本研究为Jolkinolide B的临床用药和防治的作用机制研究提供了参考。

Lupalbigenin通过EGFR信号通路抑制非小细胞肺癌NCI-H1975细胞增殖

目的:探究Lupalbigenin是否通过表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)系中NCI-H1975细胞增殖。方法:主要采用了MTT法检测细胞毒性;用细胞形态学观察、细胞迁移实验、细胞克隆形成实验观察及检测细胞增殖能力;通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测Lupalbigenin对EGFR和其下游MAPK信号通路蛋白ERK及其磷酸化水平及其凋亡相关Cleaved PARP、P21、CDK4、CDK6、CyclinD1和CyclinA2以及抗凋亡蛋Bcl-2的影响。结果:结果显示Lupalbigenin在NCI-H1975细胞系上IC_(50)值为3.246μmol/L,并且呈浓度依赖性抑制细胞增殖;细胞形态学观察结果显示与空白组比较,10μmol/L Lupalbigenin实验组处理细胞24 h导致细胞核固缩、细胞质凝聚及细胞凋亡显著增加;迁移实验和集落形成实验结果显示,5μmol/L LG能够显著抑制细胞迁移和菌落形成能力;Western Blot检测结果表明,Lupalbigenin在较短时间内对EGFR/ERK蛋白磷酸化表达有显著的抑制作用。同时,Lupalbigenin处理后,Cleaved PARP和P21蛋白的表达水平显著上调,CDK4、CDK6、CyclinD1和CyclinA2以及Bcl-2蛋白的表达水平显著下降。结论:综上,Lupalbigenin可以调控EGFR及其下游相关蛋白的表达,从而抑制NCI-H1975细胞的增殖。

响应面法优化高酰基结冷胶—魔芋胶—羧甲基纤维素复配3D打印凝胶的配方

【目的】构建多元化的复配凝胶体系,以丰富3D打印原料的种类。【方法】采用单因素和响应面试验对高酰基结冷胶(high acyl gellan gum,HAGG)、魔芋胶(konjac gum,KG)和羧甲基纤维素(carboxymethyl cel-lulose,CMC)3种凝胶材料进行复配,通过测定黏度、色差和流动性,并结合感官评价等方法,优化凝胶体系的配方,系统分析凝胶体系的特性和3D打印效果。【结果】复配3D打印凝胶体系的最佳配方为:以50 g去离子水为基质,按质量分数添加HAGG 1.5%、KG 1.5%和CMC 0.4%,此配方条件下获得3D打印产品的色差值L^(*)、a^(*)和b^(*)分别为70.69、−131.00和352.31,黏度为56873.00 mPa·s,流动性为0.98 mm/min,感官评分为94.00,打印效果最好,获得的样品在室温下可长时间保持稳定的形状。【结论】HAGG-KG-CMC复配凝胶的各成分之间具有良好的协同效应。研究获得了一种可用于3D打印的凝胶体系配方,为3D打印食品原料的开发及食品凝胶类产品的新应用提供了理论依据。

普洱茶渥堆发酵过程中嗜热细菌的分离和鉴定

对普洱茶发酵全过程的茶样进行了pH检测,发现在渥堆过程中pH在前期有所下降达到4.5,中期基本趋于稳定,后期又有所回升。根据渥堆过程中高温和偏酸性的特征,采用传统培养与分子生物学方法相结合,对全过程的茶样在高温条件下进行细菌的分离、纯化及鉴定。结果发现有大量嗜热细菌的存在,包括凝结芽孢杆菌Bacil-lus coagulans,枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis,热嗜淀粉芽孢杆菌Bacillus ther-moamylovorans,Bacillus shackletonii,喜热噬油芽胞杆菌Geobacillus thermoleovorans,乳酸片球菌Pediococcus acidilacti-ci,植物乳杆菌Lactobacillus plantarum,等。这些嗜热细菌和嗜热真菌一起在普洱茶的发酵中起到了关键作用。

