他汀类药物治疗慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压的Meta分析

目的系统评价他汀类药物(statins)治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺动脉高压(PH)的临床疗效。方法系统检索PubMed、CBM、维普、万方等数据库,全面收集他汀类药物治疗慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压的随机对照试验(RCT)。按纳入排除标准筛选文献、提取资料和进行方法学质量评价,并采用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共纳入7个RCT,共计467例患者。包括2个安慰剂对照试验和5个非安慰剂对照试验。Meta分析结果显示:①statin能改善患者平均肺动脉压(mPAP)值[MD=-3.83mmHg,95%CI(-5.22,-2.43)],肺动脉收缩压(PASP)值[MD=-5.66mmHg,95%CI(-7.15,-4.16)],与对照组比较,差异有统计学意义。②statin能显著降低患者内皮素-1(ET-1)值[MD=-3.51pg/ml,95%CI(-4.77,-2.55)]、增高一氧化氮(NO)值[SMD=1.06,95%CI(0.81,1.31)],与对照组相比,差异有统计学意义。③statin能改善患者第一秒用力呼气量占预计值的百分比(FEV1%)[MD=9.79,95%CI(6.05,13.52)]。结论他汀类药物应用于COPD合并PH患者能显著改善患者的肺动脉压,改善肺功能,提高临床疗效。

咯血的介入治疗

支气管动脉栓塞术是治疗咯血的有效方法之一。支气管动脉栓塞术主要适用于药物治疗无效的大咯血和反复咯血,对于药物治疗后咯血症状缓解的患者,如果术前评估考虑仍然存在大咯血复发风险,也应积极施行支气管动脉栓塞术。异位栓塞是支气管动脉栓塞术的主要手术并发症。大咯血的急诊手术具有非常高的手术风险,需积极防范和及时处理。

脑干血管母细胞瘤的显微外科治疗(附15例报告)

目的:探讨脑干血管母细胞瘤的诊断及显微外科手术方式、技巧与效果。方法:回顾性分析15例脑干血管母细胞瘤患者的影像学资料、手术方式、治疗效果。结果:根据肿瘤在MRI上的表现可分为囊肿型和实体型:囊肿型4例,实体型11例。15例患者病灶均于显微镜下全切,无手术死亡,术后病理学检查证实为血管母细胞瘤。8例患者术后神经功能障碍得到改善,4例症状加重,3例术后1周左右死亡,死亡原因均为脑干功能障碍。结论:MRI对脑干血管母细胞瘤的定位、定性诊断具有重要意义,对手术方式的选择具有重要参考价值。采用显微外科技术切除脑干血管母细胞瘤是提高治疗效果的有效方法。

乙肝病毒前S/S抗原的重组表达质粒对HBV转基因小鼠的免疫治疗效应

目的:观察重组表达质粒pcDNA3.1-S2S和pcDNA3.1-S1S2S对HBVDNA复制和抗原表达的抑制效果.方法:以能表达乙肝表面抗原主蛋白S(HBsAg)的重组真核表达质粒为骨架,构建了分别含有HBV前S1抗原和/或前S2抗原编码基因的pcDNA3.1-S1S2S,pcDNA3.1-S2S,并各以100μg肌肉接种C57BL/6HBVDNA转基因小鼠,2,4wk后各加强免疫1次.然后动态检测小鼠血清HBVDNA水平的变化、抗-HBs和前S2抗体的诱生,以及肝组织内HBsAg、前S2抗原的消长情况.结果:小鼠肝组织内HBsAg,前S2抗原呈逐渐减弱的趋势,8wk后各有1/3的小鼠已不能检出.pcDNA3.1-S1S2S组接种后4,8,12wk抗-HBs阳转率分别为50%、67%、100%,明显高于pcDNA3.1-S2S组(17%、33%、50%)(P<0.05);而前S2抗体阳转率均低于17%.接种后8wk,12wk,pcDNA3.1-S1S2S组和pcDNA3.1-S2S组小鼠血清HBVDNA水平明显下降,均低于自身接种前、接种后4wk以及同期对照组(P<0.05).结论:重组表达质粒pcDNA3.1-S2S和pcDNA3.1-S1S2S接种,能够抑制转基因小鼠体内的HBV复制,而重组质粒中S1基因的共表达使抑制作用得到增强.

