精子脱尾温育降低小鼠卵胞浆内单精子显微注射的受精率

目的脱尾的精子头注射是小鼠显微授精的一种常用方法,脱尾对精子造成的膜损伤是否影响卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的受精率和卵裂率尚不清楚,该研究拟初步探索精子的机械脱尾等膜损伤以及不同温育条件对ICSI的受精率和卵裂率的影响。方法首先,用机械吹打法处理小鼠精子悬液,使得部分精子脱尾,于不同温度下孵育,观察孵育温度对ICSI的受精率和卵裂率的影响;然后比较精子化学破膜与吹打脱尾处理后温育一定时间对显微授精的受精率、卵裂率的影响。结果相对于对照组,对小鼠精子进行吹打脱尾,经37℃下温育12 h后的显微授精双原核形成率和卵裂率显著下降(75.6%vs 15.1%,P<0.01;91.1%vs 18.9%,P<0.01),而4℃下温育12 h的结果未见正常受精率和卵裂率受显著影响。用Triton-100精子进行化学破膜后温育,尽管其没有机械脱尾法效果显著,也同样明显降低了受精率和卵裂率(P<0.01)。结论该研究初步提示,精子脱尾等破膜损伤在经37℃较长时间温育后会降低小鼠ICSI的受精率,常规小鼠ICSI操作中小鼠精子批量脱尾处理后不宜在37℃下放置过久。