内质网应激在年龄相关性黄斑变性中的研究进展

年龄相关性黄斑变性(ARMD)是老年人不可逆视力损害的主要原因,以黄斑区玻璃膜疣的形成、色素紊乱、地图样萎缩、脉络膜新生血管形成为主要病理特征,视网膜色素上皮(RPE)细胞功能失调与ARMD关系密切。内质网是真核生物一个特殊的细胞器,主要负责蛋白的合成、修饰、整合和质量控制,并参与Ca^(2+)稳态维持和脂质的生物合成。细胞内外环境的变化,导致内质网应激,激活细胞内的信号转导通路——未折叠蛋白反应,以恢复细胞功能和维持细胞内环境稳态。但长期强烈的内质网应激可能导致内质网动态平衡难以恢复,而触发细胞凋亡。ARMD的发病机制尚未完全阐明,但大量研究证明内质网应激与其相关。本文就内质网应激的信号转导通路、内质网应激在RPE中的生理作用及内质网应激可能介导ARMD的机制作一综述。

铜绿假单胞菌性角膜炎发病机制的研究进展

铜绿假单胞菌性角膜炎是临床上常见的角膜炎之一,其起病急、发展迅速,并且治疗棘手。若未及时治疗,极易形成角膜溃疡,严重时可致盲。为增加有效治疗的手段,深入研究其发病机制有重要意义。本文就铜绿假单胞菌的致病性与宿主的免疫反应在铜绿假单胞菌性角膜炎的发病机制中所起的作用进行了概述,以期为其治疗的新`思路提供理论依据`。

骨髓间充质干细胞在角膜损伤修复中的应用和研究进展

骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)可在体内外培养诱导分化为角膜上皮细胞、角膜缘上皮细胞和角膜基质细胞等。BMSC移植后可分化为角膜上皮细胞,有效修复损伤的角膜上皮细胞组织,能表达多种细胞因子,减少炎症细胞浸润,减轻细胞损伤,并抑制细胞凋亡,降低角膜移植后的排斥反应;BMSC还能分化促进角膜缘干细胞增殖。也可在载体上利用BMSC构建生物角膜,进行眼表修复,此为基础研究提供了新的研究方向,为临床治疗角膜损伤类疾病提出了新的临床治疗思路,在基础研究和临床运用方面都有非常巨大的潜力和广阔的前景。本文就BMSC在角膜损伤修复中的研究现状和进展进行综述。

房水流出通路结构及功能显像的研究进展

房水作为重要眼内容物之一,一直处于动态循环中,若房水流出通路(AHO)中的任一部位受阻,都将导致眼压升高,并伴随青光眼的发生,进而出现视神经损伤,严重影响视功能。而开角型青光眼患者的房角呈开放状态,其眼压升高是房水流出阻力增加所致,因此,直观地观察AHO的结构,评价其功能变化,有助于我们更清晰地了解AHO的阻力所在,进一步阐明开角型青光眼的发病机制。目前对于AHO的显像技术包括光学相干断层扫描(OCT)以及AHO造影术等。本文将就AHO结构及功能显像的研究进展做一综述。

