一定浓度下三氧化二砷对T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株增殖的影响

背景:近年来有将三氧化二砷试用于T细胞肿瘤的有效报道,但未见其治疗机制的相关研究。目的:检测三氧化二砷对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞的抑制增殖、诱导凋亡及细胞周期的影响。方法:分别采用MTT、PI单标记流式细胞术和TUNEL法检测2,5,10μmol/L的三氧化二砷干预24,48,72h,对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株抑制增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响,及其凋亡相关基因bcl-2及血管内皮细胞生长因子基因表达的变化。结果与结论:在一定的浓度范围内,三氧化二砷对Hut-78细胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能与下调血管内皮细胞生长因子基因的表达有关,同时还存在一定的细胞毒作用;三氧化二砷可诱导Hut-78细胞发生凋亡,凋亡机制主要发生在G2～M期,其凋亡作用可能与下调bcl-2基因表达有关。三氧化二砷对Hut-78细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用呈时间剂量依赖性。

5-甲氧基色醇对急性髓细胞性白血病U937细胞增殖和迁移的影响及其机制研究

目的研究不同浓度5-甲氧基色醇对急性髓细胞性白血病U937细胞增殖和迁移的影响并初步探讨其作用机制。方法采用人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法,检测不同浓度(8、16、32、64μmol/L)的5-甲氧基色醇对急性髓细胞性白血病U937细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测U937细胞各处理组的凋亡比例;Transwell实验检测不同浓度5-甲氧基色醇对细胞U937迁移能力的影响;基于5-甲氧基色醇的药效团,应用生物信息学技术预测5-甲氧基色醇作用的蛋白靶点,并对蛋白靶点做通路富集分析;蛋白质印迹法检测不同浓度5-甲氧基色醇对显著富集通路中的蛋白靶点磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和Akt激酶(AKT)的蛋白表达水平影响。结果CCK-8结果显示,8、16、32、64μmol/L 5-甲氧基色醇以时间和浓度依赖方式抑制U937细胞的增殖[增殖抑制率24 h:(17.4±1.2)%、(31.6±2.6)%、(43.5±3.2)%、(58.28±4.5)%,72 h:(21.5±1.8)%、(43.4±2.4)%、(67.4±6.1)%、(85.6±3.9)%;均P<0.05];流式细胞术实验结果显示,与对照组凋亡率(3.93±0.19)%相比,5-甲氧基色醇明显促进细胞U937的凋亡[(7.5±0.33)%、(8.99±0.20)%、(13.71±0.39)%];Transwell实验结果显示,与对照组每视野下迁移细胞数(205±14)个相比,8、16、32、64μmol/L 5-甲氧基色醇明显抑制细胞U937的迁移能力[(152±18)个、(124±9)个、(78±22)个](P<0.05);生物信息学及通路富集结果显示,5-甲氧基色醇存在100个作用的蛋白靶点,这些蛋白靶点显著富集在包括PI3K-AKT信号通路等;对PI3K-AKT信号通路相关蛋白进行蛋白质印迹法检测其表达,结果显示,5-甲氧基色醇处理可明显减少U937细胞中PI3K和AKT蛋白的磷酸化水平(均P<0.05)。结论5-甲氧基色醇抑制PI3K-AKT信号通路的蛋白表达水平,进而抑制急性髓细胞性白血病U937细胞的增殖和迁移,促进U937的凋亡。