耐高温中性纤维素酶高产菌的筛选及发酵条件研究

从云南大马尖山土壤中筛选到一株热稳定性能好的纤维素酶高产细菌菌株D-9,并对其发酵条件进行研究,该菌株发酵72h在pH6.0、70℃条件下发酵液酶活为24.23IU/mL,酶学特性非常适合于纺织行业。通过分子生物学及其生理生化鉴定,该菌株为类芽孢杆菌(Paenibacillus elgii)。此外,分别对该菌发酵培养基的初始pH、碳源、氮源、装液量、接种量及产酶进程进行了分析。

α-葡萄糖苷酶高产菌株HB-9-5的选育及产酶条件的优化

从土壤中筛选出一株高产α-葡萄糖苷酶的细菌HB-09-5,对其粗酶液进行研究发现,最适反应pH为6.0,最适反应温度为50℃,pH在4.0-7.0,温度在55℃以下保持酶活力相对稳定。通过对产酶条件进行优化,单因素试验表明,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为牛肉膏,Mg2+和Ca2+对产酶有促进作用。优化发酵条件后,菌株HB-09-5产酶水平可达到20.95U/mL,比出发菌酶活提高了2.3倍。

Penicillium sp.JF09酸性果胶酶的发酵条件、酶学性质及其在苹果汁澄清中的应用潜力研究

对一株产酸性果胶酶的菌株Penicillium sp.JF09的发酵条件、酶学特性及其在苹果汁澄清中的应用潜力进行研究。该菌株发酵产果胶酶的培养基优化后,碳源为1.0%的柚子皮粉,氮源为0.5%的蛋白胨,起始pH值为5.5,发酵时间75~147h,产果胶酶酶活力为16.5U/mL,比活力为199.5U/mg。该果胶酶最适反应温度为60℃,在10~70℃范围内具有活性;最适反应pH值为5.0,酶在pH3.0~5.5范围内活性保持83%以上并在pH3.0~8.0范围内保持稳定;10mmol/L的Hg2＋、Pb2＋、Cu2＋、Fe2＋、Ag＋及SDS对该酶有不同程度的抑制作用,10mmol/L的Mg2＋、Mn2＋对该酶有略微的促进作用,不同浓度的Ca2＋对酶活力有较大影响（最适浓度为0.2mmol/L）。在低温和高温下（10~60℃）添加JF09果胶酶对鲜榨苹果汁都有显著澄清作用,反应1h后澄清率可达88.8%。

鞘氨醇单胞菌属菊粉酶基因lev的克隆、表达及酶学性质的研究

基于454高通量测序细菌JB13全基因组,获得一个编码菊粉酶的基因lev,该基因全长为1518bp,编码505个氨基酸组成的多肽,成熟蛋白的理论分子量为55.70ku。将基因lev克隆到表达载体pET28a(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物具有菊粉酶活性,并初步研究了该酶的酶学性质。结果表明:酶作用的最适pH为5.5,最适温度为50℃,该研究为鞘氨醇单胞菌属来源菊粉酶的首次报道。