果蔬茶贮藏与加工过程品质调控研究现状及趋势

果蔬茶产业是我国现代农业产业体系和国民经济的重要组成部分,然而存在产后损失大,产品附加值低,综合利用水平不高等问题,制约了产业的高质量发展。实现果蔬茶贮藏加工过程的品质调控,是减损增值的关键。本文综述果蔬茶贮藏加工过程中颜色、香气、滋味、质构和营养品质调控研究现状,提出未来研究的关键科学问题为果蔬茶品质劣变的贮藏生物学基础,绿色贮藏加工技术对果蔬茶品质调控的基础理论,果蔬茶营养物质生物利用度提升和健康效应机理等3个方面,指出多维度解析品质调控机制,绿色加工技术集成创新,多学科交叉与智能化的新方向、新理念、新趋势。本文将为果蔬茶贮藏加工品质调控相关研究和产业高质量发展提供重要理论依据。

柠檬醛通过EGFR信号通路抑制NCI-H1975细胞增殖

该文探究柠檬醛是否通过表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)系中NCI-H1975细胞增殖。主要采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞毒性、流式细胞术检测细胞凋亡率、分子对接探究柠檬醛与EGFR蛋白结合位点,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测柠檬醛对EGFR及其下游细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)蛋白表达的影响。研究结果显示柠檬醛在NCI-H1975细胞系上IC50值为114.5μmol/L,且100μmol/L的柠檬醛已对NCIH1975细胞的增殖产生显著抑制作用(P<0.05),呈浓度依赖性抑制细胞增殖;流式结果显示柠檬醛可增大细胞凋亡率,促进细胞凋亡;Western Blot检测结果表明,柠檬醛在100μmol/L时对EGFR/ERK蛋白磷酸化表达有显著抑制作用(P<0.05)。综上,柠檬醛可抑制NCI-H1975细胞增殖并能促进凋亡,通过抑制EGFR信号通路传导进而发挥作用。

天然化合物基于Notch通路抑制肿瘤的研究进展

恶性肿瘤是威胁人类健康的全球疾病负担,我国恶性肿瘤新发病例和新发癌症死亡病例均位居全球首位,因此抗肿瘤药物的开发备受关注。Notch信号通路广泛存在于人体各种器官,是影响肿瘤发生与发展的关键信号传导途径之一,关系到肿瘤细胞的多种受体与细胞功能。该信号通路机制复杂,出现异常的激活或阻断将会导致机体紊乱,引起恶性肿瘤的发生。我国植物种类丰富多样,其中不乏食品药品资源,来源植物的天然化合物由于其对于癌症治疗具有积极影响,更是成为近年来抗肿瘤研究及药物开发的热点。已有大量研究表明,天然化合物能够通过靶向Notch通路对多种肿瘤发挥抑制作用。本文就Notch通路与肿瘤的关系、天然化合物基于Notch信号对抗肿瘤的作用机制研究现状进行归纳综述,并对其未来的研究方向进行了展望,旨在为靶向Notch的抗肿瘤药物开发以及植物资源的利用提供理论参考与科学思路。

千金藤碱对CIA模型小鼠安全性评价

为评价千金藤碱对胶原诱导关节炎(CIA)模型小鼠体质量、肝脏与肾脏的影响,造模后对小鼠分别给药1.5 mg/kg阿达木单抗(阳性组)或2 mg/kg千金藤碱(给药组),监测体质量、肝脏质量及肾脏质量,H&E染色观察组织形态。实验结果表明,2 mg/kg的千金藤碱对CIA模型小鼠体质量无显著性影响,且对小鼠肝脏及肾脏无毒性。2 mg/kg千金藤碱对CIA小鼠体质量未产生影响,且未引起CIA小鼠肝脏、肾脏的病理变化,属于安全剂量。

