瞬时感受器电位离子通道香草素受体亚家族Ⅳ在帕金森病细胞模型中介导PC12细胞炎症反应的机制

目的探讨瞬时感受器电位离子通道香草素受体亚家族Ⅳ(TRPV4)在帕金森病(PD)细胞模型中介导PC12细胞炎症反应的机制。方法2023年6―8月,用1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))建立PD细胞模型,用TRPV4特异性抑制剂HC067047抑制TRPV4。将培养的PC12细胞采用随机数字表法分为四组:对照组、HC067047组、MPP^(+)组、HC067047+MPP^(+)组。细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖活力。蛋白印迹法和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组细胞TRPV4和炎症因子白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平变化。结果与对照组1.00±0.08相比,MPP^(+)组TRPV4的表达量2.14±0.20明显升高(P<0.001)。与对照组1.00±0.01相比,MPP^(+)组的PC12细胞活力0.65±0.08明显降低(P<0.01),而HC067047能明显回复MPP^(+)引起的细胞活力0.83±0.07降低(P<0.01)。与对照组相比,MPP^(+)组的IL-181.96±0.27和IL-61.92±0.18、IL-1β(874.61±108.09)ng/L和TNF-α(791.28±106.88)ng/L明显升高(P<0.001),HC067047能明显抑制MPP^(+)引起的IL-181.45±0.11和IL-61.58±0.22、IL-1β(626.28±84.53)ng/L和TNF-α(592.94±86.9)4 ng/L明显升高(P<0.01或P<0.05)。结论TRPV4参与了MPP^(+)诱导的PD细胞模型的炎症反应,抑制TRPV4有抗炎作用。

蛋白酪氨酸激2/信号转导子与激活子3信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤中的作用机制研究

目的探讨蛋白酪氨酸激2/信号转导子与激活子3(JAK2/STAT3)信号通路在大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用机制。方法按照体重将模型大鼠随机分为2组:模型组、抑制剂组,每组10只;另取20只正常大鼠作为正常组和溶剂组。建立VILI大鼠模型。造模前1 h,抑制剂组大鼠尾静脉注射AG490(JAK2/STAT3信号通路抑制剂)溶液10 mg·kg-1,溶剂组注射等剂量的二甲基亚砜,正常组和模型组注射等剂量的0.9%NaCl。以酶联免疫吸附法测定大鼠肺组织的髓过氧化物酶(MPO)活性,蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中JAK2和p-STAT3的表达水平(灰度值)。结果正常组、溶剂组、模型组和抑制剂组的MPO活性分别为(0.13±0.06),(0.10±0.08),(0.44±0.11)和(0.28±0.07)U·g-1;这4组的JAK2蛋白的相对表达量分别为0.99±0.05,0.98±0.04,4.47±0.12和2.75±0.21;这4组的p-STAT3蛋白的相对表达量分别为1.00±0.06,0.99±0.08,4.82±0.25和2.83±0.16。上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);正常组和溶剂组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论在LIVI大鼠中,抑制JAK2/STAT3信号通路活性可有效降低大鼠肺组织内的炎性反应。