上海市郊区儿童过敏性疾病过敏原的研究

目的分析引发上海市郊区儿童过敏性疾病过敏原的分布特点。方法对800例上海市郊区过敏性疾病患儿(郊区病例组)、100名郊区健康儿童(郊区正常对照组)和450例上海市城区过敏性疾病患儿(城区病例组)进行过敏原皮肤点刺试验(SPT)。将郊区病例组患儿按年龄分为婴幼儿组、学龄前组和学龄组,比较各组SPT及各过敏原阳性率。结果郊区病例组SPT阳性率(73.38%)高于郊区正常对照组(26.00%),低于城区病例组(80.22%),差异均有统计学意义(P<0.05)。郊区病例组患儿主要过敏原为粉尘螨和屋尘螨,阳性率分别为57.88%和59.13%。除杂草和橡胶外,郊区病例组各过敏原阳性率与其他两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各年龄组郊区过敏性疾病患儿SPT阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上海市郊区过敏性疾病患儿的主要过敏原为屋尘螨和粉尘螨;郊区过敏性疾病患儿SPT阳性率低于城区患儿,并与年龄有一定相关性。

磷酸氯喹诱导U937细胞凋亡机制的研究

目的将磷酸氯喹作用于白血病细胞株U937,观察其对白血病细胞凋亡的影响;并研究磷酸氯喹是否通过逆转凋亡相关基因PNAS-2蛋白在白血病细胞中异常的亚细胞定位,从而促进细胞凋亡的机制。方法将不同剂量的磷酸氯喹加入体外培养至对数生长期的白血病细胞株U937培养液中。MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡,同时观察磷酸氯喹对U937细胞中PNAS-2蛋白亚细胞定位的影响。结果50μg/mL磷酸氯喹可显著促进U937细胞发生凋亡,并使白血病细胞中PNAS-2蛋白的异常亚细胞定位发生改变。结论磷酸氯喹对白血病细胞株U937有促进凋亡的作用,其凋亡机制可能是使PNAS-2蛋白在白血病细胞中异常的亚细胞定位恢复正常,对于临床治疗白血病的具有潜在的应用价值。

硫辛酸对神经细胞老化过程中细胞凋亡的抑制作用

目的分析硫辛酸对神经细胞老化进程中细胞凋亡的影响。方法以无血清培养液培养大鼠神经母细胞瘤细胞,建立实验性神经细胞老化模型。建模后细胞随机分为实验组和对照组,分别以含100μmol/L硫辛酸无血清培养液和单纯无血清培养液培养,于培养第5、10、15天时,运用MTT法检测细胞存活率,AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与对照组比较,培养第5、10、15天时实验组细胞存活率显著升高,分别为(212.48±12.26)%vs(100.00±14.80)%、(200.55±28.33)%vs(75.45±10.79)%和(96.81±14.50)%vs(28.54±3.14)%;细胞凋亡率则明显降低,分别为(8.60±1.96)%vs (21.46±1.08)%、(18.6±0.60)%vs(30.38±3.25)%和(28.20±3.83)%vs(47.87±5.60)%;两组间细胞存活率和凋亡率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论硫辛酸可抑制神经细胞老化过程中的细胞凋亡,提高细胞存活率。

分化抑制因子1通过诱导上皮间质转化促进肝癌HepG2细胞的侵袭性

目的分化抑制因子1(inhibitor of differentiation-1,Id-1)作为一种新的癌基因,其过表达可以影响肿瘤的发生发展。文中探讨肝癌HepG2细胞中高表达Id1对E-钙黏蛋白(E-cadherin)与波形蛋白(Vimentin)及在HepG2细胞中对迁移、侵袭能力的影响。方法将已构建好的PIRES-EGFP-Id1质粒转染于肝癌HepG2细胞,采用Western blot方法检测转染48h后细胞中Id1蛋白的表达;实时定量PCR和免疫荧光方法检测E-cadherin和Vimentin的表达;利用细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果转染组Id1蛋白表达明显上调,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);同时进行实时定量PCR和免疫荧光检测,发现转染组E-cadherin表达下降,而Vimentin表达明显上调(P<0.05);划痕实验显示高表达Id1的HepG2组48h细胞生长迁移能力明显增强(P<0.05);侵袭实验发现转染Id1质粒组细胞穿膜数为(32.00±4.04)个,明显多于转染的空质粒组(10.67±3.84)个和空白对照组(9.67±2.72)个,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Id1高表达可以诱导HepG2细胞上皮向间质转化,提高肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭能力,可通过调节E-cadherin和Vimentin发挥作用。