云南省573名非综合征型聋学生SLC26A4基因IVS7-2A＞ G和2168 A＞ G的检测分析

目的分析云南省部分聋校非综合征型聋学生常见致聋基因SLC26A4突变热点的携带情况,初步了解当地聋病的分子病因及其特点。方法采集云南省部分聋校573例非综合征型耳聋学生(耳聋组)及232例听力正常人群(对照组)的外周静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增含SLC26A4基因IVS7-2A>G、2168A>G(H723R)位点的基因片段,将扩增产物直接测序,用GeneTool软件分析碱基序列。结果耳聋组中19例携带SLC26A4基因IVS7-2A>G突变(3.32%,19/573),其中6例为纯合突变,13例为杂合突变,等位基因频率为2.18%(25/1 146);携带2168A>G(H723R)突变5例(0.87%,5/573),其中1例为纯合突变,4例为杂合突变,等位基因频率为0.52%(6/1 146);3例为同时携带IVS7-2A>G和2168A>G(H723R)的复合杂合突变(0.52%,3/573)。对照组中检测到SLC26A4基因IVS7-2A>G杂合突变2人(0.86%,2/232),2168A>G(H723R)杂合突变1人(0.43%,1/232)。结论云南省部分聋校非综合征型聋学生携带SLC26A4基因IVS7-2A>G、2168A>G(H723R)突变率低于国内平均水平。

云南三民族人群eNOS G894T多态性与HBV感染的相关性研究

目的:分析云南省西双版纳基诺族、傣族和僾尼族人群eNOS G894T多态性与HBV感染的相关性。方法:采用整群随机抽样的方法运用PCR-RFLP方法对三民族人群eNOS G894T位点进行基因分型。结果:(1)僾尼族人群HBV感染率显著高于基诺族及傣族(P均为0.000)。(2)僾尼族人群eNOS G894T位点基因型与等位基因分布频率与其他两民族显著不同(P均小于0.005),GG基因型与G等位基因频率降低,而TT基因型与T等位基因频率升高。(3)HBV感染组eNOS G894T位点GG基因型与G等位基因频率显著低于正常对照组,而TT基因型与T等位基因频率显著高于HC组(P均为0.000)。(4)以非条件logistic回归校正混杂因素后,在G隐性模式下,HBV感染组与正常对照组差异有显著性意义(P为0.000;OR为0.311;95%CI为0.179～0.540)。结论:eNOS G894T基因型和等位基因频率具有民族差异,并且其多态性与HBV感染密切相关,基因型为GG纯合子的个体降低了HBV感染风险。

云南昆明地区乙型肝炎病毒基因亚型与血清亚型研究

目的研究云南乙型肝炎(HB)病毒基因亚型与血清型的分布情况。方法对云南97例乙型肝炎病毒(HBV)毒株S基因进行序列测定,通过Genebank HBV基因型分析网站确定毒株的基因型。通过序列比较、基因进化树的构建和相应位点特异氨基酸和核苷酸确定云南HBV毒株基因亚型和血清亚型。结果在所测的97例标本中,云南流行的HBV毒株有B基因型(75%)和C基因型(25%),没有发现其它基因型和基因混合型。B基因型有血清型adw2(占88%)和ayw1(12%);C基因型中以adrq+(96%)为主,仅1例为adw2(4%)。云南HBV B基因存在B2、B1、B4和B5亚型,其中以B2亚型为主,C基因型全为C2亚型。云南HBV C基因型毒株有其特异的核苷酸分布位点。结论云南HBV B基因型毒株与国内外参考株在S基因区没有显著的特异位点核苷酸分布,而C基因型则有显著的自身特征。

云南省部分聋生线粒体DNA 12S rRNA A1555G和C1494T的突变

目的探讨云南省部分特教学校聋生携带氨基糖甙类抗生素致聋相关基因线粒体DNA(mitochondri-al DNA,mtDNA)12S rRNA A1555G和C1494T的突变率.方法采集413名耳聋学生及232名健康人群的外周静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增含mtDNA 12S rRNA A1555G和C1494T的基因片段,扩增产物经直接测序进行基因突变位点的鉴定.结果在413名耳聋学生中有10例携带mtDNA 12S rRNA A1555G均质突变,携带率为2.42%.对照组中未检测到该位点的突变.2组人群中均未检测到mtDNA 12S rRNA C1494T突变.结论云南省部分特教学校聋生携带mtDNA 12S rRNA A1555G的突变率与全国平均水平一致,本研究为明确该地区耳聋的病因、防治及干预提供科学依据.