特发性肺纤维化的治疗展望

特发性肺纤维化(IPF)是一种组织学和(或)影像学表现为寻常型间质性肺炎,病因不明,呈慢性进行性加重的间质性肺疾病。IPF好发于老年患者,在50岁以下人群中罕见,男性发病率高于女性。临床症状包括咳嗽、呼吸困难和体力活动受限。疾病进展过程难以预测,但通常进行性恶化,疾病急性加重可能致命。IPF目前尚无有效的治疗药物,其预后不良,IPF患者的中位生存期限为确诊后2.5～3.5年。近年来,随着细胞和分子生物学的发展,人们对IPF的形成机制有了更深层次的理解,肺纤维化新的治疗靶点应运而生。现就特发性肺纤维化的治疗进展做一述评。

人脐血干细胞移植建立人鼠嵌合体动物模型实验研究

目的探讨人脐血干细胞移植后,在BALB/C小鼠肝内建立人鼠嵌合体模型的可能性。方法分离男婴脐血单个核细胞,将该细胞悬液注射至肝部分切除的雌性BALB/C小鼠肝内;以磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)注射肝部分切除小鼠肝内为肝切除对照组,以仅作腹腔切开为空白对照组。于术后7、14天分别处死人脐血干细胞移植组、肝切除对照组和空白对照组各8只小鼠,眶底静脉丛采血检测肝功能;取肝组织原位杂交检测Y染色体(移植细胞标记)。结果术后7、14天人脐血干细胞移植组小鼠注射肝叶与非注射肝叶内可检出Y染色体阳性细胞,并可见嵌入肝板。结论人脐血干细胞移植BALB/C小鼠可以建立人鼠嵌合体动物模型。

Pristane诱导BALB/c狼疮鼠模型的实验研究

目的建立系统性红斑狼疮小鼠模型,探讨环境因素在发病机制中的地位。方法雌性BALB/c小鼠30只,分为两组,造模组一次性腹腔注射Pristane0.5mL,对照组一次性腹腔注射0.5mL生理盐水,注射前及注射后每月定期检测抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)抗体,及随机尿蛋白定量,8个月时处死动物,观察肾脏HE染色及直接免疫荧光染色后镜下变化。结果造模组ANA和抗dsDNA抗体分别于造模3个月和4个月时开始出现;8个月时,阳性率分别为87.5%和47.8%;62.5%的小鼠出现≥+(300mg/L)蛋白尿;肾脏组织HE染色及直接免疫荧光染色见肾小球肾炎表现。对照组中各有1只小鼠分别为ANA、抗dsDNA抗体低滴度阳性;随机尿蛋白定量均≤+;肾脏组织未见病理改变。抗dsDNA抗体与蛋白尿之间存在一定相关性(r=0.538,P=0.003)。结论Pristane成功诱导系统性红斑狼疮动物模型。

糖化重组生存素腺病毒疫苗抗肿瘤作用的实验研究

背景与目的:生存素在调控细胞凋亡和有丝分裂过程中起着重要作用,在正常分化的组织中不表达或表达极低,而在胚胎组织和大部分肿瘤组织中广泛表达,而这一特点为恶性肿瘤的基因治疗提供了很好的靶标。本研究制备糖化重组生存素腺病毒疫苗,观察其抗肿瘤作用并探讨其作用机制。方法:将重组生存素腺病毒和甘露聚糖在氧化条件下偶联,同时建立小鼠结肠癌和Lewis肺癌模型,以糖化重组生存素腺病毒疫苗治疗荷瘤小鼠,观察肿瘤体积和小鼠生存时间。对小鼠肿瘤组织作TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡。为了检测疫苗的保护作用,预先以糖化重组生存素腺病毒疫苗免疫接种小鼠,或合用抗CD4、CD8和NK单克隆抗体阻断相应的淋巴细胞亚群,再接种肿瘤,观察小鼠肿瘤生长情况。结果:糖化重组生存素腺病毒疫苗治疗组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,无明显不良反应发生,小鼠的生存时间明显延长,肿瘤细胞凋亡明显增加。同时,糖化重组生存素腺病毒疫苗能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫,这一免疫反应依赖于CD4和CD8淋巴细胞,也部分依赖于NK细胞。结论:糖化重组生存素腺病毒疫苗能诱导机体产生特异性的主动免疫反应,诱导肿瘤细胞凋亡,具有明确的抗肿瘤作用,值得进一步研究。

1,3-二氢-1,3-二酮-2-氢-异吲哚衍生物的合成研究

目的设计并合成沙利度胺的衍生物。方法氨基酸苄酯氨解N-邻苯二甲酰基-L-谷氨酸酐,所得产物经氢化脱苄后再与氨气成铵盐即得1,3-二氢-1,3-二酮-2H-异吲哚衍生物。结果成功地合成了4个未见文献报道的沙利度胺衍生物。并进行了结构表征。结论利用本方法可以在温和的条件下获得较高产率的目标产物。

