体外培养的不同亚型肝癌细胞差异蛋白的初步筛查

目的 分析体外培养的不同亚型肝癌细胞株蛋白质表达差异 ,筛选肝癌的标志蛋白。 方法 采用表面增强激光解吸离子化 (SELDI)蛋白质芯片技术检测了两种肝癌细胞株 (肝细胞癌 ,SMMC 772 1和肝内胆管细胞癌 ,IHCCC 981 0 )以及正常肝细胞 (L1 0 2 )的蛋白质谱。选用阴离子交换柱处理上述细胞总蛋白 ,用 6种不同pH的洗脱液洗脱柱床 ,通过改变洗脱液的pH值将总蛋白分成不同pI范围的 6组。每个组分用WCX2和IMAC3两种芯片检测。采用PBSII C型蛋白质芯片阅读机读取数据 ,获得的数据采用Ciphergen公司的ProteinchipSoftware3.0 .2软件分析。 结果 与L0 2细胞相比 ,有 1 2个蛋白质在两种肝癌细胞株中均出现明显的变化 ,其中 4个差异蛋白在肝癌细胞中高表达 ,8个差异蛋白在肝癌细胞中低表达。在对两种肝癌细胞株的蛋白质谱比较时发现 ,不同亚型的肝癌细胞有其各自的标志蛋白 ,其中 1 1个蛋白分子在SMMC 772 1细胞中高表达 ;在IHCCC 981 0细胞中 7个蛋白分子高表达 ,1 0个蛋白分子低表达。 结论 不同亚型肝癌细胞与正常肝细胞蛋白质谱比较时有共同的差异蛋白 ,同时不同亚型肝癌细胞之间的蛋白质谱表达也有差别。

医源性胆道狭窄的治疗现状

伴随腹腔镜胆囊手术的普遍开展,医源性胆道损伤的发病越来越多,如何选择恰当的手术时机和处理方式,是临床医生需要面对的问题,尽管20年来对医源性胆管损伤的治疗方法层出不穷,但是没有一种方法尽善尽美.我们应该对每一种方法选择性的对待,个体化治疗以期达到较好的临床效果。

核不均一核糖核蛋白A1的表达与肝癌肝移植患者肿瘤发生与转移的关系

目的探讨肝癌组织中核不均一核糖核蛋白A1（HnRNPA1）的表达与肝癌行肝移植治疗后肿瘤复发与转移的关系。方法应用蛋白印迹法检测切除的肝癌组织、癌旁组织和肝正常组织中HnRNPA1的表达（n=16），用免疫组化方法分析其表达与移植后（n=141）肝癌复发及转移的关系和意义。结果肝癌组织的HnRNPA1蛋白阳性率为75．0％（12／16），癌旁组织为18．8％（3／16），两者差异有统计学意义（P〈0．01）。肝癌组织的HnRNPA1蛋白表达水平（0．680±0.149）明显高于癌旁组织（0．420±0．060）和正常肝组织（0．270±0．046，P〈0．01）。HnRNPA1表达与肝癌直径、TNM分期、血管侵犯、肿瘤包膜等相关（P〈0．01），与肝癌其他临床病理学参数无关（P〉0．05）。HnRNPA1高表达组患者肿瘤复发率明显高于HnRNPA1低表达组（χ^2=15．577，P〈0．01）；生存率明显低于HnRNPA1低表达组（χ^2=6．309，P〈0．05）。结论HnRNPA1蛋白水平在肝癌组织中表达上调，且与肝癌肝移植术后肿瘤复发转移有关，影响肝癌肝移植患者预后。

胃癌高表达转录因子1在肝细胞癌中的表达及其对患者预后的影响

目的探讨长链非编码RNA胃癌高表达转录因子1（GHET1）在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与患者预后、肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的关系。方法收集2016年3月至5月中国人民解放军福州总医院手术的20例HCC患者的肝癌和癌旁组织。回顾性收集2012年6月至2013年12月182例HCC患者肝癌组织和临床资料，根据GHET1表达中位值分为GHET1高表达组和低表达组，各91例。Huh7、HepG2细胞分为：空白对照组（Con）用无血清培养基，siRNA．GHET1组转染siRNA—GHET1．阴性对照组（siRNA．NC）转染阴性对照序列。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测GHET1表达，CCK-8、Transwell实验和Western印迹分析GHET1对HCC细胞的影响。结果与癌旁组织比较，肝癌组织中GHET1的mRNA相对表达明显升高；与L02细胞比较，Huh7以及HepG2细胞GHET1的mRNA表达升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。GHET1高表达组肿瘤〉5cm、有血管侵犯、AFP〉400μg／L、EdmonsonI级、肿瘤无包膜比例较低表达组升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。生存分析显示GHET1高表达的HCC患者比低表达的患者预后差。多因素Cox回归分析显示，GHET1高表达、有血管侵犯（HR=2．067，95％CI：1．350～3．162）、无肿瘤包膜是HCC患者复发的独立预测因素。Huh7和HepG2细胞转染后，与Con和siRNA-NC组比较，siRNA-GHET1组增殖明显下降；与siRNA—NC组比较，siRNA-GHET1组迁移与侵袭能力下降，E-钙黏蛋白表达升高，纤连蛋白和波形蛋白表达降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GHET1在肝癌组织和细胞中表达升高，增加肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，为HCC患者预后的独立预测因素，是临床治疗的潜在靶点。