白藜芦醇软糖研制及工艺配方优化

基于结冷胶构建富含功能性食品原料白藜芦醇的软糖,旨在研究开发基于生物多糖凝胶体系的新型功能性软糖。利用单因素试验和响应面法优化制作白藜芦醇软糖的最佳工艺配方,并根据国标的检测方法对成品白藜芦醇软糖的水分、还原糖、微生物进行检测。结果显示:在木糖醇添加量为30%、葡萄糖浆添加量为12%、高酰基结冷胶添加量为1.0%、柠檬酸添加量为0.4%、氯化钙添加量为0.25%、柠檬酸钠添加量为0.2%、白藜芦醇添加量为0.09%条件下,获得到的软糖色泽均匀、风味独特、弹性和咀嚼性较好,感官评分为(88.90±4.16);理化和微生物指标均符合国家标准。本研究获得的白藜芦醇软糖最优配方是木糖醇添加量30%,结冷胶添加量1.0%,白藜芦醇添加量为0.09%。本研究研制出以生物多糖和白藜芦醇为主要原料的新型功能性软糖,可丰富功能性软糖原料和种类,为日后的工业化生产提供新的思路和技术支持。

中小叶种茶酯型儿茶素含量测定及亚细胞定位

为了明确酯型儿茶素在中小叶种茶叶中的亚细胞空间定位,以十里香、桂绿1号、浙农113、福鼎大白茶、浙农139共5种中小叶种茶样为试验材料,采用高效液相色谱法对5种茶样中的酯型儿茶素含量进行检测,采用中性红染色法对茶样细胞中液泡进行定位,通过免疫组织化学法对茶样中酯型儿茶素进行亚细胞定位。结果表明,5种中小叶种茶均含有不同含量的酯型儿茶素,其中含量最高的为十里香茶;在中性红染色情况下,十里香茶样中液泡呈圆形或椭圆形;免疫组织化学法染色情况下,5种中小叶种茶酯型儿茶素在亚细胞水平上均定位于液泡中。

4-羟基肉桂酰胺对糖尿病小鼠的降血糖效应及机制研究

探讨4-羟基肉桂酰胺(4-Hy)作为胰岛素受体增敏剂在糖尿病动物模型上的降糖作用。采用STZ诱导胰岛素缺陷型小鼠模型,对小鼠随机分组:对照组、胰岛素治疗组(Insulin,1 U/kg)、不同剂量4-羟基肉桂酰胺治疗组(2.5、5 mg/kg)、联合给药组(4-Hy2.5 mg/kg+Insulin组、4-Hy5 mg/kg+Insulin组)。对照组小鼠等体积DMSO给药;测定小鼠血糖浓度和血清中胰岛素、胰高血糖素、C肽水平,组织中相关信号通路的表达,基因mRNA的表达水平。结果表明:4-Hy与胰岛素联用能显著延长胰岛素的降血糖效果(p<0.001);降低了小鼠血清中的平均C肽水平和胰高血糖素水平;在小鼠组织中,4-Hy与胰岛素联用组的p-IR1150/1151及p-AKT(Ser473)表达显著增强(p<0.01);在肝脏组织中,4-Hy与胰岛素联用组的糖异生水平显著降低(p<0.001),糖原合成及糖原分解水平显著提高(p<0.01)。说明4-羟基肉桂酰胺作为胰岛素受体的增敏剂可以显著增强胰岛素的降血糖效应。

基于魔芋胶的食品3D打印凝胶体系的构建

目的:目前的食品3D打印技术可用材料较少,导致3D打印技术在食品行业的发展较为滞后,因此本实验拟利用魔芋淀粉成胶特点,开发出一种可用于食品3D打印的凝胶体系。方法:运用硬度测试、黏度分析、流动性测试、色差分析等技术手段,探究魔芋胶、结冷胶和茶褐素的复配凝胶体系中三者不同的添加量对凝胶体系3D打印性质的影响。结果:三种原料对打印效果的影响大小依次为魔芋胶>茶褐素>结冷胶,最佳工艺配方为魔芋胶、结冷胶和茶褐素的质量比为0.67∶0.70∶0.03,在此条件下,测得魔芋胶3D打印产品的感官评分为85分,3D打印成品硬度、黏度、流动性、颜色都较好。结论:本研究为食品领域的3D打印技术开发出新型打印材料,为食品创新和个性化营养食品定制提供新思路。