慢性阻塞性肺疾病生存质量评估研究进展

简要介绍用于评估慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者生存质量(QOL)的各种量表,阐述影响COPD患者生存质量的因素和QOL在评价COPD临床疗效上的进展,展望COPD患者生存质量研究的前景。

异种MMP-2 DNA疫苗对小鼠结肠腺癌细胞CT26生长及转移的实验研究

目的通过对荷瘤裸小鼠进行异种MMP-2 DNA疫苗治疗结肠腺癌,观察其治疗效果,并初步探讨其作用机制。方法制备纯化异种MMP-2 DNA疫苗,裸鼠腋下注入大鼠CT26结肠腺癌细胞株1×106/只,建立BALB/C裸小鼠结肠腺癌动物模型,待肿瘤长至约1 cm(接种后第16天)开始治疗。异种MMP-2 DNA疫苗治疗组小鼠自荷瘤后次日开始后肢肌肉注射c-MMP-2 DNA疫苗(1 mg/ml),100μl/次,每周一次,连续4周。观察瘤体大小、测量肿瘤重量;免疫组化法测肿瘤组织微血管密度;Tunel法检测各组肿瘤细胞凋亡指数;HE染色观察重要器官组织坏死情况。结果异种MMP-2 DNA疫苗治疗结肠腺癌能明显抑制肿瘤组织的生长,并延长荷瘤小鼠的生存期,免疫组化显示治疗组小鼠的肿瘤组织中微血管密度明显减少;Tunel法显示凋亡指数明显增多;HE染色观察肿瘤组织坏死明显增多。结论异种MMP-2 DNA疫苗治疗能够抑制肿瘤生长、抑制肿瘤血管生成,是一种独特的抗肿瘤治疗途径。

聚乙二醇干扰素α-2a治疗慢性乙肝1年内HBsAg阴转4例临床分析

[目的]报道4例HBeAg(+)慢性乙型肝炎患者经聚乙二醇干扰素α-2a治疗,1年内出现HBsAg阴转。[方法]对4例慢性乙型肝炎患者采用聚乙二醇干扰素α-2a,或聚乙二醇干扰素α-2a与恩替卡韦序贯疗法进行抗病毒治疗;定期监测其生化学、病毒学、及血清学指标。[结果]4例患者均于治疗1年内出现血清HBVDNA阴转、HBeAg/抗-HBe血清学转换和HBsAg阴转,且有一例出现HBsAg/抗-HBs血清学转换;经随访3～9月,上述检测结果均保持稳定。[结论]聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎能有效地抑制HBV复制,有的患者可望获得HBeAg/抗-HBe血清学转换和HBsAg阴转,甚至抗-HBs阳转的疗效。

短发夹RNA介导RNA干涉的实验学控制研究

采用载体介导的RNA干涉 (RNA interference,RNAi)技术抑制HEK293H细胞中外源报告基因的表达,并设置一系列的实验学控制以探讨其在RNAi应用研究中的价值及意义.运用pAVU6+27,构建了针对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的一系列短发夹RNA表达载体,并用脂质体法转染于HEK293H细胞中,检测EGFP mRNA及蛋白表达水平.瞬时转染48h后, RT-PCR及Western blot结果表明,针对EGFP三个靶点的干涉质粒均不同程度地抑制细胞内EGFP的表达,但仅转录正反义链、链内1-2个碱基错配的干涉载体不能介导特异的RNAi效应.此外,共转染实验结果表明干涉质粒两两间无相互增强或抑制的RNAi效应.在此基础上,通过G418筛选生成了HEK293H EGFP稳定表达株,在转染后不同时间点检测EGFP mRNA及蛋白表达变化,发现RNAi 效应在一定时间范围内呈现明显的时间依赖性.这些结果表明,有效的实验控制在RNAi研究中十分必要,具有重要的参考价值.基于载体表达的RNAi作用呈现明显的时间依赖性效应,为RNAi应用研究提供了一定的参考及借鉴价值.

