不加权组平均法在云南山地小型真菌生物多样性研究中的应用

采用香农指数(Shannon-VienerIndex)分别对中国云南省热带及亚热带七个山地系统分布的34属小型真菌的生态位宽度和48个样点的生物多样性进行了计算、并用不加权组平均法对七个山地系统的48个样点及其中分布的34属小型真菌之间的关系进行了聚类分析。结果表明不加权组平均法适用于生境的生物多样性和小型真菌的生态位分析,并能定量地反映它们之间的生态学关系。

云南省烟草根结线虫发病土壤生态因子分析

采集云南省主要植烟区24个县共106个烟草根结线虫发病土样,每个县以1个土样为代表,分别测定其真菌、细菌和放线菌的总量及类群数。结果看出,不同土样中真菌、放线菌总量相差达到2个数量级,细菌相差达到3个数量级,在不同土样的各类微生物种类组成上真菌为3～10类,细菌为2～13类,放线菌为4～10类。对这些样品土壤pH、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、Ca、Mg、Al等主要营养元素的测定结果表明,不同样品pH在5.03～8.64之间,有机质含量在1.50％～7.01％之间,碱解氮在63.8～314.3mg/kg之间,有效磷在11.2～221.2mg/kg之间,速效钾在74.6～1313.4mg/kg之间,Ca离子含量在0.20％～10.54％之间,Mg离子含量在0.08％～4.56％之间,Al离子含量在1.52％～12.79％之间。研究结果表明,云南省烟草根结线虫发病土壤的各种生态因子存在明显的多样性和复杂性。

产生木聚糖酶的兼性厌氧菌的生物学特性与酶的酶学特征

从沼气发酵体系中分离的产木聚糖酶菌株,经16SrDNA测序分析,生理生化鉴定生物学特性表明:YNUCC0237(S6-1)菌株是肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),B5-1菌株是摩氏摩根菌(Morganella morganii),B5-3菌株为Enterococcussp.,B1-1h和B1-2h菌株均为Pseudomonassp.。前3株菌是兼性厌氧菌,后2株不能在固体培养基表面好氧生长。酶产生主要在厌氧条件下,摇瓶条件下不产或产酶相对很低。S6-1菌株产酶活力可达40IU,酶与底物反应的最适pH值6.5,温度50℃。S6-1菌株具有广泛全面的食性,说明该属克雷伯氏菌具有对基质利用的多样性和代谢多功能性,是生物质转化利用中具有较大潜力的一类微生物资源。

淡紫拟青霉在烤烟根际定殖能力分析

通过盆栽试验,确定了烟草根结线虫生防菌淡紫拟青霉IPC菌株在烤烟K326和云85根际的生长和定殖情况及其对根际微生物的影响。结果表明,施入菌剂2周和4周时淡紫拟青霉IPC菌株能在烤烟K326外根际、根表分离到,根内则不能分离到;而不同时期在烤烟云85的外根际、根表和内根际都能分离到。在6周时2种烤烟的外根际、根表和根内的分离数达到最大,8周时分离数减少。每个时期在2种烟草根际分离到IPC菌株的菌落繁殖单位(CFU)都是外根际最大,其次是根表,内根际最小。IPC菌剂处理后烤烟根际细菌、真菌和放线菌的数量在2周比对照减少,4周时比对照增多,6周和8周时与对照接近。表明生防菌淡紫拟青霉IPC菌株可以在烟草外根际、根表定殖和生长,而在根内则较困难,菌剂施用2周时对根际土壤微生物具有一定的抑制作用,4周后抑制作用减弱。

碳素基体固相微萃取气相色谱、气质联用分析食用醋中的有机挥发物

Solid phase micro-extract (SPME) using modified pencil lead as adsorbent is applied to the analysis of the volatileorganic compounds in vinegar.and the optimum conditions for sample preparation are discussed.

捕食线虫真菌rDNA ITS区间RFLPs分析

利用PCR-RFLP方法对捕食线虫真菌进行了系统发育研究。以ITS1和ITS4为引物对3属14种16个菌株的核糖体DNA转录间区（ITS）进行了PCR扩增，4种内切酶（AluI、HaeIII、HpaII、TaqI）酶切，结果表明不同属的ITS区长度没有明显差异，其长度范围在585～695之间。酶切图谱种间差别明显，种内基本一致，同属菌株图谱没有特异性，暗示传统的分属可能过细，某些属的成立还有待商榷，PCR-RFLP对确定疑难种的地位有重要意义，但不适用于种下水平的系统学研究。

烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗药性风险

为了评估烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗药性风险,以对甲霜灵敏感和高抗的烟草黑胫病菌240和191为出发菌株,进行了抗性突变频率测定、抗性诱变、抗性水平测定、遗传稳定性、生长速率、致病性测定和适合度等研究。结果表明,烟草黑胫病菌对甲霜灵敏感的240菌株在含10mg/L甲霜灵的CA平板上的抗性突变频率为7.0×10-5。分别以药剂诱变和紫外诱变获得了抗甲霜灵菌株240-YY和240-ZY。对甲霜灵敏感性不同的烟草黑胫病菌适合度测定结果表明,抗性菌株在潜伏期、侵染率、病情指数和病斑面积等方面均具有较高的适合度水平。研究结果显示,烟草黑胫病菌对甲霜灵具有较大的抗药性风险。

食线虫菌物胞外蛋白酶基因工程研究进展

在病原线虫的生物防治中 ,利用食线虫菌物在侵染过程中分泌的胞外蛋白酶 (重要毒力因子 )固定线虫并降解线虫体壁显示出巨大的潜力。综述了近年来食线虫菌物胞外蛋白酶的研究概况、目前开展蛋白酶基因工程研究存在的问题及解决策略 ;对真菌胞外蛋白酶应用于线虫生防和生物医药领域中的前景也进行了评述。

耐碱芽孢杆菌YNUCCTCRQ1木聚糖酶及其产生菌的系统发育分析

从云南腾冲火山热泉中筛选到一株产木聚糖酶芽孢杆菌YNUCCTCRQ1。其木聚糖酶的最适反应温度为80℃,最适pH值7.5。该木聚糖酶在pH值2～12、温度73℃以下比较稳定。Ca2+、K+、Mg2+、ED TA对该木聚糖酶有较强的促进作用,Co2+、Ni2+、Cu2+、Mn2+和Hg2+对该酶有较强的抑制作用。对该菌株16SrDNA的1471bp片段的序列分析结果表明,芽孢杆菌YNUCCTCRQ1与GeneBank中的嗜碱芽孢杆菌(Bacillushalodurans)C-125和DSM497T最为接近。

REMI及其相关技术在丝状真菌基因克隆中的应用

综述了一种用于转化丝状真菌、标记目的基因的新技术———限制酶介导的整合 (REMI)。着重介绍REMI及其原理、优缺点、质粒的构建特点。以应用实例为例阐述了REMI及其相关技术的操作步骤。

沼气料液对木聚糖酶活性的影响

在木聚糖酶反应体系中添加不同比例的沼气料液,研究了沼气料液对绿色木霉TrichodermavirideYNUCC0183、疏棉状嗜热丝孢菌ThermomyceslanuginosusYNUCC4154、放线菌Streptomycessp YNUCC0233和5株兼性厌氧细菌来源的木聚糖酶活性的影响。结果表明,沼气料液对不同来源的木聚糖酶均有抑制作用,绿色木霉TrichodermavirideYNUCC0183和兼性厌氧细菌B5 3来源的木聚糖酶所能耐受的料液比率最高,达37 5%(V/V),适合用于沼气原料的预处理提高沼气得率。

立枯丝核菌重寄生真菌的筛选

从捕食线虫的真菌中筛选到立枯丝核菌 (Rhizoctonia solani)的 8种重寄生真菌 ,即粉红粘帚霉(Gliocladium roseum) ,少孢节丛孢 (Arthrobotrys oligospora) ,弯孢节丛孢 (A.musiformis) ,贵州节丛孢 (A.guizhouense) ,圆锥节丛孢 (A.conoides) ,指状节丛孢 (A.dactyloides) ,多孢节丛孢 (A.superba) ,蠕虫状节丛孢 (A. vermicola)。平板测试表明这 8种重寄生菌能不同程度地影响立枯丝核菌的生长 ,减少菌核的形成数量。其中粉红粘帚霉的寄生力最强 ,可使菌核数减少 5 8.6 7% ,交叉菌落内几乎所有的立枯丝核菌菌丝被寄生。营养条件对重寄生有明显的影响 ,在低营养培养基 CMA和WA上寄生程度严重 ,在营养相对较高的 PDA和 CSA上寄生程度较轻。太高的 C∶N(30 0∶ 1)和太低的 C∶ N(1∶ 1,10∶ 1)都不利于重寄生 ,只有适当的 C∶ N(5 0∶ 1,10 0∶ 1)

日本亮耳菌──一种新的杀线虫真菌

从贵州省宽阔水自然保护区采到的日本亮耳菌Lampteromyces japonicus (Kawam.)Sing.这一中国新记录种，其菌丝体及其丙酮粗提物对线虫有毒杀作用，是一类有应用前景的食线虫真菌资源。