普洱茶防治代谢综合征的研究进展

代谢综合征在现代社会中日益常见,且对公众健康危害极大。代谢综合征的本质是胰岛素抵抗,经过加重恶化过程逐渐诱发出2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病、冠心病、脑梗塞等严重并发症。肝脏、脂肪、肌肉作为胰岛素的作用靶器官,构成了一个精密的调节系统,调节着机体的糖脂代谢,使机体达到稳态。当长期过量摄入营养后,这些脏器出现功能失调,导致相应的病理生理改变,诸如脂肪肝、高血糖、高血脂等。普洱茶作为日常饮品,在亚洲国家及地区广泛流行,在防治糖脂代谢紊乱方面具有独特效果.本研究主要介绍普洱茶在防治代谢综合征方面的具体作用机制,包括对肝脏、脂肪、肌肉等胰岛素靶器官的作用及分子机制,以期为普洱茶的普及及针对其功效的研究提供有益的思路.

普洱茶区空气微生物的群落结构及生态分布

为揭示普洱茶发酵微生物来源及普洱茶生长环境中微生物的存在及作用,利用安德森空气微生物采样器对云南普洱茶树良种场的3个茶山的空气微生物进行了采集,在24℃和45℃两个温度下培养,并做了分子生物学鉴定。实验结果确定了该地区普洱茶生长环境中空气微生物的种类及各种类所占比例,为探究普洱茶发酵微生物的来源提供一定的数据支持。

云南小粒咖啡湿法发酵过程中细菌分离与鉴定

咖啡发酵过程中微生物种类、数量的变化及它们的代谢产物如酸等引起的发酵体系变化将直接影响着咖啡的最终品质。本文首次对云南小粒咖啡湿法发酵体系中的pH值和8种有机酸的含量变化进行了测定,并分离和鉴定了发酵过程中的细菌种类。结果发现在整个发酵过程中,pH值变化整体呈下降趋势;本文所测pH值变化与利用HPLC法检测的有机酸草酸、乙酸、乳酸含量变化规律相吻合,而苹果酸、柠檬酸、琥珀酸和丙酸基本上保持不变,其中丙酸含量最低。在20℃下,结合发酵过程中的pH值,采用传统的微生物培养法,对整个发酵过程的细菌进行了分离、纯化和鉴定。结果发现存在大量的产果胶酶的细菌,包括产气肠杆菌Enterobacter aerogenes、肠膜明串珠菌Leuconostoc mesenteroides、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus、巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium,冰核活性细菌Erwinia herbicola、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae等,并对分离、鉴定出来的细菌在发酵中所起的作用进行了剖析。

普洱茶渥堆发酵中活性成分测定及其相关性分析

利用高效液相色谱法分别测定表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、茶氨酸、槲皮素、黄嘌呤和次黄嘌呤在普洱茶发酵过程中的含量变化,发现在发酵过程中,表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、茶氨酸和槲皮素的含量下降,黄嘌呤和次黄嘌呤的含量上升。对这6种成分进行了相关性分析,发现多酚类与氨基酸类呈极显著正相关。