Kca3.1通道及其与多个系统疾病关联的研究进展

Kca3.1通道是重要的钙激活钾离子通道,广泛分布于人体多种类型细胞(上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、免疫细胞等)并参与调控细胞增殖、迁移、凋亡等细胞活动。目前研究发现Kca3.1通道与恶性肿瘤、气道重塑、血管缩窄、肾纤维化、贫血等多种疾病密切相关。本文通过对Kca3.1通道相关文献的复习,从生物学特征、电生理特点、作用机制(细胞增殖、迁移、分化、凋亡)等方面对Kca3.1通道进行综述,进一步阐述Kca3.1通道参与调控多个系统疾病的发生发展,为之后进一步研究提供参考。

肿瘤免疫基因治疗进展

肿瘤免疫基因治疗包括肿瘤细胞疫苗、免疫细胞疫苗、多肽疫苗、病毒细菌载体疫苗和DNA疫苗等。构建新型载体、提高治疗的靶向性、寻找新的靶基因、正确评价临床疗效及简化疫苗的制备过程是今后可能发展的方向。

鲍曼不动杆菌对米诺环素等抗菌药物的耐药性研究

目的初步探讨米诺环素等16种临床常用抗菌药物对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性,为临床合理用药提供实验依据。方法四川大学华西医院抗感染药物研究室分离自临床感染患者的115株非重复多重耐药鲍曼不动杆菌菌株,采用琼脂二倍稀释法进行16种临床常用抗菌药物体外抗菌活性测定。结果米诺环素和多黏菌素B对鲍曼不动杆菌有很好的抗菌活性,MIC50分别为4μg/mL与0.25μg/mL,MIC90分别为16μg/mL与4μg/mL,亚胺培南等碳青霉烯类抗生素对多重耐药的鲍曼不动杆菌也有较强的抗菌活性,MIC50为2μg/mL,MIC90为32μg/mL。结论米诺环素、多黏菌素B、亚胺培南对临床分离鲍曼不动杆菌具有良好的抗菌活性,可作为治疗选择药物。

几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法的比较

本研究对蛋白质染色法进行比较和分析,以求获得满足蛋白质组研究所需的适宜的蛋白质检测法。实验采用2-D电泳分离急性早幼粒白血病细胞株NB4的全蛋白及1-D电泳分离蛋白质分子量标准物,从蛋白质检测的灵敏性、质谱兼容性、操作的简便性等角度,比较了传统考马斯亮蓝染色法、胶体考马斯亮蓝染色法、改良考马斯亮蓝染色法和银染法4种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响,探讨了影响蛋白质染色与鉴定的影响因素。结果显示,银染检测灵敏度最高,但质谱鉴定相容性差,鉴定率近10%;改良考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高,可达4ng/spot,质谱鉴定率可接近55%。结论:改良考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高,与质谱兼容好,能满足蛋白质组研究需要。

人参皂甙Rg1对糖尿病肾病大鼠TNF-α、MCP-1表达的影响

目的观察人参皂甙Rg1对糖尿病肾病大鼠尿蛋白以及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、人参皂甙Rg1治疗组、厄贝沙坦(ARB)治疗组。采用链脲佐菌素(65mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。于动物处死前1d测血糖,用代谢笼收集24h尿液,记录尿量行24h尿蛋白定量和肾功检查。光镜及电镜观察肾组织的病理变化。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血MCP-1、血及肾TNF-α水平;免疫组织化学检测肾脏组织MCP-1蛋白的表达;实时荧光定量PCR(real-ti me PCR)检测肾脏组织中MCP-1、TNF-α基因水平的表达。结果模型组大鼠镜下见肾小球体积增大,基底膜增厚及系膜物质增多,足细胞较正常对照组减少(P<0.01)。两治疗组与模型组分别比较,肾小球基底膜未见明显增宽,足细胞数增加(P<0.05)。两治疗组之间无明显差异。模型组大鼠血糖、24h尿蛋白、血肌酐水平升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。两治疗组与模型组相比,血糖水平无明显变化(P>0.05),但24h尿蛋白、血肌酐水平均有所改善(P<0.05)。免疫组织化学、ELISA和real-ti me PCR结果表明,与对照组相比,模型组MCP-1、TNF-α的表达增加(P<0.05),两治疗组MCP-1、TNF-α表达较模型组减少(P<0.05),但两治疗组无明显差异。相关性分析提示MCP-1、TNF-α水平与24h尿蛋白水平(r=0.7802,0.6963)、肾小球硬化指数(r=0.8296,0.7413)、足细胞基底膜厚度(r=0.7678,0.6701)成正相关(P<0.05)。结论人参皂甙Rg1能降低TNF-α、MCP-1的水平,改善糖尿病肾病大鼠足细胞及肾脏的病理损害,能显著减少糖尿病大鼠24h尿蛋白,具有一定的肾保护作用。