恒河猴和树鼩角膜内皮细胞的比较分析

目的对比分析恒河猴和树鼩角膜内皮细胞的特点和差异。方法利用非接触式自动角膜内皮细胞仪SP3000P分别对6只恒河猴（12眼）和20只树鼩（40眼）进行角膜内皮细胞测量,并获得角膜的8个相关参数：中央角膜厚度（CCT）、最小细胞面积（Smin）、最大细胞面积（Smax）、平均细胞面积（Savg）、细胞面积标准差（SSD）、细胞面积变异系数（CV）、细胞密度（CD）和六边形细胞百分比（HG）,并结合文献与人眼的相关参数进行对比分析。结果 SP3000P角膜内皮细胞仪能在较短时间内完成恒河猴和树鼩角膜内皮的图像采集和参数的检查,耗时差异无显著性。恒河猴和树鼩CCT分别为（449.2±12.8）μm和（262.4±24.6）μm;Smin分别为（120.4±26.3）S/μm^2和（153.2±42.9）S/μm^2;Smax分别为（705.0±130.8）S/μm^2和（468.7±109.3）S/μm^2;Savg分别为（351.1±26.1）和（295.4±18.9）S/μm^2;SSD分别为（113.1±27.4）和（75.9±27.3）S/μm^2;CV分别为（31.9±6.0）和（25.3±8.3）;CD分别为（2874.2±203.8）p/cell·mm^-2和（3399.3±224.7）p/cell·mm^-2;HG%分别为（58.6±9.1）和（94.0±9.7）。二者的上述参数差异均有显著性（P〈0.05）。树鼩角膜厚度比恒河猴小,内皮细胞面积、变异系数也较恒河猴小,但是角膜内皮细胞密度和六边形细胞比例显著高于恒河猴。恒河猴角膜厚度、角膜内皮细胞变异系数和六边形细胞比例与人眼高度相似,但内皮细胞密度低于人眼;树鼩角膜厚度为恒河猴的60%、人眼的50%,但角膜内皮细胞密度和平均细胞面积更接近于10-20岁人眼。结论恒河猴和树鼩角膜内皮细胞的形态和各项参数均有显著差异,各自与人眼角膜内皮细胞既有相似之处,也有不同点,恒河猴和树鼩均是研究人类角膜内皮疾病可以选择的合适实验动物。

特发性黄斑裂孔的发病机制及治疗进展

特发性黄斑裂孔(IMH)是指无明显病因发生于黄斑区视网膜神经上皮层的全层组织缺损。目前,随着对IMH认识的逐渐深入及其治疗方式的不断创新和改进,其治疗技术也呈现成熟化及多样化。研究表明,早期直径较小的IMH可以进行观察随访;奥克纤溶酶(Ocriplasmin)已被批准用于中小型黄斑裂孔和黄斑粘连(VMA)的患者;内界膜(ILM)剥除可提高解剖闭合率。然而,对于直径<250μm的IMH,尚不确定是否总是需要剥除ILM。本文讨论了IMH的发病机制、分期、分类及当前的治疗方案。基于IMH的特点和患者的差异性,拟提出一种基于循证医学的方法来为个体患者选择最佳和最实际的治疗方案。

糖化血红蛋白水平对2型糖尿病患者白内障超声乳化术后角膜内皮细胞变化的影响

目的探讨2型糖尿病患者糖化血红蛋白(HbA_(1C))水平对白内障超声乳化术后角膜内皮细胞变化的影响。方法收集接受白内障超声乳化吸除术的患者108例(166眼),根据是否有糖尿病分为A组(糖尿病)、B组(非糖尿病),A组中根据HbA_(1C)水平分为A1组(HbA_(1C)>8%)、A2组(HbA_(1C)≤8%)应用裂隙灯显微镜检查和Topcon SP3000P非接触式角膜内皮细胞仪在术前、术后1周、术后1个月和术后3个月分别进行角膜内皮检查观察术后角膜水肿情况、角膜内皮细胞密度、细胞平均面积、变异系数、六边形细胞比例。结果在超声乳化术后A1组、A2组和B组临床可见角膜水肿的发生率分别为1级水肿:14.3%、4.3%、3.9%,2级水肿:2.4%、2.1%、1.3%各组间差异无统计学意义(P>0.05)。所有患者术后均出现角膜内皮细胞密度下降、六边形细胞比例下降、细胞面积增大、变异系数增加的变化趋势在术后3个月内这种变化持续存在。A1组患者比A2组和B组患者改变更加显著,术后3个月角膜内皮细胞丢失率远高于A2组和B组。结论 HbA_(1C)>8%的2型糖尿病患者在超声乳化术后更容易出现角膜内皮的数量和形态改变,因此为了尽可能地减少术后角膜内皮细胞的损失,在白内障手术前应严格控制血糖。