公民死亡器官捐献肝移植术后早期感染及细菌耐药性分析

目的探讨不同来源供肝对移植术后患者早期感染和细菌耐药性的影响。方法回顾性分析2009年1月至2017年12月在厦门大学附属东方医院接受原位肝移植的296例患者临床资料。其中男216例,女80例;平均年龄(49±13)岁。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。根据供肝来源不同将其分为两组,司法途径标准供肝(SCD)组197例,公民死亡器官捐献供肝(DCD)组99例。采用倾向评分匹配(PSM)平衡两组术前、术中协变量,分析两组术后早期感染情况和细菌耐药性,率的比较采用χ2检验。结果经PSM后两组均为89例。DCD组患者2个月内总体感染率为60%(53/89),明显高于SCD组的43%(38/89)(χ^2=5.059,P<0.05)。其中DCD组腹腔感染率为47%(42/89),明显高于SCD组的33%(29/89)(χ^2=3.960,P<0.05);而DCD组和SCD组肺部感染率分别为30%(27/89)、24%(21/89),差异无统计学意义(χ^2=1.027,P>0.05)。DCD组和SCD组患者在术后分别培养出81、66例病原体,其中细菌占病原体的百分率分别为81%(66/81)、86%(57/66),细菌均以革兰氏阳性菌为主。DCD、SCD组患者多药耐药率分别为39%(26/66)、47%(27/57),差异无统计学意义(χ^2=1.306,P>0.05)。结论与SCD来源供肝相比,DCD移植术后腹部感染率增加,但并不增加多药耐药细菌的感染率和肺部感染发生率。

IgG4相关性胰腺炎和胆管炎临床诊疗分析

目的 探讨梗阻性黄疸中IgG4相关性胰腺炎和胆管炎发病特点及诊疗经验.方法 选取2006年3月-2016年8月中国人民解放军陆军总医院收治的16例IgG4相关性胰腺炎和胆管炎患者作为观察组,通过临床症状、影像特征表现及病理学征象对病例进行回顾性分析.选取同期IgG4值正常,无相关免疫缺陷性疾病的手术治疗的胆管癌或胰腺癌患者10例作为对照组.观察两组患者血清IgG4值.患者出院后采用门诊随访,每6个月复查血清胆红素、肝酶谱、血清IgG4、自身抗体、糖类抗原19-9和癌胚抗原及影像检查.正态分布的计量资料以均数±标准差((-x)±s)表示,组间比较用t检验.计数资料以例(％)表示.结果 观察组患者中黄疸68.75％ (11/16),腹痛、腹胀43.75％ (7/16),乏力及食欲不振62.50％(10/16),体重减轻37.50％(6/16).影像检查方法相比,MRCP对胆管及胰管形态征象的显示优势显著,MRI对胰腺肿胀及周边水肿带的显示优于另外3种方法.血清IgG4值是本病诊断的重要依据,观察组12例血清IgG4平均值为(105.7 ±21.6) g/L,对照组10例患者血清IgG4平均值为(9.1 ±0.05) g/L,两组间相比差异明显具有统计学意义(P =0.004).IgG4相关性胆管炎病理特征是大量淋巴细胞、浆细胞浸润,胆管有纤维化,闭塞性静脉炎以及IgG4阳性浆细胞浸润.观察组随访16例,12例存活,失访4例,随访最长6年,除3例患者在激素治疗期间再次出现黄疸行外科介入外,其余患者复查临床症状消失,各项指标均正常.结论 IgG4相关性胰腺炎和胆管炎的诊断需慎重,血清IgG4检查是重要鉴别指标,影像资料的判断是鉴别的重要手段.治疗以激素为主,在激素治疗黄疸消退不佳时应积极进行外科介入为好.