金神软胶囊的毒理学安全性研究

〔目的〕评价金神软胶囊作为有降脂功效的保健食品的食用安全性。〔方法〕采用急性毒性试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验和 3 0d喂养试验进行检测。〔结果〕雌、雄大、小鼠急性经口LD50 >10g/kg体重 ,属无毒级 ;小鼠骨髓微核试验、精子畸形试验和Ames试验结果均为阴性 ;3 0d喂养试验未显示明显毒性。〔结论〕金神软胶囊属安全的保健食品。

肝细胞生长因子减轻皮质神经元的缺氧/复氧损伤

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对缺氧/复氧诱导大鼠皮质神经元凋亡的保护。方法分离培养SD大鼠皮质神经元,经HGF(15、30和60μg/L)预处理后经缺氧/复氧诱导凋亡,用MTT比色法检测细胞存活率;用Hoechst33258染色法和流式细胞仪检测神经元的凋亡;用比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)和caspase-3活性变化。结果与正常对照组相比,缺氧/复氧组神经元的细胞存活率显著下降,细胞凋亡率和caspase-3活性升高(均P<0.05);而HGF预处理12 h可显著逆转缺氧/复氧所致的细胞存活率降低、凋亡率增加、LDH活性上升、caspase-3活性升高的改变(均P<0.05),且这些效应与HGF剂量正相关。此外,HGF的抗凋亡效应可被PI3K/Akt通路抑制剂LY294002阻断。结论HGF减轻缺氧/复氧所诱导的神经元凋亡可能与其激活神经元的PI3K/Akt信号通路、减少caspase-3表达有关。

肝细胞生长因子促进人胚胎干细胞向神经前体细胞分化

目的:研究肝细胞生长因子(HGF)诱导人胚胎干细胞(hESCs)定向分化为神经前体细胞(NPs)的作用。方法:诱导拟胚体(EBs)生成,随机将EBs分为正常对照组、G5 supplement组、HGF组和HGF+G5 supple-ment组,悬浮培养诱导7d,转移至多聚赖氨酸/层黏连蛋白(20mg/L)包被的24孔培养板中继续培养7-10d。免疫荧光染色鉴定NPs和体外分化能力,流式细胞仪检测各组巢蛋白(nestin)阳性细胞的比例,RT-PCR检测音猥因子(Shh)对NPs的脑区标记基因表达的影响。结果:HGF+G5可诱导hESCs定向分化为NPs,HGF+G5组的nestin阳性的NPs比例(87.3%±3.9%)显著高于其它组(P<0.05),NPs具有分化成神经元、少突和星形胶质细胞的能力;HGF+G5诱导时间对于NPs的分化有影响,7d时nestin+细胞比例达到最大;Shh可使NPs表达腹侧化基因,后脑标记表达上调,而前脑标记表达下调。结论:含HGF和G5的无血清神经分化体系可有效诱导hESCs神经分化,是研究神经诱导的良好体系。

肝细胞生长因子促大鼠神经干细胞增殖的作用

目的：研究肝细胞生长因子（HGF）对大鼠神经干细胞（NSCs）增殖的作用以及P13K／Akt信号途径的影响。方法：分离培养大鼠NSOs，通过向神经培养基中添加HGF（10，30，60ng／ml），计数干细胞克隆形成率、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法以及5-溴-2＇-脱氧尿苷（BrdU）标记检测NSCs的增殖，AnnexinV／FITC免疫荧光显色测定NSCs的凋亡；免疫印迹法检测细胞磷酸化Akt蛋白表达的变化。结果：与对照组相比，HGF各剂量组NSCs克隆率明显增加，生长速度增快，BrdU阳性细胞增加．NSCs凋亡率显著减少。此外，HGF可上调磷酸化Akt蛋白的表达，HGF的效应可被PI3K／Akt通路抑制剂LY294002阻断。结论：HGF可促进大鼠NSCS增殖，抑制其凋亡，其作用机制可能与激活NSCs的PI3K／Akt信号转导通路有关。