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猪源戊型肝炎病毒ORF2蛋白生物信息学分析及真核表达研究
被引量:
1
1
作者
卓娜
朱忠武
+7 位作者
李静
胡世享
王建昌
林华
陈朝林
韩佃刚
艾军
陈培富
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期1959-1970,共12页
【目的】分析猪源戊型肝炎病毒(Swine hepatitis E virus,sHEV)4型ORF2蛋白的结构和功能,筛选具有保护性抗原的基因片段并表达蛋白,为研究其作为潜在保护性抗原提供候选蛋白。【方法】对sHEV 4型ORF2蛋白进行生物信息学分析,选取具有潜...
【目的】分析猪源戊型肝炎病毒(Swine hepatitis E virus,sHEV)4型ORF2蛋白的结构和功能,筛选具有保护性抗原的基因片段并表达蛋白,为研究其作为潜在保护性抗原提供候选蛋白。【方法】对sHEV 4型ORF2蛋白进行生物信息学分析,选取具有潜在保护性抗原蛋白的基因片段ORF 2(128/140),通过PCR扩增、酶切后克隆至昆虫细胞表达载体,转染sf9细胞,通过Western blotting鉴定分析表达蛋白p128/p140。【结果】生物信息学分析显示,sHEV 4型ORF2蛋白存在2个稳定蛋白:p128和p140,分别含有496和476个氨基酸,二者皆为稳定蛋白,无跨膜区,蛋白二级结构主要以无规则卷曲为主。p128蛋白有11个T细胞表位、21个B细胞表位;p140蛋白有14个T细胞表位、18个B细胞表位。成功构建ORF 2(128)、ORF 2(140)2个基因的昆虫细胞表达载体,转染sf9细胞后经Western blotting检测发现,表达蛋白可被His标签单抗、sHEV抗体阳性血清识别。【结论】试验发现2个sHEV具有潜在保护性抗原的p128和p140蛋白,均可在sf9细胞中表达,且具有免疫活性。结果为进一步研究sHEV ORF2蛋白的功能和新型疫苗的研发提供了材料。
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关键词
猪戊型肝炎病毒(sHEV)
ORF2蛋白
生物信息学分析
昆虫细胞
表达
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职称材料
题名
猪源戊型肝炎病毒ORF2蛋白生物信息学分析及真核表达研究
被引量:
1
1
作者
卓娜
朱忠武
李静
胡世享
王建昌
林华
陈朝林
韩佃刚
艾军
陈培富
机构
云南
农业大学
云南昆明海关技术中心
湖南长沙
海关
技术
中心
河北石家庄
海关
技术
中心
四川成都
海关
技术
中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期1959-1970,共12页
基金
国家重点研发计划课题(2022YFC2601605)
云南省技术创新人才(2016HB018)
云南省院士工作站。
文摘
【目的】分析猪源戊型肝炎病毒(Swine hepatitis E virus,sHEV)4型ORF2蛋白的结构和功能,筛选具有保护性抗原的基因片段并表达蛋白,为研究其作为潜在保护性抗原提供候选蛋白。【方法】对sHEV 4型ORF2蛋白进行生物信息学分析,选取具有潜在保护性抗原蛋白的基因片段ORF 2(128/140),通过PCR扩增、酶切后克隆至昆虫细胞表达载体,转染sf9细胞,通过Western blotting鉴定分析表达蛋白p128/p140。【结果】生物信息学分析显示,sHEV 4型ORF2蛋白存在2个稳定蛋白:p128和p140,分别含有496和476个氨基酸,二者皆为稳定蛋白,无跨膜区,蛋白二级结构主要以无规则卷曲为主。p128蛋白有11个T细胞表位、21个B细胞表位;p140蛋白有14个T细胞表位、18个B细胞表位。成功构建ORF 2(128)、ORF 2(140)2个基因的昆虫细胞表达载体,转染sf9细胞后经Western blotting检测发现,表达蛋白可被His标签单抗、sHEV抗体阳性血清识别。【结论】试验发现2个sHEV具有潜在保护性抗原的p128和p140蛋白,均可在sf9细胞中表达,且具有免疫活性。结果为进一步研究sHEV ORF2蛋白的功能和新型疫苗的研发提供了材料。
关键词
猪戊型肝炎病毒(sHEV)
ORF2蛋白
生物信息学分析
昆虫细胞
表达
Keywords
Swine hepatitis E virus(sHEV)
ORF2 protein
bioinformatics analysis
insect cell
expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪源戊型肝炎病毒ORF2蛋白生物信息学分析及真核表达研究
卓娜
朱忠武
李静
胡世享
王建昌
林华
陈朝林
韩佃刚
艾军
陈培富
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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