基于网络药理学分析铁皮石斛花总黄酮抑制结肠癌作用机制及体外实验验证

目的运用网络药理学和体外生物学实验对铁皮石斛花总黄酮治疗结肠癌的活性成分、潜在作用靶点和信号通路进行研究,探索其治疗结肠癌的可能作用机制。方法利用LC-MS/MS对铁皮石斛花黄酮类代谢物进行成分分析。通过TCMSP筛选出铁皮石斛总黄酮的活性成分及靶点基因,GeneCards数据库及DisGeNET数据库筛选出结肠癌的疾病靶点基因,构建“药物-有效成分-靶基因-疾病”调控网络图,STRING数据库构建蛋白互作网络图(PPI),对关键靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。采用MTT法检测铁皮石斛花总黄酮对HCT116细胞的增殖抑制活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验观察铁皮石斛花总黄酮对HCT116细胞迁移能力的影响;Western blot检测相关凋亡蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved-caspase-3)和基质蛋白(MMP-12、MMP-3)的表达。结果代谢组分析获得52个黄酮类化合物,经过筛选得到27个活性成分,通过相关数据库平台预测得到作用靶点178个,PPI网络核心蛋白为丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)、肿瘤蛋白P53(TP53)、转录因子AP-1(JUN)、肿瘤坏死因子(TNF)、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)等;GO富集分析显示铁皮石斛花总黄酮会影响信号转导、细胞凋亡和增殖调控等;KEGG通路富集分析显示铁皮石斛花总黄酮在细胞增殖、凋亡、PI3K-Akt及肿瘤等信号通路中发挥作用。实验结果表明,铁皮石斛花总黄酮能抑制HCT116细胞的增殖,促进细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;还能上调Bax/Bcl-2、caspase-3、cleaved-caspase-3蛋白的表达,诱导细胞凋亡。结论铁皮石斛花总黄酮可通过多靶点、多途径发挥抗结肠癌的作用,其作用机制可能与影响凋亡基因Bax及Bcl-2的表达有关。

绿原酸对UVB损伤人永生化表皮角质细胞的保护作用

为研究绿原酸(chlorogenic acid,CGA)对中波紫外线(UVB)损伤人永生化表皮角质细胞(HaCaT)的保护作用及机制,通过MTT法建立细胞紫外损伤(光老化)模型及绿原酸的处理方式,采用酶标仪检测绿原酸的紫外吸收,流式细胞术检测细胞的凋亡水平,ABTS法检测绿原酸的自由基清除能力。结果表明:UVB辐射剂量为21.6 mJ/cm^(2),绿原酸浓度为100.000、150.000μmol/L,预处理1 h后细胞培养12 h,绿原酸在UVB波段(280~320 nm)内有较强的吸收;100.000μmol/L和150.000μmol/L绿原酸均能显著降低UVB引起的细胞凋亡;150.000μmol/L绿原酸能有效增加UVB处理细胞的ABTS+自由基清除能力,达到了53%。由此可知,绿原酸在UVB诱导的HaCaT光老化模型上,具有很强的抗皮肤光老化活性,其机制可能与绿原酸的紫外吸收以及抗氧化能力相关,为富含绿原酸的食品资源开发利用提供科学依据。

天然产物通过调节自噬功能改善动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发病机理复杂,是诸多心血管疾病的病理基础。自噬是一种细胞自身的分解代谢机制,细胞自噬功能障碍与许多疾病的发生和发展密切相关。天然产物是自然界中动植物所含化学成分的统称,越来越多的研究揭示了天然产物在治疗人类疾病中的巨大潜力,本文就近年来天然产物基于细胞自噬改善AS的研究进行综述。

高效液相色谱法测定与比较5种不同提取方法提取的茶叶咖啡因

建立高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定5种不同提取方法提取的茶叶咖啡因,比较分析不同提取方法对咖啡因提取物纯度和含量的影响。测定咖啡因的含量在浓度范围10μg/mL~120μg/mL呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 9,5种咖啡因样品在3个浓度添加水平下的加标回收率为92.47%~109.07%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.11%~2.77%。该方法准确度和精密度较高,能准确分析不同咖啡因提取物之间的差异,适用于咖啡因提取物的分析与比较。5种提取方法提取的咖啡因含量和纯度有一定差异,丙酮水溶液提取-氯仿萃取法的提取效果最佳。