地西泮通过let-7a-5p/MYD88轴抑制LPS诱导的细胞焦亡和炎症从而缓解小鼠肺纤维化

目的探讨地西泮(Dia)如何通过介导let-7a-5p与MYD88之间的靶向调控作用,来减轻由脂多糖(LPS)诱导的细胞焦亡和炎症反应,从而缓解肺纤维化的进程。方法MRC-5细胞分为正常对照组(NC)、LPS组、LPS+Dia组,LPS+Dia+let-7a-5p mimic组、LPS+Dia+let-7a-5p mimic+pc-DNA-MYD88组。RT-qPCR检测let-7a-5p和MYD88的表达。ELISA检测炎症因子的表达,Western blotting检测纤维化和焦亡相关蛋白的表达。C57BL/6小鼠随机分为NC组、LPS组、LPS+Dia、LPS+Dia+let-7a-5p mimic组、LPS+Dia+ST2825(MYD88抑制剂)组、LPS+Dia+let-7a-5p mimic+pc-DNA-MYD88组。Masson染色观察小鼠肺纤维化,免疫荧光检测α-SMA的表达。结果与NC组比较,LPS组let-7a-5p的表达下调(P<0.01),MYD88的表达上调(P<0.01)。炎症相关因子IL-4、IL-6、TGF-β和TNF-α的浓度均升高(P<0.001),此外,纤维化相关蛋白Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA和细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD-N的表达量也升高(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+Dia组有效抑制了炎症相关因子、纤维化相关蛋白、细胞焦亡相关蛋白的表达。动物实验中,与LPS组相比,LPS+Dia组小鼠肺组织纤维化程度降低,α-SMA相对荧光密度降低(P<0.05)。此外,与LPS+Dia组相比,LPS+Dia+let-7a-5p mimic组或LPS+Dia+ST2825的处理进一步促进了Dia的作用(P<0.05)。而过表达MYD88又削弱了let-7a-5p mimic对Dia的作用(P<0.05)。结论Dia可以通过上调let-7a-5p的表达负调控MYD88抑制LPS诱导的细胞焦亡和炎症反应从而缓解肺纤维化。