猪红斑丹毒丝菌云南YNKMYZS-2016株的分离鉴定

2016年10月,云南省昆明市某规模化猪场饲养的妊娠后期母猪频繁发生急性死亡,为了尽快确诊,采集病死猪及胎儿内脏组织病料进行PCR及real-time PCR检测,同时进行病毒及细菌分离培养鉴定。结果显示,从病死猪肺脏组织分离获得1株猪红斑丹毒丝菌,其16S rRNA序列与NCBI GenBank中的猪红斑丹毒丝菌参考菌株Fujisawa(登录号:NZ_015601.1)、GXBY-1(登录号:NZ_CP014861.1)、KG-BB1(登录号:AB055909.1)、KG-BB2(登录号:AB055910.1)、SY1027(登录号:NZ_021354.1)、WH13013(登录号:NZ_CP017116.1)的16SrRNA序列相似性达96.3%以上。该分离菌株对青霉素、红霉素、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、原始霉素、苯唑西林、泰落星、头孢噻吩、头孢哌酮、呋喃妥因敏感,对林可霉素、多粘菌素E、复方新诺明、链霉素、磺胺甲恶唑、大观霉素、氟甲喹、卡那霉素、庆大霉素、衣氟沙星、奥索利酸、安普霉素、夫西地酸、氯霉素、四环素、利福平、多西环素、甲硝唑耐药。本研究结果为该疫情的预防治疗提供了科学参考。

云南一规模化猪场猪流行性腹泻及其细菌继发感染的诊断检测

2017年4月中下旬至5月上旬,云南省昆明市某规模化猪场新生哺乳仔猪群体突发一种以呕吐、水样腹泻及严重脱水为特征的疫情,虽然该猪场所有生产母猪产前40、20d已免疫某疫苗厂家生产的猪流行性腹泻-传染性胃肠炎二联灭活疫苗,但新生哺乳仔猪发病率及病死率仍然高达100%。剖杀送检发病仔猪,采集肠内容物抽提病毒RNA,进行猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、Delta冠状病毒及轮状病毒A群RT-PCR检测及序列分析,同时无菌采集肠系膜淋巴结样品进行继发细菌的分离培养及鉴定。RT-PCR检测及序列分析最终确诊为猪流行性腹泻病毒,其N基因序列与NCBI GenBank中的2014年度广东参考毒株CH/GDZHDM/1401株(Accession KX016034.1)的序列同源性达99%,同时分离培养、鉴定出1株致病性大肠埃希菌。药敏试验结果显示,该分离菌株对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢西丁、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因敏感,对其余药物均耐药。遂选用敏感药物对发病新生哺乳仔猪进行辅助治疗,并结合提前断奶、口服补液盐、腹腔补液等措施,但疗效均不理想,提示该病的有效防控还得依赖严格的生物安全措施及新型、高效疫苗的研发与应用。

规模猪场仔猪沙门氏菌病的诊断检测

2017年4月6日,云南省宣威市某规模化猪场新购进的部分仔猪开始出现呕吐、腹泻症状,接下来的数日发病数量不断增多并出现死亡。死亡仔猪皮肤发绀,解剖可见脾脏肿大呈深蓝色,有出血点,胃黏膜广泛性脱落、胃底部弥漫性出血,肝脏肿大,可见瘀血斑块。截至采集病料送检时,已死亡56头,仍有20多头处于发病状态中。为了尽快对疫情进行确诊,对送检病料进行猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳病、猪红斑丹毒丝菌、多杀性巴氏杆菌、刚地弓形虫及猪流行性腹泻RT-PCR/PCR/qRT-PCR检测,同时无菌采集肠系膜淋巴结样品进行致病菌的分离培养及鉴定。最终猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳病、猪红斑丹毒丝菌、多杀性巴氏杆菌、刚地弓形虫及猪流行性腹泻检测结果均为阴性,分离获得1株细菌,经细菌形态学分析、昆明小白鼠致病性试验、生化鉴定及16SrRNA序列分析,确诊引起此次疫情的病原体为沙门氏菌属细菌。药敏鉴定结果显示该菌株仅对头孢哌酮、氟甲喹、卡那霉素、奥索利酸、庆大霉素、依氟沙星、安普霉素、呋喃妥因敏感,对其余药物均耐药。笔者及时选用敏感药物对猪群进行预防和治疗,有效控制了死亡率,最大程度地减少了经济损失,并为猪沙门氏菌病的诊断及防治提供参考及借鉴。

规模化肉牛养殖场杂交肉牛顽固性水样腹泻的病原检测

2016年12月,云南省禄丰县某肉牛养殖场饲养的杂交肉牛相继发生顽固性水样腹泻,发病牛精神委顿,食欲减退,消瘦,下颌水肿,严重脱水。为了对该病进行诊断检测,遂采集水样腹泻粪便样品进行牛病毒性腹泻、牛冠状病毒、牛轮状病毒、牛细小病毒、隐孢子虫RTPCR/PCR检测,同时进行病原菌的分离培养及鉴定。结果牛病毒性腹泻、牛冠状病毒、牛轮状病毒、牛细小病毒、隐孢子虫检测均为阴性,但分离获得1株致病菌,经细菌形态学、昆明小白鼠致病性试验、细菌生化鉴定为致病性大肠埃希菌,因此推断引起该场杂交肉牛水样腹泻的病原为致病性大肠埃希菌。药敏实验结果显示该分离菌株对阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星敏感,对其余药物耐药。选用上述敏感药物对发病牛进行治疗,及时有效地控制了发病牛的死亡,并全部治愈。