云南三民族人群VDR基因多态性与HBV感染的相关性

目的:分析云南省西双版纳地区基诺族、傣族和僾尼族人群VDR Taq I和Fok I位点基因多态性的分布,并对其多态性与HBV感染的相关性进行探讨。方法:运用PCR-RFLP方法对三民族人群VDR Taq I和Fok I位点进行基因分型。结果:(1)僾尼族VDR Taq I和Fok I位点多态性与其他两民族显著不同:Fok I位点CC基因型和Taq I/Fok I TT单体型频率降低(僾尼族vs基诺族:χ2值分别为13.907和14.839,P值分别为0.001和<0.001;僾尼族vs傣族χ2值分别为6.766和6.134,P值分别为0.034和0.013)。(3)VDR多态性在HBV感染组(IF组)和健康对照组(HC组)中分布频率差异有统计学意义,IF组Fok I CC基因型(χ2<26.229,P<0.001,OR=2.305,95%CI为1.451～3.663)、Taq I/Fok I TC单体型(χ2=12.457,P<0.001)显著高于HC组,而TT单体型则低于HC组(χ2=25.599,P<0.001);(4)VDR多态性在HBsAg(+)组与HBsAg(-)组中分布频率差异有统计学意义,HBsAg(+)组CC基因型(χ2=13.321,P=0.001,OR=3.104,95%CI为1.676～5.750)、Taq I/Fok I TC单体型(χ2=12.525,P=0.001)显著高于HBsAg(-)组,而TT单体型则低于HBsAg(-)组(χ2=14.027,P<0.001)。结论:VDR Taq I和Fok I多态性具有民族差异,且其多态性与HBV易感性相关。

昆明汉族人群TCF7L2基因rs290487-T/C多态性与2型糖尿病相关性研究

目的探讨TCF7L2基因rs290487多态位点在云南昆明汉族人群中与2型糖尿病的相关性。方法采用套式PCR产物直接测序法对昆明汉族健康组94例,2型糖尿病组200例rs290487多态位点进行检测。结果云南昆明汉族人群rs290487三个基因型CC、CT和TT在病理组与对照组的频率分别为14%/6.4%、41.5%/46.8%和44.5%/46.8%。最少等位基因频率C在对照组与病理组为34.7%/29.8%,与2型糖尿病有趋势上的相关性,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论TCF7L2基因rs290487在昆明汉族人群中与2型糖尿病无相关性。

microRNA在甲状腺乳头状癌中作用机制的研究进展

microRNA(miRNA)是一类长约22个核苷酸的非编码单链RNA分子。miRNA通过结合mRNA 3'非编码区(3'-UTR)调节基因的表达,抑制蛋白质的翻译。甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤,甲状腺乳头状癌是甲状腺癌中最常见的类型,它的发病率逐年上升。近年来,大量研究表明miRNA在甲状腺乳头状癌中发挥重要的作用,对癌的发生、发展及预后评估等方面具有重要意义。

白细胞介素-18启动子基因在云南基诺族、傣族、僾尼族人群中的遗传多态性

目的:分析云南省西双版纳地区基诺族、傣族和僾尼族人群白细胞介素-18(IL-18)启动子基因多态性的分布情况。方法:运用PCR-测序的方法检测三民族人群IL-18启动子G-137C、C-607A和G-656T位点基因型及等位基因频率。结果:(1)基诺族人群G-137C位点基因型与等位基因分布频率与其他两民族显著不同,差异有统计学意义(P值均为0.000)。(2)C-607A与G-656T完全连锁,C-607A(G-656T)位点基因型与等位基因分布频率三民族人群相比均有统计学差异(均P<0.05)。结论:IL-18启动子G-137C、C-607A和G-656T多态性位点基因型和等位基因分布频率具有民族、种族差异。

