移植低氧预处理MSC对CKD大鼠肾功能的影响及机制

目的探讨移植低氧预处理(HP)骨髓间充质干细胞(MSC)对慢性肾脏病(CKD)大鼠肾功能的影响及机制。方法取2只12周龄SD大鼠颈椎脱臼处死,剥离胫骨和股骨骨髓,分离并培养MSC,用流式细胞仪分析MSC表面抗原。将56只大鼠随机分为模型组40只、假手术(Sham)组12只、对照组4只。模型组用左肾切除及尾静脉注射阿霉素(ADR)建立CKD模型,并随机分为CKD组4只及ADR组、干细胞移植(MSC)组、低氧预处理干细胞移植(HP-MSC)组各12只。对照组于相同部位注射等体积生理盐水;Sham组做左侧肋脊角切口,随后缝合包扎,于相同部位注射等体积生理盐水。造模成功后将CKD组、对照组大鼠颈椎脱臼处死,取肾脏组织。将在常氧环境及低氧环境中培养的MSC分别移植至MSC组、HP-MSC组,Sham组、ADR组注射L-DMEM培养液。MSC移植第1、7天用全自动生化分析仪检测PRO、Hb、ALB、BUN和SCr水平,用HE染色法观察肾脏组织病理变化,用RT-PCR检测肾脏组织中基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA表达。结果HP-MSC的细胞趋化因子受体4(CXCR)表达率高于常氧MSC(P<0.01)。移植第1、7天,与Sham组比较,ADR组PRO、BUN、SCr水平高,Hb、ALB水平低(P均<0.05)。移植第1天,MSC组、HP-MSC组、ADR组生化指标比较差异无统计学意义(P均>0.05);移植第7天,与ADR组比较,MSC组、HP-MSC组PRO、BUN、SCr水平低,Hb、ALB水平高(P均<0.05),且HP-MSC组PRO、ALB、BUN、SCr变化较MSC组明显(P均<0.05)。移植第7天,MSC组与HP-MSC组肾脏组织损伤减轻,MSC组肾小球尚可见局灶节段硬化,HP-MSC组肾小球袢扩张;与MSC组比较,HP-MSC组肾间质纤维化改善更明显,炎症反应更轻。与对照组比较,CKD组肾组织SDF-1 mRNA相对表达量高(P<0.05)。结论移植HP-MSC可改善CKD大鼠的肾功能,其机制可能与SDF-1-CXCR4信号轴有关。

经颈动脉、尾静脉骨髓间充质干细胞移植治疗慢性肾脏病大鼠效果对比观察

目的对比观察经颈动脉、尾静脉骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗慢性肾脏病大鼠的效果。方法选取90只大鼠建立慢性肾脏病模型,分为颈动脉组、尾静脉组、生理盐水组各30只,另选30只健康大鼠作为正常组。颈动脉组、尾静脉组分别采用颈动脉插管输注、尾静脉注射的方法进行BMSC移植;生理盐水组经颈动脉插管输注生理盐水;正常组不做特殊处理。术后观察大鼠的生命体征、活动状态及毛发颜色。分别于术后1、7、14 d检测血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血清白蛋白、24 h尿蛋白。术后15 d处死各组大鼠并取肾组织标本,观察肾组织病理变化。结果各组大鼠均存活。颈动脉组与尾静脉组食欲较生理盐水组旺盛,体质量增长较快,毛发较光滑;生理盐水组明显食欲不佳,毛发毛糙,体质量增长较慢。颈动脉组、尾静脉组术后14 d血BUN、Cr、24 h尿蛋白量低于生理盐水组,血清白蛋白水平高于生理盐水组;颈动脉组术后14 d血BUN、Cr、24 h尿蛋白量低于尾静脉组,血清白蛋白水平高于尾静脉组(P均<0.05)。颈动脉组和尾静脉组肾组织病理变化较生理盐水组减轻,其中颈动脉组肾小球、肾小管病变较生理盐水组明显改善,尾静脉组较生理盐水组肾小球无明显黏连,肾小球毛细血管襻扩张。结论经颈动脉、尾静脉BMSC移植治疗慢性肾脏病大鼠均有积极效果,且经颈动脉BMSC移植肾功能改善情况更好。