半剂量维替泊芬和半能量PDT治疗慢性中心性浆液性脉络膜视网膜病变

目的探讨使用半剂量维替泊芬和半能量激光的光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)治疗慢性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(chronic central serous chorioretinopathy,CCSC)的疗效和安全性。方法分析2011年8月至2013年8月期间在我科就诊的CCSC患者25例(33眼),所有患者接受静脉注射剂量为3 mg·m-2体表面积的维替泊芬和能量为25 J·cm-2的PDT治疗,治疗后1个月、3个月、6个月和12个月复查,重复进行BCVA、裂隙灯、间接眼底镜和OCT检查,治疗后6个月复查眼底荧光血管造影检查。结果末次随访时视力改善者31眼、稳定者2眼,最佳矫正视力(0.15±0.09)LogM AR,与治疗前的(0.50±0.18)LogM AR相比差异有统计学意义(t=10.334,P<0.001);OCT检查示,显效率在治疗后1个月、3个月、6个月和末次随访时分别为48.5%、84.8%、93.9%和100.0%。CCSC眼治疗后1个月黄斑中心凹下脉络膜厚度为(391.53±101.18)μm,与治疗前的(483.21±89.13)μm相比明显降低(t=-3.902,P<0.001),黄斑中心凹下平均脉络膜厚度随时间推移不断下降。治疗后6个月FFA结果显示33眼渗漏病灶均完全消失。未观察到复发、视网膜色素上皮萎缩、脉络膜新生血管形成等并发症发生。结论使用半剂量维替泊芬和半能量PDT治疗对于单纯黄斑区神经上皮脱离的CCSC是有效和安全的。

树鼩茄病镰刀菌性角膜炎房水中Th1/Th2炎性因子的变化

目的观察树鼩茄病镰刀菌性角膜炎房水中Th1/Th2炎性因子的变化,了解Th1/Th2炎性因子与本病炎症反应的关系。方法茄病镰刀菌培养7 d后收集真菌混悬液,调整孢子密度为10×109CFU·m L-1。清洁级树鼩40只随机分为实验组30只、对照组10只,右眼为实验眼。实验组将真菌孢子混悬液50μL注入角膜基质中央,对照组注入生理盐水50μL。造模后第3天、第7天、第14天,流式细胞仪分析房水中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10的水平;病理学检查观察浸润细胞类型。结果 Th1型细胞因子IL-1β和IL-6浓度均在造模后第7天达到高峰,造模后各时间点与对照组相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05);Th2细胞因子IL-10浓度在造模后第14天达到高峰,造模后第7天、第14天与对照组相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05);IL-4浓度仅在造模后第7天与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。病理学检查结果示:炎症细胞浸润数量造模后第7天达到高峰,以中性粒细胞为主;实验组各时间点均可见菌丝平行于基质纤维生长。结论促炎因子IL-1β和IL-6及抑炎因子IL-10在树鼩茄病镰刀菌性角膜炎炎症反应机制中发挥重要作用。

茄病镰刀菌性角膜炎树鼩模型的建立

目的采用临床分离的茄病镰刀菌感染树鼩角膜,建立茄病镰刀菌性角膜炎树鼩模型。方法茄病镰刀菌接种到沙保氏培养基,26℃培养箱培养7 d,收集真菌混悬液,血细胞计数板调整孢子数量为1×10^(10)CFU/m L。清洁级树鼩40只随机分为实验组(n=30)、对照组(n=10)。实验组用胰岛素针头(29 G)将真菌孢子混悬液50μL注入角膜基中央,对照组注入生理盐水50μL。通过前段照相、共聚焦显微镜检查、病理组织学变化、感染角膜组织培养对模型进行评价。结果真菌浸润范围、角膜上皮细胞和内皮细胞水肿程度、菌丝数量均与时间呈正相关;炎性细胞浸润数量造模后第7天达到高峰,以中性粒细胞为主;实验各时间点均可见菌丝平行于基质纤维生长;感染后角膜组织培养可见茄病镰刀菌生长;造模成功率为86%。结论采用基质注射茄病镰刀菌孢子的方法首次成功建立茄病镰刀菌性角膜炎树鼩模型。

