药物的免疫原性分析方法浅析

药物的免疫原性评价是临床安全性评价的重要组成部分,药物引起的抗体反应会影响药动学、药效或毒性反应。ADA的产生会缩短或延长药物半衰期,改变药物在体内的生物分布。免疫原性的分析在复杂的血清基质中进行,涉及到多学科多领域。分析方法及检测水平也存在不一致的情况,需要规范实验操作,提高检测的有效性。免疫原性评价是药物开发阶段中安全与疗效评价的需要,也是申报提交的关键要素。开发有效的免疫原性检测方法意义重大。

抗体药物残留蛋白质A定量检测试剂盒的开发

目的制备能特异识别蛋白质A的多克隆抗体(多抗), 以构建快速、高效、准确的抗体药物中残留蛋白质A定量检测试剂盒。方法使用标准蛋白质A样品进行动物免疫, 获得特异性识别蛋白质A的兔多抗;标记兔多抗并进行抗体配对测试, 构建夹心ELISA试剂盒, 优化试剂盒检测样品的处理方法, 并对试剂盒的稳定性、耐用性、钩状效应、适用性等进行验证。结果多抗制备前对蛋白质A进行热处理11 min时释放率最高, 1#多抗作为包被抗体和2#-Bio作为检测抗体组合构建的试剂盒能够准确检测出蛋白质A, 灵敏度达0.03 ng/ml, 在4 ℃条件下可保存1年。不同反应时间、不同反应温度下的标准曲线的决定系数均大于0.99。检测7款产品的回收率均在80%~120%之间, 对应标准曲线的决定系数均大于0.99。高浓度测试试剂盒时所得光密度值高于标准曲线最高浓度10 ng/ml的值, 待申报样品检测值与回算值一致。结论成功构建了残留蛋白质A的定量检测试剂盒, 该试剂盒的稳定性、耐用性、适用性良好, 且无钩状效应。