食线虫真菌28S rDNA PCR扩增片段的RFLPs分析

本文对16个食线虫真菌(节丛孢属、隔指孢属和单顶孢属)菌株和3个其他相关丝孢菌(顶辐孢属和单端孢属)菌株的28S rDNA 片段进行了扩增, 并用限制性内切酶Sau3A I, Msp I, Rsa I and Hae III对PCR产物进行了消化。采用UPGMA法对 PCR 产物的限制性图谱特征进行了聚类分析。结果表明,捕食性真菌的聚类群与捕食器官类型相对应,顶辐孢属和单端孢属与捕食性真菌的遗传距离较远。该结果与rDNA 的ITS区间、5.8S和18S的序列分析结果一致。

无柄新乌檀中的三萜(英文)

采用活性跟踪的方法对无柄新乌檀(Neonauclea sessilifolia (Roxb.)Merr.)枝干的乙醇提取物进行结核杆菌活性检测。利用硅胶柱层析、Sephadex-LH 20和反相硅胶RP18柱层析,从具有活性的乙酸乙酯部分分得9个化合物,利用一维、二维核磁共振技术(HMQC,HMBC)并结合质谱与红外光谱,将它们鉴定为3β,15α,21β,23-tetrahydroxy-12-oleanen-28-oic acid(1)、3β,6α,21β,23-tetrahydroxy-12-oleanen-28-oic acid(2)、单皮酚(3)、3,4-二羟基苯甲酸(4)、东莨菪内酯(5)、蒽醌大黄酚(6)、5,7-二羟基-2-甲基吡喃酮(7)、β-谷甾醇(8)和^(5,22)Δ-豆甾醇-β-D-葡萄糖苷(9)。其中化合物1和2是两个新化合物。体外抗结核杆菌试验表明,化合物6对结核杆菌(Mycobacterium tuber-culosis(Zopf)Lehmann et Neumann)具有一定的抑制效果,用量在25μg时出现抑菌圈;化合物2与4具有微弱的抑制活性。

西藏的捕食线虫真菌(英文)

从采自西藏海拔在３６４０～４３００米地区的１２５份土样中共检测到食线虫真菌４个属，共２８种。其中纤细梗虫霉Ｓｔｙｌｏｐａｇｅ ａｒａｅａ ，滑丝梗虫霉Ｓｔｙｌｏｐｏｇｅ ｌｅｉｏｈｙｐｈａ和印度单顶孢Ｍｏｎａｃｒｏｓｐｏｒｉｕｍ ｉｎｄｉｃｕｍ为中国新记录。

隔指孢属rDNA ITS区间限制性片断长度多态性(RFLP)分析

利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对捕食线虫真菌隔指孢属进行了系统发育研究。以 ＩＴＳ１和ＩＴＳ４为引物对该属８种８个菌株的核糖体ＤＮＡ转录间区（ＩＴＳ）进行了 ＰＣＲ扩增， ４种内切酶（ ＡｌｕⅠ、 Ｈａｅ Ⅲ、 Ｈｐａ Ⅱ、 ＴａｑⅠ）酶切。结果表明该属的 ＩＴＳ区长度没有明显差异，其长度范围在５６４～５９５之间，酶切图谱能体现不同种 间的多态性。根据４种内切酶酶切结果，利用ＵＰＧＭＡ法构建的隔指孢属分子系 统树，基本体现了属内不同种间的亲缘关系，从分子水平证明了隔指孢属形态分类 上的合理性。

根结线虫生防菌ZK7和IPC在烟草根部定殖的显微观察

【目的】研究根结线虫生防菌ZK7和IPC菌株在烟草根表及皮层的定殖情况。【方法】利用光学显微镜和扫描电子显微镜观察了生防菌ZK7和IPC菌株在烟草根表和根内的定殖部位、定殖方式、生长和繁殖等。【结果】生防菌ZK7和IPC菌株能以菌丝方式稳定定殖于烟草根表的根冠区、伸长区、根毛区、成熟区等不同部位,而在根内的定殖仅局限于根表皮层较深的细胞组织,不能侵入烟草根部的韧皮部和木质部组织。【结论】生防菌ZK7和IPC菌株与烟草并非病原物与寄主的关系,而更类似于菌根菌或内生菌与植物间的共生关系。

琼斯氏菌(Jonesia sp.)YNUCC0043耐碱木聚糖酶的特性

从造纸黑液中筛选到一株产木聚糖酶琼斯氏菌YNUCC0043。在含3％玉米芯和0．5％牛肉膏的碱性无机盐培养基中，发酵液木聚糖酶活力达48．50U／ml。其木聚糖酶的最适反应温度为60℃，最适pH值8.0。该木聚糖酶在pH值6-11，温度60℃以下比较稳定。对该菌株16SrDNA的1456bp片段的序列分析结果表明，琼斯氏菌YNUCC0043与青海琼斯氏菌DSM15701和琼斯氏菌SC06的系统发育关系最近。