分离培养原代树鼩角膜基质细胞

目的探索一种简单、易行的体外快速、分离培养树鼩角膜基质细胞(corneal stromal cells, CSCs)的方法。方法实验分为实验组A和实验组B,取树鼩角膜基质层,实验组A剪碎,用1%的Ⅱ型胶原酶消化60 min,离心后重悬接种;实验组B用Ⅱ型胶原酶联合中性蛋白酶消化。比较记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,细胞行波形蛋白免疫组化及免疫荧光鉴定。结果胶原酶消化法可成功的获取原代细胞, 9 d后即可进行传代,细胞形态好;传代细胞生长较快,2～3 d即可传一代;双酶消化法获得的CSCs较少, 10 d才可见少量散落细胞,15～20 d可传代;波形蛋白免疫组化及免疫荧光表达阳性。结论两种方法均可成功培养出CSCs,但胶原酶消化法能更容易高效分离培养出大量树鼩CSCs。

23G玻璃体切割手术治疗Terson综合征的效果及预后影响因素

目的探讨23G玻璃体切割手术治疗Terson综合征的效果及预后影响因素。方法 21例(29眼)Terson综合征患者均接受23G玻璃体切除术治疗,术后随访视力、裂隙灯、间接检眼镜、眼压和并发症发生情况。结果 27眼(93.1%)视力改善,2眼(6.9%)视力稳定,平均Log MAR视力较术前显著提高,2眼因合并视神经挫伤而无法提高视力。术后3眼(10.3%)出现一过性高眼压和1眼(3.4%)少量玻璃体积血;未观察到视网膜脱离、脉络膜脱离、眼球萎缩等严重并发症发生。对危险因素和视力预后的相关分析发现,病程长短(F=5.727 8,t=0.004)、术前眼底情况(F=5.075,t=0.014)与术后平均Log MAR视力具有相关性。结论 23G微创玻璃体切除手术治疗Terson综合征可以帮助清除玻璃体积血和复位脱离的视网膜,早期手术有助于改善患者的视力预后。

特异性阻断剂Nec-1对视网膜缺血再灌注损伤模型小鼠坏死性凋亡的影响及作用

目的探讨特异性阻断剂Nec-1对视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)模型中坏死性凋亡的影响及作用。方法取60只野生型C57小鼠随机分为实验组、对照组及空白组。每组20只。在进行Nec-1对坏死性凋亡影响研究中,空白组15只小鼠不做任何处理,实验组15只小鼠给予玻璃体内注射2μL Nec-1(2mol·L^(-1))预处理,对照组15只小鼠无预处理;预处理4 h后实验组及对照组通过前房灌注法建立RIRI模型;再灌注损伤后3 d,每种检测方法各取5只小鼠分别于取材后行Western blot、免疫荧光定量PCR、免疫荧光染色,检测以下基因mRNA和蛋白的表达变化:IL-1β、IL-6、TNF-α、RIP3、RIP1及Caspase-8。在进行Nec-1对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)的影响研究中,实验组、对照组及空白组各5只小鼠纳入荧光金标记。空白组小鼠荧光金标记后不做任何处理。荧光金标记7 d后,实验组小鼠给予玻璃体内注射2μL Nec-1(2 mol·L^(-1))预处理,对照组无预处理。预处理4h后实验组及对照组通过前房灌注法建立RIRI模型。再灌注损伤后3 d,收集视网膜组织行铺片RGC计数研究。结果与对照组相比,实验组RIP3、RIP1的mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.001);IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达亦均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.001);Caspase-8的表达变化不明显,与对照组相比差异无统计学意义(P=0.654 8)。通过Western blot检测发现,实验组RIP3蛋白表达较对照组明显降低,其变化趋势与RIP3 mRNA水平的变化基本一致。通过视网膜切片免疫荧光染色检测亦发现,实验组RIP3蛋白表达较对照组明显降低。实验组全视网膜铺片中每个视野下荧光金逆行标记RGC数(197.3±3.6)较对照组(107.5±6.1)明显增多,差异有统计学意义(P<0.001)。结论实验性RIRI模型中,Nec-1能阻断坏死性凋亡,并显著增加RGC数。