CIK细胞悬液细菌内毒素检测方法的研究

目的建立CIK细胞悬液细菌内毒素的检查方法。方法根据2005年版《中国药典》二部附录XIE细菌内毒素检查方法进行试验。结果CIK细胞悬液稀释8倍后对细菌内毒素检查无干扰,其细菌内毒素限值符合规定。结论CIK细胞悬液可用细菌内毒素检查法控制内毒素限量。

DCIK细胞特异性抗肿瘤生物学活性研究

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)分别与两种冻融抗原致敏DC细胞共培养后获得的DC细胞诱导的特异性肿瘤杀伤细胞(dendritic cell induced killer.DCIK)的增殖活性及其对K562、Namalwa细胞株的杀伤活性。方法采集健康供者的外周血单个核细胞(PMNC),先诱导培养CIK细胞及两组DC细胞(K562-DC和Namalwa-DC),然后将两组DC细胞分别和CIK细胞按1∶10的比例分别混合培养,并以CIK细胞单独培养组为对照。计数细胞扩增倍数,并于共培养6d MTT法测定各组细胞对K562、Namalwa细胞杀伤活性。结果两组DCIK细胞增殖速度明显快于单纯CIK细胞组(P<0.05);共培养6d,相同的效靶比情况下,两组DCIK细胞对两种肿瘤细胞的杀伤活性都比单纯CIK细胞明显增强,而用相应肿瘤抗原致敏得到的DCIK细胞对该种肿瘤细胞的杀伤活性最强。结论 DCIK细胞的增殖能力、抗肿瘤活性均高于CIK细胞,致敏的DCIK细胞对相同肿瘤靶细胞有杀伤特异性。

IL-10启动子基因在云南傣族、哈尼族人群中的遗传多态性

目的分析云南省西双版纳地区傣族和哈尼族人群IL-10启动子基因多态性的分布情况。方法运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术检测傣族和哈尼族人群IL-10启动子rs1800871和rs1800896位点基因型及等位基因频率。结果傣族与哈尼族人群rs1800871和rs1800896位点基因型与等位基因分布频率显著不同,差异有统计学意义(rs1800871:χ2分别为7.023和7.373,P分别为0.030和0.007;rs1800896:χ2分别为6.184和5.870,P分别为0.013和0.015)。结论 IL-10启动子rs1800871和rs1800896多态性位点基因型和等位基因分布频率具有民族、种族差异。

脐带间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤（spinalcordinjuries，SCI）是致残率最高的疾病之一，SCI及继发炎症引起神经元和神经纤维变性坏死，神经胶质细胞增生形成瘢痕组织，造成损伤平面以下出现运动功能丧失（瘫痪）、感觉障碍、括约肌功能失调（大小便失禁）、肌痉挛、疼痛、关节挛缩、褥疮、心理障碍、性功能不全，甚至呼吸障碍等危及生命及影响生活质量的改变。目前SCI尚无特效的治疗方法，亟待探索新的治疗策略。近年，随着对间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）的多向分化潜能、低免疫原性及体外易培养扩增等生物学特性的深入认识，为SCI的治疗提供了新思路。

15-LO在慢性髓系白血病中作用的研究进展

白血病是一组高度异质性的造血系统恶性肿瘤,有一种或几种白细胞出现质和量的异常,并在骨髓和其它器官中广泛浸润,导致正常血细胞减少。白血病按照细胞类型的不同,分为髓系白血病和淋巴细胞白血病;按自然病程和细胞的成熟度分为急性白血病和慢性白血病。

Toll样受体在肝癌中作用的研究进展

在世界范围内,肝癌(HCC)已成为恶性肿瘤的第二大致死因素.而Toll样受体家族(TLRs)的信号转导通路与HCC的进展有关.TLRs是细胞表面的天然免疫识别受体,可以识别作为配体的病原微生物分子,通过与配体结合介导肝脏内的多种细胞的激活和多种细胞因子的分泌,影响HCC发生和发展的过程.更好地了解肝脏中TLRs及信号通路,有助于进一步理解HCC形成的分子机制,并为HCC治疗提供一个新思路.