新生儿眼底病变筛查及视网膜出血的影响因素分析

目的对新生儿眼底病变进行筛查统计,并分析视网膜出血的影响因素。方法回顾性分析2013年1月至2016年12月在我院新生儿病房行眼底筛查的1558例新生儿资料。统计新生儿眼底病变发病率以及视网膜出血发病情况,对影响视网膜出血的相关因素进行分析。结果本组1558例新生儿中筛查出眼底病变患儿196例,占12.6%;类型包括视网膜出血(8.9%)、早产儿视网膜病变(1.3%)、眼底渗出(1.2%)、视网膜有髓神经纤维(0.5%)、视网膜色素沉着(0.4%)、先天性结晶样变性(0.3%)、视网膜母细胞瘤(0.1%)。单因素分析结果显示,分娩方式、多胎、宫内窘迫、机械通气是影响视网膜出血的相关因素(均为P<0.05);而性别、是否足月、出生体质量、是否子痫、是否胎膜早破、是否窒息、是否输血、是否吸氧等因素与视网膜出血的发生并无明显相关性(均为P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,阴道分娩、机械通气是视网膜出血的独立危险因素。结论新生儿眼底病变的发生率较高,其中绝大多数为视网膜出血,阴道分娩和机械通气是导致新生儿视网膜出血的独立危险因素,应针对此类新生儿群体加强观察和干预。

改良Ahmed引流阀治疗外伤性青光眼的疗效

目的评价改良的FP-7Ahmed青光眼引流阀植入术治疗外伤性青光眼的临床疗效。方法回顾性病例系列研究。收集2014年8月至2016年2月住院行改良的FP-7Ahmed青光眼引流阀植入术治疗的32例(32只眼)外伤后继发性青光眼患者临床资料,分析患者病因、手术前后最佳矫正视力、眼压,术后早期并发症及手术成功率。结果引起患者眼压升高的原因多样,存在多种因素的联合作用。患者术后最佳矫正视力不同程度提高者10眼,无改变者15眼,下降者为7眼;患者术前平均眼压为(38.8±9.2) mm Hg;术后1、3、6、12、24个月眼压分别为(13.2±4.5) mm Hg、(15.7±4.8) mm Hg、(16.2±5.2) mm Hg;(17.7±6.7) mm Hg及(18.6±7.8) mm Hg,与术前比较,术后不同时间点眼压均明显下降,差异均有统计学意义(t=14.14、12.59、12.10、10.26、9.29,P <0.05)。改良的FP-7Ahmed引流阀植入术后1、3、6、12、24个月的总成功率分别为100%、93.75%、90.63%、86.05%、76.67%。结论改良的青光眼引流阀植入术治疗外伤后继发性青光眼安全有效,注意手术技巧,可减少术后部分并发症的发生。

IOL睫状沟植入联合IOL光学部周边后囊孔嵌顿术对儿童外伤性白内障的疗效观察

目的 比较外伤性白内障摘出术后不同人工晶状体（IOL）植入的临床疗效,寻找更优的儿童外伤性白内障的手术方式.方法 采用回顾性病例对照研究方法.收集2012年6月至2015年6月收治的60例60眼儿童外伤性白内障患者的病历资料,其中男44例,女16例;年龄1～14岁,平均（5.99±2.80）岁.60例患儿均在全身麻痹下行手术治疗,均由同一术者完成手术,均行外伤性白内障摘出＋IOL植入＋前段玻璃体切割术,根据后囊膜损伤情况将患者分为2个组,联合手术组患者30例30眼行IOL睫状沟植入联合IOL光学部周边后囊孔嵌顿手术,单纯手术组患者30例30眼行单纯IOL睫状沟植入手术,术后随访1～6个月,平均（4.3±1.2）个月.对比分析2个组手术前后最佳矫正视力BCVA、中央视轴区混浊程度、IOL偏斜度、术后并发症及手术操作时间.结果 联合手术组和单纯手术组术后不同BCVA患眼比例与术前比较,差异均有统计学意义（联合手术组：x2=7.548,P＜0.05;单纯手术组：x2=5.579,P＜0.05）.2个组患儿中央视轴区不同分级混浊患眼数量及不同BCVA患眼数量比较差异无统计学意义（x2=0.362,P＞0.05）.联合手术组中IOL偏斜度较大患眼数量少于单纯手术组,术后不同IOL偏斜度患眼数量比较差异有统计学意义（x2=9.858,P＜0.05）.联合手术组中并发症患眼数量少于单纯手术组,2个组不同并发症患眼数量比较,差异有统计学意义（x2=7.200,P＜0.05）.2个组不同手术操作时间患眼数量比较,差异无统计学意义（x2=0.658,P＞0.05）.结论 IOL睫状沟植入联合IOL光学部周边后囊孔嵌顿术对于治疗儿童外伤性白内障更为有效,并发症少,IOL偏斜度低.

HbA_(1C)水平与白内障术后黄斑中心凹视网膜厚度的相关性

目的:探讨不同HbA_(1C)水平糖尿病患者白内障手术前后黄斑中心凹视网膜厚度变化情况。方法:分析2013年10月至2016年10月接受超声乳化白内障手术的糖尿病患者216例(326眼),根据HbA_(1C)分三组,术前进行空腹血糖、HbA_(1C)测定、视力、裂隙灯、间接检眼镜、眼压和AB超检查。术前1 d、术后1周、1个月和3个月重复OCT检查测定黄斑中心凹视网膜厚度。结果:HbA_(1C)≥9%组术后1周视网膜厚度虽然仍处于正常范围,但明显高于术前(t=-2.086 2,P=0.038 6),其余各组术前、术后1周、1个月和3个月时黄斑中心凹视网膜厚度比较差异无统计学意义,组间比较视网膜厚度的差异也无统计学意义。术后4例黄斑囊样水肿(1.2%),均出现在HbA_(1C)≥9%组(5.1%)。结论:术前HbA_(1C)≥9%的患者发生黄斑囊样水肿的概率明显升高,白内障术后黄斑中心凹视网膜厚度变化与HbA_(1C)的有一定的相关关系。

后天麻痹性斜视的临床治疗进展

后天麻痹性斜视是一种常见的眼科疾病,因其病因较为复杂且病情多变,常对患者的工作和生活质量产生诸多不良的影响。随着近年来对麻痹性斜视的关注度的增加以及研究的不断推进,人们对麻痹性斜视的了解更加深入。就近年来国内外文献进行总结,并对麻痹性斜视治疗的新进展作出综述。

视网膜神经节细胞无血清上清培养液诱导大鼠视网膜干细胞的分化

目的探讨视网膜神经节细胞无血清上清培养液对视网膜干细胞分化的影响。方法分离大鼠视网膜干细胞和视网膜神经节细胞;采用免疫荧光法鉴定体外培养的大鼠视网膜干细胞与视网膜神经节细胞,视网膜干细胞以Nestin抗体进行鉴定,视网膜神经节细胞以Thy-1抗体进行鉴定;以视网膜神经节细胞无血清上清培养液培养视网膜干细胞,以不加入条件培养液培养的视网膜干细胞为对照组,收集分化细胞,采用q PCR法检测Nestin、Pax6、Thy-1及Brn-3的基因表达。结果培养的视网膜干细胞Nestin抗体染色阳性,视网膜神经节细胞Thy-1抗体染色阳性。培养视网膜干细胞72 h后,与对照组相比,无血清上清培养液组细胞Nestin和PAX6基因相对表达量降低,差异均有统计学意义(均为P<0.000 1);Thy-1和Brn-3基因相对表达量升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论视网膜神经节细胞无血清上清培养液能够诱导视网膜干细胞分化为视网膜神经节样细胞。

年龄相关性黄斑变性的发病机制与抗氧化治疗

年龄相关性黄斑变性(ARMD)好发于50岁及以上中老年人,呈进行性发展,可导致单眼或双眼部分甚至完全性视力丧失。虽然目前其发病机制尚不明确,但已有数据表明氧化应激在ARMD的发病过程中起到了重要作用。近年来对ARMD抗氧化机制方面的研究逐渐成为研究热点,本文就氧化应激介导ARMD的发生机制以及ARMD抗氧化剂的应用作一简要综述。