趋化因子CXCL12和趋化因子受体CXCR4与胃癌的研究进展

胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其总体发病率居恶性肿瘤第四。在不同国家、地区，胃癌发病率差异较大，其中发病率较高的国家和地区包括日本、哥斯达黎加、秘鲁、巴西、中国、韩国、智利、中国台湾和一些前苏联的联盟国。近年来，尽管世界范围内胃癌总体发病率呈下降趋势，但它仍是威胁人类健康的疾病之一，死亡率居恶性肿瘤第二位，五年生存率仅为20％，

HBV混合感染中前C/cp区变异与HBeAg的相关性研究

目的研究慢性乙型病毒性肝炎患者血清HBeAg表达与HBV混合感染中前C/C基因启动子cp变异的关系。方法采用聚合酶链反应扩增HBV-前C/cp基因,以PUC18为载体构建质粒,并进行DNA序列测定后用DNAStar软件包进行序列分析。结果9例患者体内共构建356份HBV-前C/cp质粒;测序结果显示同一患者体内均存在多种变异形式的HBV-前C/cp基因,HBeAg阳性患者体内多为野生株,而HBeAg阴性患者多为突变株;发现13种热点突变形式,其中12种在HBeAg阴性和HBeAg阳性患者体内分布有显著性差异。结论HBV前C/cp区基因变异是导致HBeAg阴转的重要原因之一;HBV感染者体内同时存在多种变异形式的病毒株,野生株/突变株的比例波动在一定程度上决定血清HBeAg的水平。

肝核受体激动剂T0901317对大鼠骨骼肌细胞脂肪酸转运酶基因表达影响的实验研究

目的探讨肝核受体(LXRs)激动剂T0901317对正常SD大鼠骨骼肌细胞中脂肪酸较运酶(FAT/CD36)基因mRNA表达的影响。方法将原代培养的5只SD大鼠骨骼肌细胞分为T0901317 1μmol/L作用组、0.5μmol/L作用组和未作用(阴性对照)组,采用SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测各组SD大鼠骨骼肌细胞FAT/CD36基因mRNA表达水平,并进行比较分析。结果1μmol/L、0.5μmol/L作用组与阴性对照组比较,差异无显著性意义(P=0.116)。结论LXRs激动剂T0901317对SD大鼠骨骼肌细胞中FAT/CD36基因mRNA的表达水平没有明显作用,提示T0901317在促进SD大鼠骨骼肌细胞内脂肪酸的堆积作用尚无确切的证据。

人脐带Wharton’s jelly间充质干细胞生物学特性的研究

目的探讨人脐带Wharton’s jelly间充质干细胞的培养方法及生物学特性。方法将脐带Wharton’s jelly剪成约0.5 mm3种植到培养瓶,3 h后添加培养液。细胞达90%融合时用胰酶消化传代。用免疫组化检测波形蛋白的表达;用流式检测细胞膜表型;用诱导液检测其分化为脂肪样细胞和神经样细胞的潜能。结果培养6 d左右,细胞从组织块游出,为长梭形的成纤维样细胞,传代后细胞增殖加快,呈放射状分布。间充质干细胞标记物CD90等为阳性,而CD34等为阴性;波形蛋白呈强阳性。成脂诱导后,细胞质出现脂滴,油红O染色为阳性。经黄芪诱导24 h,细胞表达Nestin和NF,而NSE和GFAP为阴性。结论人脐带Wharton’s jelly中有间充质干细胞,且有多向分化潜能。

JAK/STAT3信号通路调控肿瘤及其相关生物功能的研究进展

JAK/STAT3信号通路是细胞信号通路中重要的信号传导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,对细胞凋亡和增殖起着关键的作用,并且还诱导胚胎发育、肝脏再生、糖酵解和炎性反应、上皮间质转化和血管再生等一系列生物发生过程,与人类肿瘤的发生发展密切相关。